1、目的:
　　通過觀察中藥方劑清胰湯與移植同源骨髓間充質干細胞對大鼠重癥急性胰腺炎(SAP)所致肺損傷的影響，探討二者協(xié)同保護ALI作用及其可能的機制。
　　方法:
　　Sprague-Dawley SD)大鼠骨髓間充質干細胞(Bone marrow mesenchymal stemcells，BMSCs)體外分離、培養(yǎng)、擴增，觀察記錄大鼠BMSCs增殖規(guī)律及表面抗原CD34、CD45、CD29、CD90的表達。體外構建

2、肺組織細胞直接共培養(yǎng)體系，脂多糖(LPS)誘發(fā)肺細胞損傷。取骨髓間充質干細胞完全培養(yǎng)基(CompleteCondition Medium，CCM)、正常肺細胞培養(yǎng)基(Normal lung cell ConditionMedium，NCM)、受損肺細胞培養(yǎng)基(Injury lung cell Condition Medium，ICM)、清胰湯含藥血清培養(yǎng)基(Qingyi Decoction Condition Medium，QCM)及受

3、損肺細胞和清胰湯含藥血清培養(yǎng)基（Injury lung cell and Qingyi Decoction ConditionMedium，IQCM）誘導BMSCs向肺組織細胞分化，免疫熒光細胞化學鑒定肺泡Ⅰ型細胞水通道蛋白-5（Aquaporins-5，AQP-5）、肺泡Ⅱ型細胞表面蛋白C(Surfactant Protein C，SP-C)表達。健康SD大鼠125只，隨機分為假手術組（Sham operated group，Sham

4、 group，n=25）、急性胰腺炎組(severe acute pancreatitismodel group，SAP group，n=25)、骨髓間充質干細胞組(Bone-Mesenchymal stemcells group，BMSCs group，n=25)、清胰湯組(Qingyi Decoction，QYD group，n=25)，骨髓間充質干細胞加清胰湯組(Bone-Mesenchymal stem cells plus Q

5、ingyiDecoction group，BMSCs+ QYD group，n=25)。采用改良的膽胰管逆行注射法制備重癥急性胰腺炎肺損傷(SAP-ALI)模型。分別于造模后24小時，觀察大鼠行為學特征變化及死亡率，肺組織病理學改變，肺濕/干重比值(Wet-Dry weightratio，W/D)，測定血清淀粉酶、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)和丙二醛(Malondialdehyde，MDA)的含量，

6、ELISA檢測血清及肺組織勻漿Interleukin-1(IL-6)、Tumor Necrosis Factor(TNF-α)含量， PCR法鑒定肺泡細胞表面蛋白SP-A、SP-B、SP-C、水通道蛋白5(Aquaporins-5，AQP-5)mRNA表達，Western blotting法鑒定SP-C、AQP-5蛋白表達水平。
　　結果:
　　1、倒置光鏡下觀察大鼠BMSCs胞漿豐富，核胞比正常，呈長纖維細胞狀，細胞排列成

7、束狀、螺旋狀。流式細胞儀鑒定結果:BMSCs表面分子CD34-、CD45-，CD29+、CD90+。免疫熒光細胞化學檢測:AQP-5、SP-C陽性細胞在ICM、IQCM中表達，在NCM、CCM、QCM組中均表達陰性，IQCM組BMSCs向肺泡Ⅰ型細胞、肺泡Ⅱ型細胞分化率均較ICM組顯著性高(P＜0.01)。
　　2、與SAP組比較，給予清胰湯或BMSCs可降低重癥急性胰腺炎大鼠的死亡率(p＜0.05)，顯著減輕其肺組織的病理性損傷

8、，降低血清淀粉酶活性、MDA、IL-6、TNF-α水平(p＜0.05)，上調SP-A、SP-B、SP-C及AQP-5的mRNA及SOD水平，SP-C及AQP-5蛋白的表達顯著增高。炎癥介質、氧化應激因子的減少及肺組織相關蛋白的增多在QYD+BMSCs組與QYD組及BMCSs組的差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。
　　結論:
　　1.LPS體外損傷肺組織細胞能誘導大鼠BMSCs向肺泡Ⅰ、Ⅱ型細胞分化。
　　2.清胰湯可