1、對危害嚴重并難以控制的農作物病原菌，急需尋找高效新靶標活性物質。在陸地尋找機率低的情況下，本研究從豐富而新穎的深海微生物資源中篩選出對農作物病原菌具有穩(wěn)定拮抗作用的海洋黃桿菌WWP37(MCCC1A01368)，對其抗作物病原菌譜，抗菌物質的分離、純化及初步鑒定，及其發(fā)酵條件進行了研究，結果如下： 1.以水稻紋枯病、棉花枯萎病和油菜菌核病三類病原菌為指示菌株，對來自深海(2000-6000m)及臺灣海峽表面水的176株微生物進行

2、了篩選，獲得了11株具有穩(wěn)定抗菌活性的細菌。其中黃桿菌屬WWP37對10種作物病原真菌抗菌能力最強，該菌株連續(xù)轉接10代抗菌活性穩(wěn)定。 2.理化性質的研究表明，抗菌活性物質能抵抗100℃的高溫，且在pH4-10和紫外照射等環(huán)境中穩(wěn)定。正丁醇萃取的粗提物，經薄層層析純化，以抑制尖孢鐮刀菌生長為指示對薄層層析板進行了生物顯影，獲得了Rf=0.35、Rf=0.56兩條抑菌帶，表明抗菌物質至少有兩種活性組分；經Doskochilova溶

3、劑系統紙層析驗證，該物質與硫藤黃菌素的紙層析圖譜極為相近。 3.抗菌物質經有機溶劑萃取、凝膠層析(SephadexLH-20)、固相萃取(C18SPE)純化，再經高效液相色譜(HPLC)分離、收集沈脫峰，檢測其抑菌活性，證明組分BF-1活性較強，LC/MS測得其分子量為699Da。紫外掃描顯示，BF-1特征峰與硫藤黃菌素和金絲菌素特征吸收峰基本相同，初步確定BF-1為金絲菌素類抗生素。但BF-1只對病原真菌有抑制效果且分子量達到

4、699Da，卻與現有金絲菌素類抗生素不同。因此，該物質極有可能是一種新抗生素，其結構鑒定正在進行中。 4.對菌株WWP37的發(fā)酵正交試驗證明，產抗菌活性物質的優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：蔗糖0.6％、酵母粉1.2％、NaCl1.4％、MgSO40.8％；優(yōu)化培養(yǎng)條件為：500mL三角瓶裝量100mL、pH8.0、培養(yǎng)溫度為28℃、搖床轉速200r/min、種子發(fā)酵液菌齡8h，接種量為7.0％，培養(yǎng)時間為24h。將發(fā)酵上清液稀釋60倍后

5、的的灌根處理接種油菜菌核病原菌的4-5片真葉的油菜幼苗21天后，防治效果可達76.7％。掃描電鏡觀察發(fā)現，對農作物病原菌(尖孢鐮刀菌)的抑制作用表現為菌絲生長減慢，粗細不均且分支少，壁破裂，原生質泄漏。 海洋黃桿菌群未見有產抗農作物病原真菌抗生素的研究，本文做了此方面的報道。BF-1初步確定為金絲菌素類抗生素，但其只對病原真菌有抑制效果且分子量達到699Da，卻與現有金絲菌素類抗生素不同，極有可能是一種新抗生素。到目前為止，還沒