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文檔簡(jiǎn)介
1、葡萄是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物之一,優(yōu)良品種的選育對(duì)改善葡萄品質(zhì)和提高種植效益起著至關(guān)重要的作用。然而隨著新品種選育技術(shù)的同質(zhì)化,使得葡萄品種之間的遺傳差異越來(lái)越小,完全依據(jù)形態(tài)特征區(qū)分植株顯得越來(lái)越困難。近年來(lái),隨著生物技術(shù)的發(fā)展,應(yīng)用 DNA分子標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建 DNA指紋數(shù)據(jù)庫(kù)成為葡萄品種鑒定的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)。該技術(shù)作為植物 DUS(Distinctness,Uniformity, Stability)測(cè)試的一種輔助工具,可以提高近似品種篩選
2、的效率和準(zhǔn)確性,進(jìn)而加快測(cè)試進(jìn)程。本文以SSR分子標(biāo)記為技術(shù)手段,以我國(guó)296個(gè)葡萄品種為試材,利用篩選出的一套多態(tài)性較高的SSR核心引物對(duì)其進(jìn)行了DNA指紋數(shù)據(jù)庫(kù)的構(gòu)建,為葡萄品種鑒定及親緣關(guān)系分析提供了科學(xué)依據(jù)。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴以24份遺傳差異較大的葡萄品種為試材,從140對(duì) SSR引物中篩選出38對(duì)多態(tài)性高、穩(wěn)定性好、帶型清晰的SSR引物,其中包括國(guó)際通用的9對(duì)SSR引物,并利用該9對(duì)引物進(jìn)行葡萄 DNA指紋數(shù)據(jù)
3、庫(kù)的構(gòu)建、品種鑒定及遺傳多樣性分析。⑵所利用的9對(duì)SSR引物在296個(gè)葡萄品種中共檢測(cè)到208個(gè)等位位點(diǎn),其中多態(tài)性位點(diǎn)為208個(gè),多態(tài)性比率為100%。每個(gè)SSR位點(diǎn)檢測(cè)出的等位位點(diǎn)變幅為17-32個(gè),平均值為23.11,擴(kuò)增產(chǎn)物片段大小的變幅為121-289 bp,每個(gè)位點(diǎn)的基因型個(gè)數(shù)變幅為64-116,多態(tài)性信息含量變幅為0.77-0.88,平均值為0.83。⑶UPGMA聚類(lèi)分析表明,243份二倍體供試材料可被分為真葡萄亞屬和圓葉
4、葡萄亞屬兩大類(lèi),而真葡萄亞屬又被分為8個(gè)野生種類(lèi)群和2個(gè)栽培種類(lèi)群。53份四倍體供試材料被分為3組,聚類(lèi)結(jié)果與供試材料已知的系譜來(lái)源基本吻合。⑷用9對(duì)SSR引物對(duì)61份中國(guó)地方品種進(jìn)行鑒定分析,發(fā)現(xiàn)其中存在3組同名異物品種和9組疑似同物異名品種,例如,紅葡萄-新疆與紅葡萄、綠木納格與木納格、伊犁葡萄與和田紅、黑葡萄-新疆與紫紅型葡萄等。⑸利用篩選的9對(duì)SSR核心引物初步構(gòu)建了296個(gè)葡萄品種的DNA指紋數(shù)據(jù)庫(kù)。由指紋數(shù)據(jù)庫(kù)可知,利用其中
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