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文檔簡介
1、目的:觀察唑來膦酸對體外大鼠成骨細胞增殖及IGF-1表達的影響,進而分析其對成骨質(zhì)量的影響,為臨床用藥提供一定的理論依據(jù)。
方法:1培養(yǎng)大鼠成骨細胞,并觀察其形態(tài)和功能。2 實驗分組:實驗組:含有不同濃度唑來膦酸(10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞。對照組:使用普通培養(yǎng)基(唑來膦酸含量0mol/L)培養(yǎng)的細胞。3 以大鼠成骨細胞為體外實驗模型,采用四甲基偶氮唑
2、鹽(MTT)比色法檢測不同濃度唑來膦酸作用于原代培養(yǎng)的乳鼠成骨細胞7天后的增殖情況,測定OD值。使用ALP 試劑盒檢測堿性膦酸酶的活性。4不同濃度唑來膦酸(10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L、0mol/L)干預原代培養(yǎng)的乳鼠成骨細胞7天后,通過ELISA 方法檢測IGF-1表達水平。5 統(tǒng)計學方法:實驗所得的數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差標示,采用spss13.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析,各組總體上有
3、無差別采用單因素方差分析,組間比較采用LSD法分析,p<0.05為有統(tǒng)計學意義。
結(jié)果:1我們培養(yǎng)的大鼠成骨細胞多呈長梭形,堿性膦酸酶染色呈陽性,培養(yǎng)液中加入β-甘油膦酸鈉和維生素C 培養(yǎng)15天后茜素紅染色陽性。2不同濃度的唑來膦酸(10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L、0mol/L)作用于原代成骨細胞7天后,唑來膦酸濃度≥10-5mol/L時抑制成骨細胞增殖,與對照組比較,OD值
4、顯著減少(P<0.01)。唑來膦酸濃度為10-6-10-7mol/L時,與對照組比較,統(tǒng)計學差異均無顯著性。(P>0.05),不影響細胞增殖。3 唑來膦酸對成骨細胞生成ALP的抑制作用在≥10-6mol/L時出現(xiàn),比對成骨細胞增殖的抑制作用更明顯。4通過ELISA 定量檢測原代培養(yǎng)的成骨細胞IGF-1的表達。結(jié)果顯示,唑來膦酸濃度在10-6-10-7mol/L時,不影響IGF-1的表達,即較低濃度的實驗組與對照組比較統(tǒng)計學差異無顯著性(
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