1、背景：
　　關節(jié)軟骨由于無血管、神經(jīng)及淋巴通過，其一旦損傷則很難自行修復，已知組織工程技術促進軟骨的損傷修復，研究證實：在體外，軟骨細胞作為種子細胞在體外培養(yǎng)極易發(fā)生去分化；在體內(nèi)，經(jīng)由其發(fā)育而來的修復組織的表型及力學特性均較正常關節(jié)軟骨差，而且隨著體內(nèi)修復時間的推移，修復組織顯現(xiàn)出現(xiàn)快速退變的特征，制約其臨床應用的前景。軟骨單位（chondron）被作為關節(jié)軟骨的基本功能結構，其主要由軟骨細胞與細胞周基質(zhì)(PCM)組成，其中PC

2、M對軟骨細胞代謝和力學傳導起著重要作用。體外實驗證實：軟骨單位與軟骨細胞以1:1在海藻酸鈉凝膠球中共培養(yǎng)，其生物學特性優(yōu)于其他比例；然而，軟骨單位和1:1共培養(yǎng)組對體內(nèi)軟骨缺損修復效果如何并不是很清楚。
　　目的：
　　探討使用海藻酸鈉立體培養(yǎng)的軟骨單位、立體共培養(yǎng)的軟骨單位與軟骨細胞（1:1）移植對兔膝關節(jié)軟骨缺損修復的作用，并對比分析兩者修復效果。
　　方法：
　　1.選取2月齡新西蘭兔5只，通過酶解法將膝關

3、節(jié)軟骨消化成軟骨細胞和軟骨單位，與1.2％海藻酸鈉凝膠混合，分別制備成密度為5.8×106/mL的軟骨細胞、軟骨單位以及軟骨細胞和軟骨單位（1:1）混懸液，最后使用模具分別制成內(nèi)含單純軟骨細胞、單純軟骨單位和軟骨細胞與軟骨單位（1:1）共培養(yǎng)的三種海藻酸鈉凝膠球（大小約25μL/個）；2.選取4月齡新西蘭兔45只（4.0?0.2 Kg），通過取雙側股骨滑車內(nèi)外側髁連線中點行直徑為4mm，深度為3mm全層軟骨缺損，隨機分為3組，將軟骨細胞

4、、軟骨單位與軟骨單位和軟骨細胞（1:1）混合體植入缺損處；3.分別于植入后6、12、24周，通過MRI評估、大體觀察、HE染色、番紅O染色、免疫組化染色、Rt-PCR檢測以及TUNEL原位檢測凋亡狀況，以此來綜合判斷缺損修復情況。
　　結果：
　　1.MRI Roberts評分顯示：自6周至24周，三組評分均呈增高趨勢；12周時共培養(yǎng)組較軟骨細胞組和軟骨單位組均明顯增高（P<0.05）；24周時共培養(yǎng)組較軟骨單位組和軟骨細胞

5、組增高顯著（P<0.05）。2.II型膠原免疫組化：自6周到24周，軟骨單位組和共培養(yǎng)組其表達量呈增多趨勢；在6周和12周軟骨單位組其表達量均高于共培養(yǎng)組，而24周其共培養(yǎng)組高于軟骨單位組。3.Wakitani組織修復評分顯示：隨著時間遞增，軟骨單位組及共培養(yǎng)組評分均呈逐漸降低趨勢，且12周與6周相比有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；各時間組共培養(yǎng)組均明顯低于軟骨單位組（P<0.05）。4.Rt-PCR顯示：6周至24周，共培養(yǎng)組中COL-

6、II,SOX-9 mRNA表達量均逐漸增多，軟骨單位組COL-II mRNA表達量逐漸增多；6周至12周，軟骨單位組和共培養(yǎng)組COL-X,MMP-13 mRNA表達量呈降低趨勢，24周時兩者均增高，但共培養(yǎng)組較軟骨單位組增高幅度較??；6周和12周軟骨單位組COL-II及SOX-9均高于共培養(yǎng)組，而24周兩指標共培養(yǎng)組均高于軟骨單位組；三個時間點內(nèi)，COL-X及MMP-13共培養(yǎng)組均低于軟骨單位組。5.TUNEL細胞凋亡檢測顯示：自6周至

7、24周，軟骨細胞組細胞凋亡率呈增高趨勢，且24周較12周增高有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；軟骨單位組細胞凋亡率有增高趨勢；自6周至12周共培養(yǎng)組細胞凋亡率明顯降低（P<0.05），而24周較12周共培養(yǎng)組細胞凋亡率增高顯著（P<0.05）；在三個時間點共培養(yǎng)組細胞凋亡率均低于軟骨單位組和軟骨細胞組。
　　結論：
　　1.軟骨單位與軟骨細胞（1:1）共培養(yǎng)作為種子細胞，早期對缺損組織有好的修復作用，晚期可延緩修復組織退化。2.