1、目的:不同類型的骨關(guān)節(jié)損傷和疾病均可導致關(guān)節(jié)軟骨缺損,因關(guān)節(jié)軟骨具有無直接的血管、淋巴管、神經(jīng)供應以及代謝率低的生理特性,在一般的情況下自身難以修復,因而一直以來,關(guān)節(jié)軟骨缺損修復都是國內(nèi)外醫(yī)學界普遍關(guān)注和迫切需要解決的問題。目前軟骨缺損修復的治療方法普遍仍處于研究階段,對于如何提高關(guān)節(jié)軟骨缺損修復的質(zhì)量已有許多報道。但目前各種促進關(guān)節(jié)軟骨缺損修復的方法,均有其不足之處,尚需進一步改進。本實驗通過軟骨下骨鉆孔方法建立兔膝關(guān)節(jié)軟骨全層缺損

2、模型,觀察兔膝關(guān)節(jié)軟骨全層缺損修復的過程,研究規(guī)則被動運動(RPM)對關(guān)節(jié)軟骨全層缺損修復的影響。
　　 方法:將30只新西蘭雄性兔60個膝關(guān)節(jié),用直徑3.2mm的骨科手術(shù)電鉆,于股骨髁面處鉆一直徑為3.2mm全層軟骨缺損,深度以缺損區(qū)滲血為準,造成直徑為3.2mm大小的關(guān)節(jié)軟骨全層缺損模型,并將其隨機分為三組:A組、B組和C組,每組各10只兔,20個兔膝關(guān)節(jié)。A組:于術(shù)后第1天開始,即進行每天8小時的RPM(每兔每20分鐘進行

3、一次為時2分鐘的持續(xù)被動運動,頻率控制在60次/分,上下午各4小時RPM)和籠內(nèi)自由活動;B組:于術(shù)后第1天開始,即進行每天2小時的RPM(每兔每20分鐘進行一次為時2分鐘的持續(xù)被動運動,頻率控制在60次/分,上下午各1小時RPM)和籠內(nèi)自由活動;C組:僅在籠內(nèi)自由活動。分別于RPM干預4周和RPM干預12周時處死各組半數(shù)兔,再次稱重并進行組間體重及增加體重比較,取各組關(guān)節(jié)軟骨缺損修復組織,并進行大體形態(tài)觀察評分;蘇木素一伊紅染色(即H

4、E染色)的組織學形態(tài)觀察;番紅O染色研究蛋白多糖的表達以及免疫組織化學研究Ⅱ型膠原的表達,并進行評分。
　　 結(jié)果:1在術(shù)前、RPM干預4周和RPM干預12周的各組兔平均體重及平均增加的體重無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。2 RPM干預4周、RPM干預12周各組關(guān)節(jié)軟骨臟染色結(jié)果觀察及與正常軟骨比較,A組為類軟骨組織修復,修復組織表面較平整,內(nèi)含細胞形態(tài)與正常關(guān)節(jié)軟骨細胞相似,細胞層次較明顯,排列較規(guī)律,下潮線基本恢復。B組以類軟

5、骨組織修復為主,修復組織表面基本平整,內(nèi)含細胞較正常關(guān)節(jié)軟骨細胞少,形態(tài)近似,排列欠規(guī)律,細胞層次不明顯,下潮線部分恢復。C組可見大量纖維組織修復,修復組織表面欠平整,缺損兩端與正常關(guān)節(jié)軟骨部分融合,內(nèi)含細胞形態(tài)與正常關(guān)節(jié)軟骨細胞差別較大,排列不規(guī)律,細胞層次不明顯,下潮線消失。RPM干預4周和RPM干預12周,A組大體形態(tài)學評分和組織學評分高于B組和C組,有顯著性差異(P＜0.05),但是,B組與C組的大體形態(tài)學評分和組織學評分差異無

6、顯著性(P＞0.05)。3RPM干預4、RPM干預12周時各組番紅O染色結(jié)果采用秩和檢驗(等級資料的多個樣本比較Kruskal-Wallis H檢驗)進行各組間比較,然后再進行兩樣本間比較(等級資料的兩樣本比較Wilcoxon檢驗),α取0.05。結(jié)果示:RPM干預4及RPM干預12周時各組間番紅O染色比較,A組關(guān)節(jié)軟骨番紅O染色深度強于B組和C組(P＜0.05)。B、C兩組間的染色標本染色差異無顯著性(P＞0.05)。4免疫組化結(jié)果:

7、RPM干預4周,Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達共12例,其中A組6例,B組4例,C組2例;RPM干預12周時,Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達共16例,其中A組9例,B組5例,C組2例。統(tǒng)計學結(jié)果顯示:RPM干預4周時,各組間Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達無統(tǒng)計學意義,尚不能認為RPM干預4周時各組間Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達有差別。RPM干預12周時,A組Ⅱ型膠原陽性表達高于B組和C組(P＜0.05),B、C兩組間的染色標本例數(shù)差異無顯著性(P＞0