1、女性癌癥患者中，因化療損傷卵巢而導(dǎo)致的過早閉經(jīng)以及不孕是很常見的現(xiàn)象。對(duì)于這些病人來說，化療前成熟卵子/胚胎或者卵巢組織冰凍保存是她們保存生育能力的主要選擇。但是，對(duì)于她們卵巢功能的長期保護(hù)，尤其是生育能力的保存，以上方法是有局限性的。青春前期的女性由于卵巢功能尚未成熟，所以無法進(jìn)行成熟卵子或胚胎凍存；對(duì)于未婚的成年女性，胚胎凍存則需要捐獻(xiàn)者的精子，且卵子或胚胎凍存，都需要藥物促排卵操作，這個(gè)操作過程不僅耽誤癌癥的治療時(shí)間，同時(shí)也可能使

2、雌激素敏感性癌進(jìn)一步發(fā)展。目前卵巢組織冰凍保存還處于實(shí)驗(yàn)階段，且化療后再移植還存在引起癌癥復(fù)發(fā)的可能。因此，對(duì)于很多化療后獲得長期生存的不孕女性來說，尋找一種經(jīng)濟(jì)、持久、安全及可靠的方法來挽救他們的卵巢功能及生育能力是社會(huì)急需解決的一項(xiàng)大事。2009年Zou等首次從小鼠卵巢中分離得到雌性生殖干細(xì)胞，并證實(shí)了該干細(xì)胞在體內(nèi)可以形成卵子并產(chǎn)生后代，從而首次真正意義上的證實(shí)了哺乳動(dòng)物卵巢中存在生殖干細(xì)胞。2012年White等在驗(yàn)證了Zou等

3、實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上同時(shí)首次從育齡期婦女卵巢中分離得到女性生殖干細(xì)胞。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果將為運(yùn)用雌性生殖干細(xì)胞治療女性不孕甚至延緩卵巢衰老提供理論基礎(chǔ)?？紤]到現(xiàn)實(shí)中已經(jīng)有成千上萬的年輕女性患者因化療而導(dǎo)致卵巢功能受損甚至不孕，本研究通過化療誘導(dǎo)雌性小鼠卵巢性不孕來模擬女性患者化療后卵巢性不孕，探討雌性不孕小鼠卵巢內(nèi)是否存在生殖干細(xì)胞以及用此干細(xì)胞移植能否挽救因化療導(dǎo)致的卵巢功能受損及不孕。我們成功的從化療后不孕小鼠卵巢內(nèi)分離得到了生殖干細(xì)胞，并通過RT

4、-PCR，免疫熒光，堿性磷酸酶染色以及核型分析等多方面鑒定該細(xì)胞的特性；功能方面，利用GFP慢病毒轉(zhuǎn)染干細(xì)胞并移植到化療不孕小鼠卵巢內(nèi)，小鼠生育能力得到恢復(fù)并產(chǎn)生后代；通過PCR和Southern blot鑒定鼠尾基因組DNA中的GFP基因，證實(shí)了GFP轉(zhuǎn)基因鼠是來源于生殖干細(xì)胞分化后受精而產(chǎn)生的。本實(shí)驗(yàn)首次證實(shí)了化療后不孕小鼠卵巢內(nèi)存在雌性生殖干細(xì)胞，且該干細(xì)胞卵巢移植后可以修復(fù)卵巢功能以及生育能力，這為臨床上化療后卵巢功能受損以及不