三個miniSTR基因座熒光標記復合擴增體系的建立及其法醫(yī)學應用研究.pdf_第1頁
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1、四川大學碩士學位論文三個miniSTR基因座熒光標記復合擴增體系的建立及其法醫(yī)學應用研究姓名:蔣師申請學位級別:碩士專業(yè):法醫(yī)學指導教師:侯一平20070420叫J11人學碩f:論文中文摘要三個miniSTR基因座熒光標記復合擴增體系的建立及其法醫(yī)學應用研究研究生:蔣師導師:侯一平教授四川大學華西基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院成都(610041)目的本課題旨在建立新的miniSTR熒光標記復合擴增體系,并按照美國DNA分析方法技術工作組(TWGDA

2、M)的指導方案,進行法醫(yī)學應用性研究。方法從已有國內頻率資料的STR基因座中篩選出可用于設計MiniSTR引物的基因座,進行引物設計;用未標記的新引物在銀染顯色方法下進行復合擴增實驗,選出復合成功基因座定購熒光標記引物;制作等位基因分型標準物;采用美國ABl310遺傳分析儀進行熒光標記引物復合擴增試驗,并優(yōu)化擴增條件,對不同退火溫度下復合擴增的效果進行研究;對復合擴增系統(tǒng)的靈敏度、基因座的種屬特異性、案例應用、降解模型、陳舊樣本等法醫(yī)學

3、應用進行研究。結果成功設計了D19S591,D2S2944,D18S872基因座的小于130bp的miniSTR擴增引物,成功建立了D19S591。D2S2944,D18S872的miniSTR熒光標記復合擴增體系。這~擴增體系條件易于優(yōu)化,采用國產(chǎn)Taq酶進行擴增,即可得到滿意的擴增產(chǎn)物和分型結果。相對于國外昂貴的試劑盒,它是一種成本低廉但效率高的STR基因座復合擴增體系。法醫(yī)學應用性研究表明:三個基因座有較高的種屬特異性;該體系的檢

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