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文檔簡介
1、本研究是從土壤中分離篩選得到菌株D和菌株S，研究表明，混合發(fā)酵培養(yǎng)其產酶的能力顯著的提高，其產酶最適培養(yǎng)基組分為(％，w/v)：尿素1.0，K2HPO4 0.07，KH2PO4 0.03，MgSO4 0.05，酵母粉0.5，甲殼素1.0。搖瓶發(fā)酵條件：pH5.5，2％(v/v)接種量，32℃，130rpm培養(yǎng)72h，500mL錐形瓶培養(yǎng)基裝量為100mL。在最適產酶發(fā)酵條件下，甲殼素酶活力可達到 1.19 U/mL。采用40％-80％(
2、NH4)2SO4分級鹽析、透析脫鹽、甲殼素親和層析、Sephadex G-75凝膠過濾等分離純化技術，獲得了純化的甲殼素酶。制品經過SDS-PAGE電泳，該甲殼素酶呈單一條帶，分子量約為45kD。對該酶進行部分酶學性質的研究表明：該甲殼素酶的最適作用溫度為60℃，最適反應pH為pH5.0；最適反應底物為粉末甲殼素；金屬離子Fe2+，Mn2+對酶活力有明顯的促進作用，Cu2+、Zn2+則對酶活力具有明顯的抑制作用；該酶除能降解甲殼素，對殼
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