1、目的：
　　探討Notch在三鄰甲苯基磷酸酯（Tri-ortho-cresyl phosphate，TOCP）誘發(fā)SH-SY5Y細胞神經毒性中的關系，進一步闡述TOCP神經毒性的作用機制。
　　方法：
　　1.以不同濃度TOCP（0、0.25、0.50、1.0mM）處理SH-SY5Y細胞，同時設計平行實驗，先用 DAPT預處理SH-SY5Y細胞30min，再用TOCP(0、0.25、0.50、1.0mM)染毒處理48h

2、，用MTT方法檢測兩種處理對SH-SY5Y細胞存活率的影響；Western Blot檢測細胞蛋白表達水平。
　　2. DAPT預處理SH-SY5Y細胞30min，再染毒0.50mM TOCP24h，收集細胞（以0.1％DMSO為對照組），Western Blot檢測自噬蛋白 Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白水平；用自噬泡特異性染色劑MDC進行細胞染色，觀察各組自噬泡的變化。
　　3.采用全反式維甲酸誘導SH-SY5Y細胞分化

3、，DAPT預處理未分化和已分化的SH-SY5Y細胞30min后，用0.50mM TOCP染毒24h，以DMSO為對照組，Western Blot檢測NF-H，tau，p-tau蛋白表達量。
　　4.采用 DAPT預處理 SH-SY5Y細胞和 sh-Beclin1細胞30min，再用0.50mM TOCP染毒24h，Western Blot檢測兩組細胞系凋亡相關基因Bcl-2， BAX，Casepase-3蛋白表達。
　　結果

4、：
　　1.與對照組相比，隨著TOCP濃度增加，TOCP染毒組和DAPT預處理后染毒TOCP組，細胞存活率都隨之下降，但采用DAPT預處理阻斷Notch，再進行0.25mM，0.5mM TOCP染毒組的細胞存活率比單獨 TOCP染毒組高（P<0.05），而當TOCP染毒濃度為1.0mM時，與相應DAPT預處理組比較，存活率無顯著性差異（P<0.05）。
　　2. TOCP染毒組和 DAPT預處理后染毒 TOCP組抑制 SH-

5、SY5Y細胞Notch信號通路相關蛋白NIC1和Hes1蛋白表達（P<0.05），而DAPT預處理組的NIC1和Hes1蛋白表達更低（P<0.05）。
　　3. DAPT預處理SH-SY5Y后TOCP染毒組以及0.50 mM TOCP染毒組與對照組比較，DAPT預處理組Beclin1和LC3表達受抑制（P<0.05）。MDC染色結果顯示，DAPT預處理+0.50 mM TOCP染毒組產生的自噬泡數量比單獨TOCP染毒組減少。

6、>　　4.與對照組比較，DAPT預處理未分化和已分化SH-SY5Y細胞后再進行TOCP染毒，比單獨0.50mM TOCP染毒，NF-H蛋白表達水平上升(P<0.05)，但DAPT預處理組tau蛋白水平下降（P<0.05），而p-tau在0.50mM TOCP染毒組表達量最低（P<0.05）。
　　5. DAPT預處理SH-SY5Y細胞和sh-Beclin1細胞和0.50mM TOCP染毒，以DMSO為對照組，Western blo

7、t檢測相關凋亡蛋白，SH-SY5Y細胞中bcl-2/bax以及 Cleaved-caspase-3蛋白表達無顯著性差異（ P<0.05）。在sh-Beclin1細胞中，DAPT預處理+0.50 mM TOCP染毒組的bcl-2/bax比值比單獨0.50mM TOCP染毒高（P<0.05）。
　　結論：
　　1. TOCP可抑制Notch信號通路NIC1和Hes1蛋白表達。
　　2. DAPT阻斷Notch信號通路后，可