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文檔簡介
1、核糖體失活蛋白( ribosome-inactivating protein,RIP)是一種具有RNA N-糖苷酶活性的蛋白質,廣泛存在于高等植物的根,葉和種子細胞中,在抗腫瘤、抗HIV和抗動植物病毒方面有優(yōu)秀的表現。香樟樹(Cinnamomum camphora)的種子含有大量的核糖體失活蛋白,并且香樟樹在我國的分布也很廣泛,可是目前對其種子的利用并不是很充分,這既是是對資源材料的浪費,又是對環(huán)境的污染。
本文以香樟樹的種子
2、作為研究對象,用丙酮和硫酸銨對蛋白質沉淀、配位親和層析的方法對香樟的種子核糖體失活蛋白進行分離純化。通過與肝癌細胞作用后,對其性質進行研究,用MgCl2和蛋白酶抑制劑對其處理,再用SDS-PAGE電泳對其性質進行分析,以期了解核糖體失活蛋白的性質和香樟種子中兩種RIP之間的相互轉化關系與條件,主要的研究結果如下:
(一)確定了一種較為快速便捷的香樟的種子核糖體失活蛋白的提取工藝,通過電泳鑒定和與癌細胞的作用能肯定本實驗所提取的
3、蛋白質為核糖體失活蛋白。
(二)在提取過程中的除去油脂和其它雜質方面,用丙酮對蛋白質進行沉淀濃縮要比用硫酸銨進行沉淀濃縮效果要好,而且用時要少,但是弊端是蛋白質失活較明顯。所以,在提純核糖體失活蛋白方面可以用硫酸銨進行沉淀濃縮;而用不同條件進行處理時可以用丙酮進行沉淀濃縮。
(三)與自然條件下香樟果實核糖體失活蛋白的降解趨勢相比, MaCl2和EDTA-PMSF處理后的降解趨勢要明顯的不同。其中MgCl2處理過的粗提
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