1、研究背景：間充質干細胞(MSC)的增殖和成骨分化能力減低可能是骨質疏松癥等疾病發(fā)病機制的重要環(huán)節(jié)，已有研究表明人參皂苷對這些疾病具有防治效果。最近有作者報告，人參皂苷能促進大鼠骨髓MSC的體外增殖，對MSC成骨分化的影響尚未見報道。
　　 目的：本工作旨在研究人參皂苷對骨髓MSC增殖和成骨分化的影響，揭示其作用機制，以深入認識人參皂苷對MSC的藥理作用，并為人參皂苷用于骨質疏松癥等疾病的防治提供實驗證據(jù)。
　　 方法：進

2、行小鼠骨髓MSC集落形成實驗、傳代培養(yǎng)和成骨誘導培養(yǎng)，分組在培養(yǎng)體系中加入不同劑量的人參總皂苷(終濃度為25～100mg/L)。測定MSC集落形成率、計數(shù)傳代擴增細胞和進行MTT比色試驗。在成骨誘導培養(yǎng)后，進行鈣結節(jié)茜素紅染色和堿性磷酸酶(ALP)活性檢測；而且應用實時熒光定量PCR檢測ALP和BMP-2的mRNA表達水平。
　　 結果：在人參總皂苷為100mg/L的體外培養(yǎng)體系中，MSC集落產(chǎn)率顯著增高，MSC傳代擴增細胞數(shù)明

3、顯高于對照組，而在25～50mg/L范圍內，MSC集落產(chǎn)率和傳代擴增細胞數(shù)的變化無顯著性意義。MSC傳代擴增細胞受100mg/L人參總皂苷作用24h后，MTT試驗吸光值(A490值)顯著高于對照組；而在50mg/L和100mg/L人參皂苷作用48h后，A490值均明顯高于對照組。茜素紅染色后的鈣結節(jié)計數(shù)結果顯示，成骨誘導液+100mg/L人參皂苷組與成骨誘導液對照組相比，鈣結節(jié)數(shù)量有明顯增多(P＜0.05)；其余實驗組與成骨誘導液組相比

4、差異無顯著性意義(P＞0.05)。與成骨誘導液對照組相比，在MSC傳代擴增細胞成骨誘導后的第14d、21d，成骨誘導液+100mg/L人參皂苷組的ALP活性顯著增高，而在誘導后第7d，ALP活性的差異沒有顯著性。25mg/L和50mg/L人參總皂苷對MSC傳代擴增細胞的ALP活性無明顯影響。在誘導培養(yǎng)體系中，與0mg/LGS相比，當GS為100mg/L時，成骨細胞的ALP mRNA表達水平明顯上升；而GS為50mg/L、100mg/L時

5、，BMP-2 mRNA呈高表達。與成骨誘導液對照組相比，成骨誘導液+100mg/L人參總皂苷組的ALP和BMP-2 mRNA表達水平均顯著增高；+50mg/L人參皂苷組的ALPmRNA表達水平也顯著增高，而BMP-2 mRNA的表達水平無明顯差異；+25mg/L人參總皂苷組的ALP和BMP-2 mRNA表達水平均無明顯差異。
　　 結論：人參總皂苷能促進體外原代培養(yǎng)的小鼠骨髓MSCs及其傳代擴增細胞的增殖。對小鼠骨髓MSCs傳代