1、隨機重組多表位惡性瘧疾疫苗M ．R C A g 一1的制備及免疫保護性差異的機理研究博士研究生： 王健指導教師： 王恒教授學科專業(yè)： 病原生物學研究方向： 分子疫苗學申請學位： 醫(yī)學博士入學時間： 2 0 0 5 年9 月完成日期： 2 0 0 8 年5 月2 7 日所 院 ： 中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所北京協和醫(yī)學院基礎學院2 0 0 8 年6 月中國北京北京協和醫(yī)學院博士研究生學位論文隨機重組多表位惡性瘧疾疫苗M 。R C A g

2、 一1 的制備及免疫保護性差異的機理研究王健王恒( 中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所，北京協和醫(yī)學院基礎學院，1 0 0 0 0 5 ， 北京)摘要蚊媒傳播的瘧疾是全球最嚴重的三大傳染病之一。目前，全球約4 0 ％的世界人口處于罹患瘧疾的危險之中，而每年有5 億人受到瘧原蟲感染，約1 0 0 萬人死于惡性瘧疾，其中大部分是五歲以下的兒童和孕婦。由于惡性瘧原蟲對現有藥物的抗藥性不斷出現和蔓延，蚊媒對殺蟲劑抗藥性的產生等因素影響，瘧疾的防治成為

3、世界性的難題之一。瘧原蟲生活周期復雜，抗原具有階段特異性、蟲株差異性和高度變異性等特點，長期以來形成研制抗瘧原蟲疫苗的技術瓶頸。因此，針對惡性瘧原蟲不同生活時期的免疫反應特點，選取誘導產生多種免疫反應類型的不同抗原構建多表位疫苗已經成為研究瘧疾疫苗的熱點。在本課題組前期工作中，針對參與抗瘧原蟲紅內期感染的免疫類型，選擇了來自8 個惡性瘧原蟲抗原的1 1 個B 細胞和T h 細胞表位，利用e p i t o p e s h u f f l

4、 i n g ( 表位改組) 技術成功構建了隨機組合多表位惡性瘧疾疫苗M ，R C A g —l 。通過在B A L S ／c小鼠、 新西蘭兔、恒河猴的免疫原性和體內外保護性實驗觀察，證實其具有良好的免疫原性和免疫保護效果，是一個極具潛力的瘧疾候選疫苗。本研究首先按照國家生物制品研制標準，篩選出表達多表位疫苗M ．R C A g 一1 重組蛋白的工程菌，建立了高效表達蛋白的純化工藝，評價了三種已用于人臨床試驗的佐劑與M ．R C A g