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文檔簡介
1、目的:研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)對 HL-60細胞人端粒酶逆轉錄酶(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因啟動子及相關轉錄因子NF-κB的作用機制。
方法:1.將不同濃度的As2O3作用 HL-60細胞,利用實時熒光定量PCR技術和Western blotting技術分別檢測hTERT、NF-κB在mRNA水平和蛋白水平上的變化2.利用
2、RNAi技術干擾NF-κB基因表達,利用實時熒光定量PCR技術和Western blotting技術,分別檢測 HL-60細胞hTERT、NF-κB在mRNA水平和蛋白水平的表達變化,同時利用CCK-8分析法,流式細胞術分別檢測 HL-60細胞的增殖和凋亡變化。
結果:1.不同濃度的As2O3作用于HL-60細胞后,hTERT、NF-κB在mRNA和蛋白水平上的表達受到明顯抑制(P<0.01)。2.沉默轉錄因子NF-κB的表達
3、,hTERT、NF-κB在mRNA和蛋白水平的表達受到明顯抑制(P<0.01)。3.沉默轉錄因子NF-κB的表達,有效的抑制HL-60細胞的增殖(P<0.01),以干擾48h最為顯著。4.沉默轉錄因子NF-κB的表達,有效的促進HL-60細胞的凋亡(P<0.01)。
結論:1.不同濃度的As2O3作用于HL-60細胞后,可促進HL-60細胞凋亡,并呈一定的量效關系。2.沉默轉錄因子NF-κB的表達可促進HL-60細胞的凋亡,抑
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