1、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文 5 第一部分 遺傳性凝血因子Ⅻ缺陷癥的基因診斷及分子發(fā)病機(jī)制研究 前言 遺傳性凝血因子Ⅻ(Coagulation factor Ⅻ, FⅫ)缺陷癥患者無(wú)臨床出血表現(xiàn)，該病在人群中的發(fā)病率還不十分清楚?；颊叨嘣谛g(shù)前凝血篩查時(shí) APTT 延長(zhǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)。FⅫ缺陷癥最早由 Ratnoff 等人于 1955 年報(bào)道，呈常染色體隱性遺傳，部分患者可表現(xiàn)為顯性遺傳， 國(guó)內(nèi)僅見(jiàn)幾例遺傳性 FⅫ缺陷癥表型檢測(cè)的報(bào)道[1-3]

2、。 據(jù)最新 FⅫ數(shù)據(jù)庫(kù)資料統(tǒng)計(jì)（2010.4） ，國(guó)際已報(bào)道的遺傳性 FⅫ缺陷的基因突變只有 21 種（http://www.hgmd.org/） ，主要為錯(cuò)義突變和無(wú)義突變，占 62%；其次為剪接異常和小缺失。 本文對(duì)發(fā)現(xiàn)的 4 例遺傳性 FⅫ缺陷癥家系進(jìn)行臨床表型和基因型研究， 并探討其分子發(fā)病機(jī)制。 一、FⅫ的基因結(jié)構(gòu) FⅫ基因定位于 5 號(hào)染色體長(zhǎng)臂 5q33-qter，長(zhǎng)度為 12kb，由 14 個(gè)外顯子和 13個(gè)內(nèi)含子組

3、成[4]。FⅫc(diǎn)DNA 長(zhǎng)度為 2044bp，包括 49bp 的 5’端非翻譯區(qū)，1845bp 的氨基酸編碼區(qū)以及 150bp 的 3’端非編碼區(qū)，轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)在翻譯起始密碼子 ATG 上游49bp 處。FⅫ主要在肝臟合成，是一個(gè)由 596 個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈糖蛋白，分子中含糖量約 13.5%[5]。成熟 FⅫ分為數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)/功能區(qū)[6]：自氨基末端起分別是Ⅱ型纖維連接蛋白區(qū)（fibronectin Type 2）-表皮生長(zhǎng)因子（EGF）

4、區(qū)-Ⅰ型纖維連接蛋白區(qū)（fibronectin Type 1）-EGF 區(qū)-Kringle 區(qū)和催化區(qū)（圖 1）。 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文 7 面的糖蛋白Ⅰb-Ⅸ-Ⅴ復(fù)合物抑制凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集[9]。在體內(nèi) FⅫa 可被多種蛋白酶抑制物，如活化 C1 抑制物（C1-INH），α2-巨球蛋白（α2-M）及抗凝血酶等抑制。 材料與方法 一．遺傳性 FⅫ缺陷癥家系資料 家系 1 家系 1：先證者 1，53 歲女性，自幼無(wú)臨床出血

5、表現(xiàn)，月經(jīng)量不多，分娩時(shí)無(wú)異常出血。 無(wú)出血病和血栓家族史。 因“雙乳脹痛”就診。雙乳彩色多譜勒超聲（US） 、X 線(xiàn)乳腺攝影（MMG） 、核磁共振成像（MRI）顯示乳房腫塊和腋下淋巴結(jié)腫大，擬手術(shù)治療。術(shù)前常規(guī)凝血象檢查，發(fā)現(xiàn) APTT 120s，PT 12.1s；內(nèi)源途徑凝血因子檢測(cè)結(jié)果顯示 FⅧ：C 125%，F(xiàn)Ⅸ：C 105%，F(xiàn)Ⅺ：C 60.0%，F(xiàn)Ⅴ：C 119.5%，F(xiàn)Ⅻ：C 2.2%。家系圖見(jiàn)圖 2。 家系 家系 2：先

6、證者 2，30 歲女性，自幼無(wú)臨床出血表現(xiàn)，月經(jīng)量不多，分娩時(shí)出血量正常。無(wú)出血病和血栓家族史。因血管瘤手術(shù)前常規(guī)凝血項(xiàng)目檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)APTT132.8s，PT12.5s，凝血因子篩查結(jié)果顯示 FⅧ：C 85.7%，F(xiàn)Ⅸ：C 81.4%，F(xiàn)Ⅺ：C 97.9%，F(xiàn)Ⅴ：C 129.8%，F(xiàn)Ⅻ：C 6.8%。家系圖見(jiàn)圖 3。 家系 家系 3：先證者 3，27 歲女性，因不孕做試管嬰兒前常規(guī)凝血檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)APTT128s，PT11.8s，凝血因子