1、目前,研究NF-κB調控靶基因表達常用的研究手段是:①電泳遷移率改變實驗(EMSA),確定是否具有與轉錄因子結合的作用位點;②South-western,確定探針結合的轉錄因子的分子量;③抗體超遷法,研究是哪個亞基在轉錄調控中發(fā)揮主要作用.這些技術方法成熟、規(guī)范,但仍存在不足,如①實驗結果不能最終確定該轉錄因子的確是靶基因的轉錄調控分子.②缺乏細胞水平或體內實驗的進一步驗證.因此,如能特異性阻斷轉錄因子表達,再檢測受調控的靶基因是否發(fā)生

2、改變,就能驗證上述實驗結果.RNA干涉(RNAi)技術阻斷基因表達具有高穩(wěn)定、高效率和高特異的特點,是當前研究基因功能最有力的工具之一,利用RNAi技術特異阻斷NF-κB的表達,在細胞水平分析驗證NF-κB對Hepcidin的轉錄調控作用并研究其分子機制是該課題的出發(fā)點.研究目的探討轉錄因子NF-κB參與Hepcidin基因急性時相表達的轉錄調控的可能性;`分析NF-κB參與Hepcidin基因轉錄調控的分子機制.結論1. 轉錄因子NF