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簡介：目的為了摸清宜昌市人群甲型和乙型肝炎病毒的感染狀況和流行特征合理有效地應(yīng)用甲肝和乙肝疫苗提高人群免疫水平最終控制甲型和乙型病毒性肝炎的發(fā)病和流行方法在大量應(yīng)用甲肝和乙肝疫苗免疫之前我市采用ELISA和RIA法對1048名不同年齡、不同職業(yè)、不同地區(qū)的人群進行了抗HAV檢測對2414名不同年齡的人群進行了HBSAG、抗HBS、抗HBC檢測根據(jù)我市人群甲型和乙型肝炎的感染狀況和免疫水平制定了防治策略實施了甲肝和乙肝疫苗的常規(guī)免疫接種對嬰幼兒和青少年實施計劃免疫管理模式通過全市計劃免疫網(wǎng)絡(luò)實施對人群中HBV標(biāo)志物陽性率及抗HBS滴度動態(tài)變化情況進行了研究對不同途徑、不同劑量的免疫效果及對HBV感染者的安全性和轉(zhuǎn)歸進行了探討結(jié)論通過各種防治策略的實施建立了有效的人群免疫屏障也收到了明顯的社會效益進一步促進和擴大了我市計劃免疫與疾病控制工作

簡介：置南大學(xué)周或匕學(xué)位論文非淋菌性尿道炎與關(guān)系探討及抗病毒治療的臨床研究作者姓名李妹指導(dǎo)教師姓名及學(xué)位、職稱鄧列華教授學(xué)科、專業(yè)名稱皮膚病與性病學(xué)論文提交日期年月論文答辯日期年月答辯委員會主席曾凡欽教授論文評閱人張錫寶教授、盧浩鏘副教授學(xué)位授予單位和日期盛南大學(xué)碩士學(xué)位論文非淋菌性尿道炎與關(guān)系探討及抗病毒治療的臨床研究非淋菌性尿道炎與關(guān)系探討及抗病毒治療的臨床研究專業(yè)皮膚病與性病學(xué)研究生李妹導(dǎo)師鄧列華教授摘要背景非淋菌性尿道炎宮頸炎，是最為常見的性傳播疾病之一。在歐美等國，其發(fā)病率自上世紀年代開始即己經(jīng)超過淋病成為第一位的性傳播疾病在我國，病例也日漸增多，年的報告病例數(shù)首次超過淋病而居八種性病的首位。的病原體多種多樣，過去多認為主要是沙眼衣原體和支原體，但是近來調(diào)查發(fā)現(xiàn)非衣原體非支原體性可以占到總數(shù)的一半以上。在臨床上常見的是遷延不愈以及衣原體、支原體均為陰性的患者，對于該類患者的治療己成為性病學(xué)上較為棘手的問題，并引發(fā)了人們對于其他病因研究的興趣。近年來，單純疤疹病毒，引起的情況已經(jīng)得到關(guān)注，但國內(nèi)這方面的報道還較少。目的，本研究旨在探討在尤其是無沙眼衣原體、解服支原體，和人型支原體，感染的患者中的感染情況，并觀察在陽性而無、、感染的患者中應(yīng)用泛昔洛韋進行抗病毒治療的臨床療效。方法利用方法檢測例患者組和例正常對照組尿道或?qū)m頸分泌物中，并在患者組中按常規(guī)采用免疫快速測定法一快速法檢測培養(yǎng)法檢測和陽同時將例陽性而、和陰性的患者隨機分為治療組和對照組。治療組給予泛昔洛韋麗珠風(fēng)口服，每日次，連續(xù)天為一療程。對照組未給予任何抗生素類藥物治療。囑患

簡介：目的建立一種快速、敏感、特異的多重?zé)晒舛縍T一PCR同時檢測甲型乙型流感病毒，并將建立的方法進行初步臨床應(yīng)用研究。方法1甲型乙型流感病毒的引物及TAQMAN探針的設(shè)計，選取兩種病毒的基因序列保守區(qū)，根據(jù)引物設(shè)計軟件DNASTAR設(shè)計引物和探針。對甲型乙型的探針標(biāo)記不同的熒光素，甲型標(biāo)記FAM，乙型標(biāo)記VIC。2多重?zé)晒舛縍TPCR反應(yīng)體系中，甲型乙型流感病毒的兩套引物及兩種探針濃度的優(yōu)化。3對甲3／悉尼／5／97、乙／深圳／12／97流感病毒進行病毒效價滴定106TCID50／M1，TCIDOE口是組織細胞培養(yǎng)半數(shù)感染劑量，然后稀釋成100、10、1、01、O0L、0001TCIDO，提取病毒RNA作為敏感度的標(biāo)準(zhǔn)，多重?zé)晒舛縍T一PCR反應(yīng)和常規(guī)的RTPCR以及和病毒分離培養(yǎng)的靈敏度作比較。4在多重?zé)晒舛縍TPCR反應(yīng)體系中加入其它的呼吸道病毒提取的RNA，檢測反應(yīng)體系的特異性5用多重?zé)晒舛縍TPCR在對40例疑似流感含漱液標(biāo)本進行初步的應(yīng)用結(jié)果1引物與探針的設(shè)計與合成我們選取甲型流感、乙型流感高度保守區(qū)，甲型選取編碼基質(zhì)蛋白M區(qū)，乙型選取編碼血凝素基因區(qū)HA。甲型流感的探針5’端標(biāo)記的熒光報告基團是FAM，3’端標(biāo)記的熒光淬滅基團為TAMRA，乙型流感的探FLUA1F5GGACTGCAGCGTAGACGCTT3核酸位點217236FLUA2R5CATCCTGTTGTATATGAGGCCCAT3382405FLUA3R5CATTCTGTTGTATATGAGGCCCAT3382405FLUAPROBE5CTCAGTTATTGTGCTGGTGCACTTGCCA3349376FLUB1F5AAATACGGTGGATTAAATAAAAGCAA3970995FLUB2R5CCAGCAATAGCTCCGAAGAAA311191139FLUBPROBE5CACCCATATTGGGCAATTTCCTATGGC310241050針5’端標(biāo)記的熒光報告基團是VIC，3’端標(biāo)記的與甲型一樣。設(shè)計的甲型流感有兩條反向引物，只有在5’第4個堿基不同，目的是為了擴增出所有的甲型流感的亞型。引物和探針的序列2多重?zé)晒舛縍TPCR反應(yīng)體系中引物及探針的濃度優(yōu)化兩套引物的濃度分別配成200、400和600NMOL／L，甲型乙型探針的濃度分別配成100、200、300NM01／L，采用矩陣法優(yōu)選引物和探針的最佳濃度，以04UMOL／L的甲型引物濃度與06UMOL／L的乙型引物濃度及兩種探針的濃度分別為200NMOL／L獲得的CT值較小而熒光強度最大。在該條件下，多重?zé)晒舛縍TPCR反應(yīng)體系最合適。3多重?zé)晒舛縍TPCR反應(yīng)體系的靈敏度多重?zé)晒舛縍TPCR反應(yīng)在兩種參考病毒效價滴度稀釋0001TCIDO倍時，檢測甲型流感的CT值為3512，檢測乙型流感的CT值為3306，檢測呈陽性，常規(guī)的RTPCR在稀釋至01TCIDS。時能擴增出條帶，001TCIDS。時條帶擴增不出。用MDCK培養(yǎng)分離只能在1TCIDS。能觀察到細胞病變效應(yīng)。4多重?zé)晒舛縍T一PCR反應(yīng)體系的特異性流感病毒甲3／悉尼／5／97，甲1／北京／56／97，乙／深圳／12／97，甲3／浙江／78／00，甲3／浙江／52／04麻疹病毒滬191，風(fēng)疹病毒GOS株，流行性腮腺炎病毒TERYLYN株，呼吸道合胞病毒LONG株的RNA提取物作為模板分別加入多重?zé)晒舛縍TPCR進行測定，除流感病毒出現(xiàn)很好的陽性結(jié)果外，其它所有病毒的檢測結(jié)果均呈陰性。5流感疑似患者臨床樣本的檢測對我市疑似流感暴發(fā)疫情及流感監(jiān)測醫(yī)院送檢的40份患者含漱液應(yīng)用多重?zé)晒舛縍T一PCR方法與病毒分離方法進行檢測，其中病毒分離陽性8份20％，多重?zé)晒舛縍T一PCR陽性17份425％，這二者檢測的陽性患者結(jié)果一致。為排除多重?zé)晒舛縍T一PCR假陽性，用血凝抑制實驗檢測雙份血清急性期、恢復(fù)期的血凝抑制效價，經(jīng)檢測診斷為流感近期感染。結(jié)論1我們建立的多重?zé)晒舛縍T一PCR同時檢測甲型乙型流感病毒的方法是利用TAQMAN技術(shù)是在普通PCR原有的一對特異性引物基礎(chǔ)上增加了一條特異性的熒光雙標(biāo)記探針。利用該探針能與病原核酸特異性結(jié)合，而且結(jié)合部位位于引物結(jié)合區(qū)域，探針的5’端和3’端分別標(biāo)記不同的熒光素，在PCR擴增過程中，利用檢測系統(tǒng)中熒光量的變化，通過檢測儀檢測并記錄的熒光信號的變化判定檢測結(jié)果。2檢測方法學(xué)評價經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)毒株與臨床樣本的檢測比較，發(fā)現(xiàn)它不僅特異性高，而且比常規(guī)盯一PCR和病毒分離法更敏感，快速，也更簡便。通常流感病毒的RT一PCR檢測敏感度在01TCID50左右，從病毒核酸提取，RTPCR反應(yīng)與電泳，整個過程大約需6～7H左右。而采用本方法從核酸提取至完成檢測，僅需3H左右，敏感度可達0001TCID50。3采樣標(biāo)本檢測結(jié)果及評價可直接從疑似患者含漱液標(biāo)本中檢測同時檢測到甲型或乙型流感病毒，我們在40例標(biāo)本中，檢出10例甲型流感，7例乙型流感，不僅節(jié)約成本，而且PCR產(chǎn)物不污染環(huán)境。為疑似流感暴發(fā)疫情的實驗室應(yīng)急診斷提供了一種快速、有效的實驗室檢測手段。

簡介：目的觀察右美托咪定對老年病人術(shù)后靜脈血中S100B蛋白水平及MMSE值的影響，旨在探討右美托咪定對老年病人術(shù)后認知功能的影響。方法；選擇ASAⅠ～Ⅱ級擇期非心臟住院全麻手術(shù)的老年患者90例，隨機分成三組分別為右美托咪定1組（D1組）、右美托咪定2組D2組和咪達唑侖組（M組），每組30例。D1組、D2組入室測定基礎(chǔ)數(shù)據(jù)后分別靜脈泵入右美托咪定03ΜGKG1和06ΜGKG1，泵注時間均為15分鐘M組入室測定基礎(chǔ)數(shù)據(jù)后靜脈注射咪達唑侖005MGKG1，余同D1和D2組。分別記錄入室5分鐘T0、泵注右美托咪定后10分鐘T1、氣管插管時T2、泵右美托咪定后1小時T3、手術(shù)結(jié)束時T4、拔除氣管導(dǎo)管時T5、拔管后10分鐘T6各時間點的收縮壓DBP、舒張壓SBP和心率HR。于泵注右美托咪定前、手術(shù)后1小時采集靜脈血3ML，分離血清，用ELISA法測定其中S100B蛋白含量。分別于術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后3天、術(shù)后5天用MMSE評估表評估患者的認知功能。術(shù)后MMSE值較術(shù)前下降≥2分被認為存在認知功能障礙。結(jié)果⑴術(shù)前各組患者組間比較，年齡、性別、身高、體重等無差異P＞005。⑵收縮壓SBPD1組中各時間點收縮壓與T0時相比，除T6收縮壓有升高外P＜005，其他時間點收縮壓均無明顯變化P＞005D2組中各時間點收縮壓與T0時相比，各時間點收縮壓均無明顯變化P＞005M組中各時間點收縮壓與T0時相比，除T6收縮壓有升高P＜005外，其他時間點收縮壓均無明顯變化P＞005。舒張壓DBPD1組中各時間點舒張壓與T0時相比，除T4時舒張壓降低外P＜005，其他時間點舒張壓均無明顯變化P＞005D2組中各時間點舒張壓與T0時相比，在T3、T4、T5、T6時間點有降低P＜005T1、T2時間點無明顯變化P＞005M組中各時間點舒張壓與T0時相比均無明顯變化P＞005。心率HRD1組中各時間點心率與T0時相比均無明顯變化P＞005D2組中各時間點心率與T0時相比，在T1、T2、T3、T4、T5時降低P＜005，T6時無明顯變化P＞005M組中各時間點心率與T0時相比，在T1、T6時升高P＜005，在T2、T3、T4、T5時無明顯變化P＞005。⑶S100B蛋白組內(nèi)比較D1組術(shù)后1小時TB血清S100B蛋白含量與泵注右美托咪定前TA有明顯升高P＜005D2組術(shù)后1小時TB血清S100B蛋白含量與泵注右美托咪定前TA無明顯變化P＞005M組術(shù)后1小時TB血清S100B蛋白含量與泵注右美托咪定前TA有明顯升高P＜005組間比較三組病人術(shù)前泵注右美托咪定前血清S100B蛋白含量無明顯差異P＞005。術(shù)后1小時D1組和M組之間血清S100B蛋白含量無明顯差異P＞005，D2組明顯低于D1和M組P＜005。⑷三組患者的POCD發(fā)生情況術(shù)后第1天，三組共發(fā)生POCD23例，發(fā)生率為256％。其中D1組8例，組內(nèi)發(fā)生率為267％D2組1例，組內(nèi)發(fā)生率為33％M組14例，組內(nèi)發(fā)生率為467％。D1組POCD發(fā)生率與M組之間無明顯差異P＞005D2組POCD發(fā)生率明顯低于D1組和M組P＜005；術(shù)后第3天，三組共發(fā)生POCD13例，發(fā)生率為144％。其中D1組5例，組內(nèi)發(fā)生率為144％D2組0例M組8例，發(fā)生率為267％。D1組POCD發(fā)生率與M組比，無明顯差異P＞005D2組POCD發(fā)生率明顯低于D1組和M組P＜005；術(shù)后第5天三組共發(fā)生POCD4例，發(fā)生率為44％。其中D1組2例，組內(nèi)發(fā)生率67％D2組0例M組2例，組內(nèi)發(fā)生率67％。D1組POCD發(fā)生率與M組比較無明顯差異P＞005D2組POCD發(fā)生率明顯低于D1組和M組P＜005。結(jié)論與注射咪達唑侖005MGKG1相比，誘導(dǎo)前靜脈泵注右美托咪定06ΜGKG1能減輕老年手術(shù)患者腦損害，降低老年手術(shù)患者POCD的發(fā)生率誘導(dǎo)前靜脈注射03ΜGKG1右美托咪啶則效果不明顯。

簡介：目的本課題在論證急性病毒性心肌炎邪毒侵心、氣陰兩虛的基本病機和和解表里、益氣養(yǎng)陰的基本治法的基礎(chǔ)上，探討小柴胡湯加味治療急性病毒性心肌炎的療效機制。方法將60例病毒性心肌炎患者隨機分為治療組和對照組，對照組30例采用西醫(yī)綜合治療，治療組30例常規(guī)西醫(yī)治療基礎(chǔ)上加用小柴胡湯加味治療。療程均為4周。結(jié)果綜合療效治療組愈顯率為7000％，總有效率為9000％；對照組愈顯率為4333％，總有效率為7333％，兩組差異有顯著性意義，治療組療效高于對照組P＜005。在中醫(yī)證候療效和改善病人主要臨床癥狀方面，治療組優(yōu)于對照組P＜005，在改善異常心電圖的作用方面亦優(yōu)于對照組P＜005，還具有明顯降低心肌酶譜和改善左心功能狀態(tài)的作用，免疫指標(biāo)CD3、CD8、CD4CD8、NK細胞活性明顯增加，治療組治療前后比較P＜005。結(jié)論小柴胡湯加味治療急性病毒性心肌炎療效顯著，能夠改善心臟收縮功能；能夠改善AVMC患者的體液免疫功能低下。臨床試驗結(jié)果表明小柴胡湯加味對邪毒侵心，氣陰兩虛證療效顯著，全方共奏和解表里、益氣養(yǎng)陰之功，是治療急性病毒性心肌炎的有效方劑。

簡介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文人巨細胞病毒感染的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與細胞病變研究姓名汪輝申請學(xué)位級別博士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師聞良珍2001410JL乙，博士學(xué)位論文奄乏蕓I、凹都釓第部分，I舢感染燃因子眥活化與BCL2衄NA表達的意義本文采用兔彭嘶匕和WESTERBLOT辦去I蝴0H日ⅣADL69移融惑染胚肺成纖維細胞衄。組核轉(zhuǎn)錄因子N卜妞蛋白的表達及其抑制因子IKGQ的變化，應(yīng)用原位雜交方懶惻灤組與正常對照組細胞中NFKBP65及BCL之盼敲懶；應(yīng)用逆鐿朔眙酶鏈反應(yīng)RTPCR撈1盼新吲V燃因／的表達，同時采用流式細胞術(shù)檢測兩組細胞的旖亡指數(shù)。／結(jié)果表明嘲V感＼染組細胞核表達NF妞蛋白，IKBA下降，NFKBP65【I蹦表達增強，麟V晚％L基因的表逆尚之呈正市目關(guān)。感染組細胞中BCL粼的表齒蠶撕升高，正常對鼷毪丑貝嚇降，而前者的凋亡撇明顯F氏于后者。提示跏V自鏹蛞N卜KB，活化的NFL出在病毒基因表達及干擾細胞凋亡方面起重要作用，NFKB參與了刪赫的發(fā)生與發(fā)展，可作為啪感染的診斷和病渺嘶舡具。戶一了第二部分，酗媛陶孕早期人巨J砌勘鷦宮內(nèi)J舌J齜E躲自G關(guān)系本文選取81例既往有異常妊娠史行人工流產(chǎn)術(shù)的早孕婦女，應(yīng)用階’PCR櫥M峨彰丑織朐㈣的莉萏FLISA法澳0定血睛H5TVIGM原位黝峨膜囫耆卸魄I瞰ⅢM睜敲蟒彳亍J譴分析商侈惰異撒壬娠2_J

簡介：點擊查看更多基于公眾認知的遺址公園表達方法.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：東南大學(xué)博士學(xué)位論文老年抑郁癥恢復(fù)期認知損害從神經(jīng)心理學(xué)測量到神經(jīng)影像學(xué)研究姓名袁勇貴申請學(xué)位級別博士專業(yè)內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師張志珺20090305中文摘要結(jié)論RGD患者存在情節(jié)記憶、執(zhí)行功能和持續(xù)注意功能的異常。關(guān)鍵詞抑郁癥；老年人；認知功能第二部分老年抑郁癥恢復(fù)期認知損害與灰質(zhì)和白質(zhì)體積改變的相關(guān)性研．究目的探討恢復(fù)期老年抑郁癥患者灰質(zhì)和白質(zhì)體積的異常，并進一步分析其與認知損害是否相關(guān)。方法對40例RGD患者患者組和36名健康老年人對照組行全腦3D梯度回波TL加權(quán)序列矢狀位掃描，用統(tǒng)計參數(shù)圖5STATISTICPARAMETERMAPPING5，SPM5軟件處理圖像，采用VBM的方法比較兩組問的灰質(zhì)和自質(zhì)體積的差異。結(jié)果RGD患者右側(cè)頂下小葉、右側(cè)額葉內(nèi)側(cè)回灰質(zhì)體積和左側(cè)頂下小葉、右側(cè)額下回白質(zhì)體積顯著大于正常對照組，而未發(fā)現(xiàn)灰質(zhì)和白質(zhì)體積顯著小于正常對照組的腦區(qū)未校正，P100?；颊呓M的右側(cè)頂下小葉灰質(zhì)體積與簡易精神狀態(tài)量表MMSE成績呈顯著正相關(guān)產(chǎn)O．340，P0．032，與連線測試A和B成績呈顯著負相關(guān)分別為F．0．454，P0．003；產(chǎn)一0．404，P0．010，右側(cè)額下回白質(zhì)體積與連線測試A成績呈顯著J下相關(guān)R0．319，P0．045。結(jié)論RGD患者存在某些部位的灰質(zhì)和白質(zhì)體積的異常增大，可能是該類患者執(zhí)行功能損害的神經(jīng)病理基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞抑郁癥；老年人；認知功能；磁共振成像；灰質(zhì)；白質(zhì)；基于體素的形態(tài)分析法第三部分老年抑郁癥恢復(fù)期認知功能與海馬體積的相關(guān)性研究目的探討恢復(fù)期老年抑郁癥患者海馬體積的變化，并進一步分析其與認知損害是否相關(guān)。方法對40例恢復(fù)期老年抑郁癥患者患者組和36名健康老年人對照組行全腦3D梯度回波T1加權(quán)序列矢狀位掃描，用統(tǒng)計參數(shù)圖2STATISTICPARAMETERMAPPING2，SPM2軟件處理圖像，采用感興趣區(qū)REGIONOFINTEREST，ROI方法比較兩組問海馬體積的差異。結(jié)果患者組的左右側(cè)海馬絕對體積和相對體積與對照組差異均無顯著性胗O．05?；颊呓M的連線測試B評分與左側(cè)海馬絕對體積呈顯著負相關(guān)嚴．0．333，P0．036，畫鐘測試評分與左側(cè)海馬絕對體積和相對體積均成顯著負相關(guān)分別為嚴．0．338，P0．033；，．0．330，PO．038。結(jié)論恢復(fù)期老年抑郁癥患者的海馬體積正常，并且海馬體積可能與執(zhí)行功能、視空間結(jié)構(gòu)功能存在關(guān)聯(lián)。關(guān)鍵詞抑郁癥；老年人；磁共振成像；海馬；感興趣區(qū)第四部分老年抑郁癥恢復(fù)期認知損害與白質(zhì)纖維完整性改變的相關(guān)性研究目的探討恢復(fù)期老年抑郁癥患者全腦白質(zhì)纖維完整性是否受損，并進一步分析其與認知損害是否相關(guān)。方法對37例恢復(fù)期老年抑郁癥患者患者組和33名健康老年人對照組行全腦彌散張量成像DIFFUSIONTENSORIMAGING，DTI掃描，用SPM2軟件處理圖像，采用基于體素的分析方法VOXELBASEDAPPROACH，VBA組問比較分數(shù)各向異性值FRACTIONALANISOTROPY,FA。結(jié)果患者組FA值較對照組顯著降低的腦區(qū)主要包括右側(cè)額上回、左側(cè)額下回、左側(cè)楔前葉、右側(cè)枕中回、左側(cè)楔葉未校正，PO．001?；颊呓M的左側(cè)楔前葉FA值與CFTLI

簡介：中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文大劑量IVIG對病毒性腦炎患兒腦脊液中NSE、IL1、TNFΑ水平的影響姓名張俊梅申請學(xué)位級別碩士專業(yè)兒科學(xué)指導(dǎo)教師于一兵20030401制品公司生產(chǎn)的產(chǎn)品，按400RAG／KS／D，連用5天。二、研究方法所有病人均在病后3～5天行腰穿檢查，首次腰穿后治療組則加用丙種球蛋白。丙種球蛋白應(yīng)用后1周郎首次腰穿后12天兩組病人均復(fù)查腰穿。兩次各收集腦脊液2毫升，所留標(biāo)本一20℃保存。應(yīng)用德國羅氏公司1010電化學(xué)發(fā)光儀及美國DPC德普公司IMMUTITE儀自動檢測NSE、ILI、1NFA水平。三、統(tǒng)計方法各組數(shù)值以又4S表示，自身前后比較采用配對樣本T檢驗，兩組間比較采用兩獨立樣本T檢驗。結(jié)果一、治療組與對照組治療前后腦脊液中NSE、ILL、TNFD水平的變化治療組治療前腦脊液中的NSE、IL一1、TNF一儀的水平分別為1225410509NG／IILL，6864229PG／M1，858234PG／M1；治療后分別為1074637NG／M1，1714048PG／TTLL，180492PG／M。對照組治療前的NSE、ILL、TNF一位的水平分別為1183010018G／A，588324PG／TNL，839284P∥IILL；治療后分別為24791196G／MI，177010PG／A，2474103PG／RNL。兩組治療前NSE、IL一1、TNFOT水平均明顯升高，兩組自身前后比較NSE、IL一1、TNF一儀水平有顯著差異P001，治療后兩組中三種指標(biāo)相比亦有統(tǒng)計學(xué)意義P005。二、臨床觀察資料從臨床觀察資料可以看出，應(yīng)用丙種球蛋白組，發(fā)熱持續(xù)時間短，26例中有19例于應(yīng)用丙種球蛋白第2天體溫下降，5例于第32

簡介：點擊查看更多斑點免疫滲濾試驗檢測甲型肝炎病毒IgM抗體試劑盒的研制.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文慢病毒導(dǎo)入的PLCGAMMA1SIRNA對人大腸癌細胞生物學(xué)行為的影響姓名譚麗申請學(xué)位級別碩士專業(yè)細胞生物學(xué)指導(dǎo)教師羅深秋20060606中文摘要腸癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用還并不清楚。傳統(tǒng)研究PLCGAMMAL的方法存在著很大的局限性和不客觀性，如用U73122對PLCGAMMAL進行抑制，它屬于PLC的特異抑制劑，在抑制了PLCGARNMAL的同時也抑制了PLC其它亞型的活性，這使得實驗結(jié)果很難解釋，缺乏客觀性。另外運用含有SH2，SH3和一個INHIBITORYI結(jié)構(gòu)域的顯性負突變片段PLCZ的表達來抑制PLCGAMMAL的表達，理論上雖然可行，但是由于蛋白質(zhì)翻譯后的修飾和加工機制，因此在真核細胞中蛋白的表達需要一個很有效的蛋白表達系統(tǒng)刁一行，并且還會受到很多因素的限制和影響。近年來的研究表明，一些小的雙鏈RNA可以高效、特異的阻斷體內(nèi)特定基因表達，促使MRNA降解，誘使細胞表現(xiàn)出特定基因缺失的表型，可作為一種抑制細胞中某個基因表達的有力工具。與傳統(tǒng)的反義技術(shù)相比較，RNA干擾的作用更為強大，可作為基因治療的工具，在腫瘤、感染性疾病或顯性遺傳疾病中發(fā)揮作用。目前已有研究顯示2卜NTSIRNA能夠特異性抑制哺乳動物及小鼠中內(nèi)源基因的表達。但是對于特異性SIRNA的導(dǎo)入來說，以DNA為基礎(chǔ)的質(zhì)粒載體可將SIRNAS導(dǎo)入到哺乳細胞內(nèi)，但只是瞬時地表達SIRNAS，不容易得到穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染。利用脂質(zhì)體或物理方法如電穿孔直接導(dǎo)入SIRNAS，轉(zhuǎn)染效率低下，會使細胞的活性喪失。相比較而言，病毒載體能夠有效地導(dǎo)入SIRNA，并且趨向于提供更為穩(wěn)定的基因表達抑制，尤其是慢病毒載體，它不僅可以穩(wěn)定地表達SIRNA，而且還具有很高的轉(zhuǎn)染效率轉(zhuǎn)染效率大于90％和較長時間的持續(xù)效應(yīng)。本課題以大腸癌細胞為研究模型，利用RNA干涉技術(shù)等手段，研究了PLCGAMMAL與大腸癌細胞多種生物學(xué)行為的關(guān)系，以期全面地揭示PLCGAMMAL在大腸癌發(fā)生發(fā)展過程中所起的作用，為尋找治療的靶位點和大腸癌的基因治療提供理論和實驗依據(jù)。本研究首先合成特異性干擾PLCGAMMAL的SHRNA分子，并與入門載體PENTR“／U6連接，使PLCGAMMAL的SHRNA分子克隆到啟動子U6的下游，然后與病毒載體PLENTI6／BLOCKIT“一DEST在ATT位點重組，在三種包膜載體

簡介：【目的】建立柯薩奇病毒B感染大鼠心室肌細胞模型觀察柯薩奇病毒B對新生大鼠心室肌細胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)的影響了解病毒對心室肌細胞的直接損傷作用記錄感染柯薩奇病毒B后心室肌細胞L型鈣電流的變化探討病毒性心肌炎室性心律失常發(fā)生的細胞電生理機制觀察柯薩奇病毒B感染培養(yǎng)大鼠心室肌細胞L型鈣通道各亞單位MRNA的表達探討病毒性心肌炎室性心律失常發(fā)生的分子機制【結(jié)論】該實驗所建立的柯薩奇病毒B感染心室肌細胞模型能夠反映病毒對心肌細胞的直接損傷作用可作為體外研究病毒性心肌炎的實驗?zāi)Ｐ涂滤_奇病毒B感染心室肌細胞后使細胞膜L型鈣電流增大可能是病毒性心肌炎室性心律失常發(fā)生的細胞電生理機制之一病毒感染后心室肌細胞L型鈣通道Α和Β亞單位MRNA的表達量增加可能是病毒感染導(dǎo)致L型鈣電流增大的分子機制之一

簡介：噬菌體隨機肽庫技術(shù)是近年來新興的一個探索受體與配體相互作用位點、尋求高親合為生物活性配體分子、探測未知蛋白空間結(jié)構(gòu)表位的有力工具在疫苗研究、藥物設(shè)計以及疾病診斷等方面均顯示出廣闊的應(yīng)用前景噬菌體隨機肽庫含有的大量不同序列多肽可作為靶抗原表位的模擬肽為確定抗原表位序列提供了一種新的研究方法為研究病毒關(guān)鍵抗原表位的結(jié)構(gòu)和功能以至設(shè)計新型疫苗奠定基礎(chǔ)該研究選用2株抗JEVE蛋白的保護性MAB2H4、2F2分別淘篩噬菌體隨機15肽庫對獲得的2種噬菌體表達短肽的抗原性與免疫原性進行了鑒定綜上所述通過多種鑒定說明噬菌體表達短肽M2H4和M2F2能夠模擬JEV蛋白的部分抗原性并且具有一定的免疫原性這些結(jié)果加深了對JEVE蛋白表位的認識為進一步研究乙腦新型疫苗提供了有益的線索

簡介：背景登革病毒DENGUEVIRUS，DENV是地理分布最廣的蟲媒黃病毒，按抗原性可分為DENV1～DENV4四個血清型，同一血清型內(nèi)又可分成不同的基因型。登革病毒的基因組為單股正鏈RNA分子，具有感染性，分子量為3，800KDA，約含11，000個堿基。在病毒基因組5UTR和3UTR之間為病毒的單一開放讀碼框架OPENREADINGFRAME，F(xiàn)，編碼一個約含3400個氨基酸殘基的、分子量約380KDA的聚蛋白分子。人感染登革病毒后根據(jù)臨床表現(xiàn)嚴重程度，分為登革熱DENGUEFEVERDF、登革出血熱DENGUEHEMRHAGICFEVER，DHF、登革休克綜合征THEDENGUESHOCKSYNDROME，DSS。可傳播登革病毒的蚊種主要為埃及伊蚊AEDESAEGYPTI，AEAEGYPTI和白紋伊蚊AEDESALBOPICTUS，AEALBOPICTUS。白紋伊蚊主要分布在亞洲熱帶、亞熱帶和部分溫帶地區(qū)，現(xiàn)已傳播到北美、南美、歐洲和非洲大陸，對DENV1～DENV4均高度易感，在我國為登革的主要傳播媒介。隨著全球氣候變暖、生態(tài)環(huán)境的惡化、蟲媒分布區(qū)域的擴展，登革的流行范圍和頻率不斷增加。近十年來，登革熱在全世界的發(fā)病率提高了將近30倍，目前已波及全球100余個國家和地區(qū)，主要流行于非洲、南美洲、東南亞和西太平洋地區(qū)。自20世紀90年代以來，除海南、福建、浙江和江蘇省有登革熱爆發(fā)外，我國的登革熱主要在廣東省流行，已成為流行區(qū)域面臨的社會公共衛(wèi)生問題。MICRNASMIRNAS是一類長度為～22核苷酸NUCLEOTIDE，NT的內(nèi)源性小分子非編碼單鏈RNA，廣泛存在于真核生物中，可在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達，參與調(diào)控發(fā)育、細胞增值與分化、細胞凋亡、脂類代謝、激素分泌、機體免疫以及腫瘤發(fā)生、病毒感染等生理及病理過程。動物細胞中絕大部分MIRNA由RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄生成MIRNA初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物PRIMARYMIRNA，PRIMIRNA，在PASHADGR8的協(xié)同下，核酸酶DROSHA將PRIMIRNA切割成MIRNA前體PRECURSMIRNA，PREMIRNA。PREMIRNA由EXPTIN5蛋白從細胞核內(nèi)運送至細胞質(zhì)中，然后經(jīng)胞質(zhì)內(nèi)核酸酶DICER的切割而加工成～22NT的MIRNAMIRNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。雙螺旋結(jié)構(gòu)中的MIRNA通常迅速被降解另一條5端穩(wěn)定性較低的鏈即成熟的MIRNAMATUREMIRNA則與ARGONAUTEAGO蛋白家族成員結(jié)合進入RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體RNAINDUCEDSILENCINGCOMPLEX，RISC。MIRNA引導(dǎo)RISC結(jié)合靶MRNA后在胞漿中積聚于P小體PBODY內(nèi)，MIRNA可能在P小體中行使其基因沉默功能。經(jīng)典的理論認為，MIRNA能抑制基因的表達，MIRNA利用其5端2～8個堿基的“種子”序列SEEDSEQUENCE識別靶基因MRNA3UTR的互補序列，引起靶基因MRNA的降解或者是翻譯抑制。但目前有研究發(fā)現(xiàn)MIRNA的靶序列也可位于靶基因的5UTR區(qū)和編碼區(qū)中，MIRNA亦可增強基因的表達。近年的研究提示病毒與宿主在MIRNA水平存在相互的調(diào)節(jié)作用。一方面病毒自身可編碼MIRNA，利用其促進病毒自身復(fù)制與潛伏并抑制宿主細胞抗病毒活性另一方面宿主細胞編碼的大量MIRNAS，在調(diào)控自身基因表達的同時，可調(diào)控入侵病毒的復(fù)制。LECELLIER等發(fā)現(xiàn)哺乳動物細胞的MIR32可抑制Ⅰ型泡沫病毒PRIMATEFOAMYVIRUSTYPE1，PFV1的復(fù)制。PEDERSEN研究者通過序列互補分析發(fā)現(xiàn)5種受IFNB調(diào)節(jié)的MIRNA對HCV復(fù)制有明顯抑制作用細胞轉(zhuǎn)染人工合成的MIRNA類似物MIRNAMIMIC混合物能使HCVMRNA水平顯著下降，而轉(zhuǎn)染相應(yīng)的反義MIRNA抑制劑MIRNAINHIBIT能降低IFNB的抗病毒作用。TRIBOULET等人發(fā)現(xiàn)敲除DICER或DROSHA可明顯增強Ⅰ型人類免疫缺陷病毒HUMANIMMUNODEFICIENCYVIRUS，HIV1感染者外周血單個核細胞PERIPHERALBLOODMONONUCLEARCELL，PBMC中病毒的復(fù)制，提示細胞MIRNA對HIV1的復(fù)制具有負調(diào)節(jié)作用。HARIHARAN等研究發(fā)現(xiàn)5種人MIRNA在HIV基因組中能找到靶標(biāo)序列，MIR29A和MIR29B靶向NEF基因，MIR149靶向VPR基因，MIR378靶向ENV基因，MIR3245P靶向VIF基因這些靶序列在所有HIV病毒包膜序列中高度保守，提示細胞MIRNA水平可能與HIV1感染及病程相關(guān)。YEUNG等應(yīng)用基因表達譜芯片技術(shù)研究HIV感染的人T細胞中MIRNA表達的變化，上述提到的5種MIRNA水平顯著下調(diào)，提示細胞MIRNA在HIV病毒宿主相互作用中起重要作用。宿主MIRNA也可被病毒利用促進其維持潛伏或增進復(fù)制。JOPLING和ROBERTS等發(fā)現(xiàn)肝細胞特異性豐富表達的MIR122可與HCV基因組5UTR區(qū)的兩個互補序列相互作用，增強HCV在肝細胞中的復(fù)制。宿主細胞的MIR3425P和MIR10AMIR10A可分別靶向柯薩奇病毒B組GROUPBCOXSACKIEVIRUSES，CVB的2C編碼區(qū)和3D編碼區(qū)，抑制或增強CVB的復(fù)制，提示宿主細胞MIRNA可識別CVB靶基因編碼區(qū)的互補序列，并在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控病毒基因的表達，進而影響病毒的復(fù)制和增殖。蚊是非常重要的蟲媒病毒傳播媒介，目前僅有岡比亞按蚊、斯氏按蚊、埃及伊蚊、致倦庫蚊以及白紋伊蚊鑒定出MIRNAS。WINTER等利用鳥槍克隆及生物信息學(xué)分析第一次證實了岡比亞按蚊18個MIRNAS的存在。MEAD等發(fā)現(xiàn)和鑒定了斯氏按蚊中的23個保守MIRNAS和及4個新MIRNAS。LI等發(fā)現(xiàn)了86個埃及伊蚊MIRNA。SKALSKY等采用高通量深度測序的方法從白紋伊蚊的C710細胞中鑒定出65個MIRNA，從庫蚊中鑒定出77個MIRNAS。對蚊蟲MIRNAS的功能了解得非常有限，有研究表明病原體入侵可影響蚊MIRNAS表達水平。WINTER等發(fā)現(xiàn)岡比亞按蚊MIR34在瘧原蟲感染后表達量上調(diào)5倍，而MIR12和MIR281表達量下降3倍，敲除DICER1和AGO1MRNA后的岡比亞按蚊對瘧原蟲的易感性升高，提示瘧原蟲的感染可能與岡比亞按蚊MIRNA的表達差異相關(guān)，MIRNAS可能參與岡比亞按蚊抗瘧原蟲感染。OSEIAMO等發(fā)現(xiàn)WOLBACHIA病毒感染前后的埃及伊蚊細胞內(nèi)的MIR12呈現(xiàn)表達差異，提示MIR12可能和病毒的感染相關(guān)。SCKALY等用西尼羅病毒感染白紋伊蚊C710細胞，MIR989和MIR92表達量沒有明顯變化，同樣條件下感染庫蚊，發(fā)現(xiàn)MIR989表達水平下調(diào)，而MIR92表達上調(diào)提示蚊MIRNAS表達差異可能與病毒感染有關(guān)。最近的研究證實埃及伊蚊的MIR375可通過抑制NFKB轉(zhuǎn)錄因子的活性而增強DENV2的感染。本課題組吳錦雅博士、鄭培民碩士運用SOLEX測序和NTHERNBLOT的方法在白紋伊蚊成蚊中檢測到MIRNAS，并檢測到雌蚊經(jīng)胸腔注射登革病毒后，蚊體內(nèi)大量MIRNAS出現(xiàn)表達差異，提示MIRNAS可能在白紋伊蚊抗登革病毒感染中起調(diào)控作用。目的我們在白紋伊蚊C636細胞中建立登革病毒蚊體外感染模型，期待通過了解登革病毒感染前后C636細胞中MIRNAS表達水平的變化，挑選在C636細胞中表達量豐富并且在登革病毒感染前后變化幅度較高的MIRNAS，預(yù)測其在登革病毒基因組中可能的靶標(biāo)基因測定MIRNAS表達水平的變化對靶基因表達水平的影響，初步探討蚊細胞內(nèi)MIRNA對登革病毒感染的調(diào)控作用，為登革病毒的防治提供一個新的思路。方法建立白紋伊蚊C636細胞DENV2感染模型，使用實時定量PCRREALTIMEQUANTITATIVEPOLYMERASECHAINREACTION，RTQPCR測定DENV2感染前后C636細胞內(nèi)MIRNAS的表達差異。使用RNAHYBRID軟件預(yù)測3種我們感興趣的MIRNAS在DENV2基因組中的靶標(biāo)，選擇在C636細胞中表達水平較高并在DENV2感染前后表達量變化明顯的MIR252，通過RTQPCRWESTERNBLOT測定C636細胞在轉(zhuǎn)染MIR252人工合成的類似物MIMIC或者反義抑制物INHIBIT后，其預(yù)測的靶基因登革病毒包膜蛋白ENVELOPPROTEIN，EPROTEINRNA蛋白表達水平的變化，了解MIR252在抗登革病毒感染中的作用。結(jié)果白紋伊蚊C636細胞感染DENV2后，細胞內(nèi)MIR252表達水平增高。經(jīng)配對T檢驗，與對照組比較，在感染后24小時HOUR，HR，MIR252表達水平增高32倍T9850，P0010，在感染后72HRS，MIR252表達水平增高21倍（T6751，P0021）。在DENV2感染的白紋伊蚊C636細胞細胞中轉(zhuǎn)染MIR252MIMIC，增強MIR252的表達24HRS，T89337，P＜000172HRS，T28508，P0001，可降低DENV2RNA的表達72HRS，T24319，P0002，WESTERNBLOT顯示E蛋白的表達受到抑制反之，在DENV2感染的白紋伊蚊C636細胞中轉(zhuǎn)染MIR252INHIBIT，降低細胞內(nèi)MIR252水平24HRS，T16381，P000472HRS，T33680，P0001，可增強DENV2RNA的表達72HRS，T43250，P0001，并可使E蛋白表達量增高。轉(zhuǎn)染了MIR252INHIBIT的C636CELLS上清液中的DENV2滴度明顯增高，與陰性對照相比較，P0034與MOCK相比較，P0019。將包含有與MIR252種子序列互補的E蛋白跨膜區(qū)克隆入海腎熒光素酶報告載體中，經(jīng)方差分析檢驗，與對照組比較，MIR252MIMIC能降低報告載體熒光素酶的表達F40454，P＜0001，提示MIR252和E蛋白基因中的互補序列存在相互作用。結(jié)論現(xiàn)有的結(jié)果顯示白紋伊蚊可能通過其編碼的MIR252抑制登革病毒E蛋白的表達，從而影響登革病毒的復(fù)制與增殖。據(jù)我們所知，這是第一次報道白紋伊蚊MIRNA對登革病毒編碼基因的抑制作用。

簡介：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文在昆蟲細胞中表達輪狀病毒我國地方株VP4并構(gòu)建病毒樣顆粒姓名霍云雯申請學(xué)位級別博士專業(yè)兒科學(xué)分子病毒學(xué)指導(dǎo)教師錢淵200151中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文在昆蟲細胞中表達輪狀病毒我國地方株VP4并構(gòu)建病毒樣顆粒摘要F輪狀病毒ROTAVIRUS，RV為呼腸孤病毒科輪狀病毒屬成員，目前＼至少可分為A～G七個組，造成人類感染的主要是A、B、C三組?，F(xiàn)已確定A組輪狀病毒是引起嬰幼兒腹瀉，特別是需要住院治療的重癥腹瀉的最重要病原。許多研究證明，疫苗產(chǎn)生的主動免疫與保護性抗體產(chǎn)生的被動免疫對嬰幼兒及動物的輪狀病毒感染性腹瀉有顯著的保護作用。因此，各國都在積極研究高效、安全的輪狀病毒疫苗及被動免疫保護性制劑。輪狀病毒為雙鏈RNA病毒，基因組含11個RNA節(jié)段，編碼6個結(jié)構(gòu)蛋白和5個非結(jié)構(gòu)蛋白。外殼蛋白VP4具有多種重要的生物學(xué)功能，但在病毒顆粒中含量很少，僅占15％，制備與純化均比較困難。VP4的高效表達將有利于對其生物學(xué)功能、抗原性和免疫原性的研究，表達的重組VP4可用于輪狀病毒感染性腹瀉的病原學(xué)研究，以及生產(chǎn)保護性抗體，預(yù)防病毒感染和減輕嬰幼兒腹瀉的病