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文檔簡介
1、α-淀粉酶(α-amylase,EC.3.2.1.1)普遍分布在動物、植物和微生物中,是一種重要的淀粉水解酶,被廣泛應用于淀粉加工、醫(yī)藥制造、食品制造、紡織品退漿、洗滌劑生產等行業(yè),是應用最為廣泛的酶制劑之一。在前期的工作中,我們從海洋宏基因文庫中篩選到了一個糖化型的α-淀粉酶基因AmyP,并在大腸桿菌中實現(xiàn)了可溶性高表達,它與已知的淀粉酶的序列相似性低于20%,代表了糖苷水解酶GH13家族的一個新的亞家族GH13-37。
2、 鑒于AmyP新穎的蛋白序列和進化地位,本研究嘗試挖掘該酶新型的催化功能。通過研究發(fā)現(xiàn),AmyP是生淀粉降解酶,在40℃,pH7.5的條件下,它能夠降解陸地來源的各種生淀粉,例如大米,小麥,玉米,馬鈴薯,土豆,豌豆,綠豆等,但是卻無法降解巖藻聚糖,海帶多糖和卡拉膠等海洋中常見的糖類。在降解生淀粉方面,AmyP表現(xiàn)出兩個顯著的特性。其一,對大米生淀粉具有顯著的偏好降解特性。其降解能力達到了118.5U/mg,顯著的高于其它種類淀粉。其二,
3、AmyP對大米生淀粉的降解速度非???,當?shù)孜餅?%大米生淀粉時,有效降解在2h之內完成;當?shù)孜餅?%大米生淀粉時,在1h內完成降解,其中最快的有效降解僅為30min。AmyP的這種快速偏好降解大米生淀粉的特性在已知的α-淀粉酶中從未被發(fā)現(xiàn)過,這是首次報道。這種獨特快速偏好的降解能力使AmyP在大米淀粉加工中可能具有巨大應用潛力。但是AmyP高效降解的維持時間較短,導致最終的水解效率并不是很高。分別從酶的穩(wěn)定性、產物抑制和底物變化三個方面
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