1、端粒酶作為一種核糖蛋白酶，可以催化合成真核細胞生物染色體末端的端粒重復序列，延長端粒的長度，以至達到細胞的“永生”。端粒酶是重要的腫瘤標志物之一，近些年來端粒酶無疑成為研究的熱點，根據(jù)組織細胞內(nèi)是否有可檢測的端粒酶活性，可以判定組織細胞癌變與否。無論體外還是體內(nèi)檢測，對于端粒酶檢測的方法都相當成熟，并且仍有大量的報道在探索新的方法。人體端粒酶RNA是端粒酶重要組成之一，充當端粒酶催化反應過程中的逆轉(zhuǎn)錄模板。人體端粒酶RNA在正常細胞和腫

2、瘤細胞中都普遍存在，可根據(jù)其在細胞內(nèi)表達水平對細胞進行腫瘤分級。然而，對于人體端粒酶RNA檢測的熱度遠不及端粒酶。熒光手段是一種簡便快捷的檢測核酸的方法，但往往很多方法都沒有有效的避免假陽性信號的策略。因此找到一種能高效便捷且具有穩(wěn)定可靠信號的方法檢測人體端粒酶RNA成為本論文的研究重點。本論文中，我們基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移原理設計了一種雙色比率熒光寡核苷酸探針，實現(xiàn)了對于人體端粒酶RNA的定量檢測。本文主要架構(gòu)如下:
　　第一章，

3、主要綜述了端粒酶和人體端粒酶RNA并列舉當前對于二者比較經(jīng)典的檢測方法。同時也簡單介紹了熒光共振能量轉(zhuǎn)移的原理及其在化學和生物學領域的應用。
　　第二章，論述了雙色比率熒光寡核苷酸探針的設計及檢測原理。合成出探針，并對探針本身的信號穩(wěn)定性、選擇性、可逆性等性質(zhì)進行了研究與探討，用凝膠電泳技術(shù)對探針檢測原理進行了驗證。結(jié)果表明，該探針具有很好的信號穩(wěn)定性好并且對目標物具有較高的特異選擇性，檢測過程中還呈現(xiàn)肉眼可見的顏色變化。最后，對