1、學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：1、堅持以“求實、創(chuàng)新“的科學精神從事研究工作。2、本論文是我個人在導師指導下進行的研究工作和取得的研究成果。3、本論文中除引文外，所有實驗、數(shù)據(jù)和有關材料均是真實的。4、本論文中除引文和致謝的內容外，不包含其他人或其它機構已經發(fā)表或撰寫過的研究成果。5、其他同志對本研究所做的貢獻均已在論文中作了聲明并表示了謝意。作者簽名：日期：學位論文使用授權聲明本人完全了解南京師范大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，學

2、校有權保留學位論文并向國家主管部門或其指定機構送交論文的電子版和紙質版；有權將學位論文用于非贏利目的的少量復制并允許論文進入學校圖書館被查閱；有權將學位論文的內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索；有權將學位論文的標題和摘要匯編出版。保密的學位論文在解密后適用本規(guī)定。作者簽名：日期：摘要／Abstract摘要』腳舢幽舢舢刪J『『『『JJ『『ff『Jf刪Y17。2lJlt6fIHr16IIIP[10|H|IJ2IIrio‘背景：凋亡是有機體在漫長的進

3、化過程中發(fā)展起來的細胞自殺機制，在清除無用的、多余的或癌變的細胞，維持機體內環(huán)境穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮重要作用。最早對ProgrammeDCellDeathprotein2(PDCD2)研究發(fā)現(xiàn)該蛋白可能參與細胞凋亡。但隨著對其研究的深入，發(fā)現(xiàn)該蛋白似乎與細胞凋亡無關，但是和細胞的發(fā)育，細胞周期以及某些疾病有一定的聯(lián)系。PDCD2蛋白具有一個重要的功能結構域一PDCD2_C結構域。將帶有PDCD2一C結構域的蛋白都歸為PDCD2_C蛋白。調查發(fā)現(xiàn)

4、PDCD2_C蛋白似乎只存在真核生物細胞中。并且這類蛋白由看家基因編碼，在人和小鼠各個組織都有表達。在裂殖酵母中存在兩個PDCD2一C蛋白：SPACl3G609，PDCD2的同源蛋白本文中命名為pcdl；SPBC25H215，芽殖酵母PDCD2一C蛋白(乃：膨)的同源蛋白本文中命名為pcd20這兩個蛋白在裂殖酵母中的功能還未有報道，本文主要探究這兩個PDCD2蛋白的功能。_C實驗和結論：1首先用同源重組和隨機孢子分析法，證明了裂殖酵母中

5、pcdl為必需基因，pod2為非必需基因。這提示這兩個PDCD2_C蛋白在裂殖酵母中的功能可能不同。接著用高表達和低表達的pcdl的質粒，都能救活因敲除pcdl致死的單倍體。直接敲除裂殖酵母單倍體pc以敲除菌株能正常生長。這兩個實驗都再次證明pcdl為必需基因，pcd2為非必需基因。2用高表達和低表達N端帶2個FLAG標簽pcdl的質粒都能救活敲除pcdl的單倍體。但是用高表達的人PDCD2、芽殖酵母TSR4N端為pcdl，C端為人PD

6、CD2蛋白PDCD2_C結構域的融合蛋白、裂殖酵母pcd2和C端帶5個FLAG標簽pcdl的質粒都不能救活敲除了pcdl的單倍體。這些實驗提示：N端2個FLAG標簽對pc棚的定位和功能沒有太大影響；人和芽殖酵母的PDCD2一C蛋白與裂殖酵母pc以功能不同，也有可能在裂殖酵母中pcdl還有其他必需功能；人PDCD2_C結構域也不能替代裂殖酵母PDCD2_C結構域，可能因為人PDCD2一C結構域替代裂殖酵母的結構域后整個蛋白的空間結構遭到破

7、壞，導致蛋白功能喪失；pcdl和pcd2功能不同；C端的5個FLAG能破壞pcdl的空間結構導致蛋白功能喪失或者5個FLAG阻礙了pc棚與其相互作用蛋白的結合。3敲除pcd2的單倍體在面對逆境壓力時，生長狀態(tài)和野生型幾乎一致。這表示pcd2在裂殖酵母的應對逆境過程中沒有必需的作用。4利用酵母雙雜交系統(tǒng)中的篩選，與pcdl和pcd2相互作用的蛋白。發(fā)現(xiàn)moel和40S蛋白rps2602片段可能和pcdl相互作用。而SPACl09305(A