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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究以湖南漢壽地方甘蔗品種為誘變?cè)囼?yàn)材料,構(gòu)建其組織培養(yǎng)體系,研究不同濃度的EMS溶液處理愈傷組織、組培芽和田間莖芽的誘變效果,確定誘變最適劑量。為了準(zhǔn)確篩選得到突變植株,利用95份甘蔗材料對(duì)SSR引物進(jìn)行多態(tài)性篩選,最終利用獲得的SSR核心引物對(duì)誘變材料進(jìn)行鑒定,篩選獲得突變體,同時(shí)結(jié)合田間農(nóng)藝性狀對(duì)突變體進(jìn)行評(píng)價(jià)。研究結(jié)果如下:
1甘蔗組織培養(yǎng)體系的構(gòu)建中,不同濃度2,4-D對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)率高低順序?yàn)?0mg/L>3.
2、5mg/L>4.0mg/L>25mg/L>2.0mg/L,最大分化率為93.92%;愈傷組織分化培養(yǎng)基中添加6-BA與NAA時(shí),甘蔗愈傷組織平均分化率在70.00%到95.00%之間,當(dāng)添加NAA和KT時(shí),平均分化率則低于70.00%,添加6-BA比添加KT分化效果更顯著;無(wú)菌芽增殖的培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA、NAA、KT激素組合,在一定的范圍內(nèi)濃度越高,增殖系數(shù)越大,但是到達(dá)一定值后反而會(huì)隨之降低。
2EMS誘變甘蔗愈
3、傷組織、組培芽以及田間莖芽時(shí),處理相同時(shí)間的情況下,隨著EMS溶液濃度的增加,生長(zhǎng)勢(shì)均呈現(xiàn)下降的趨勢(shì);同樣當(dāng)EMS誘變濃度相同時(shí),隨著處理時(shí)間的增加,生長(zhǎng)勢(shì)也呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。
3從已公布的68對(duì)SSR引物中,篩選獲得21對(duì)多態(tài)性較高的核心引物,其中PIC值最大的是0.9279,最小值為0.7855,平均值為0.8664。本研究采用19個(gè)群體共95份材料對(duì)21對(duì)核心引物的多態(tài)性進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果表明UPGMA聚類圖可將19個(gè)群體劃分
4、為4個(gè)亞群,同時(shí)群體結(jié)構(gòu)分析將其劃分為6個(gè)亞群,95份驗(yàn)證材料在21對(duì)引物中表現(xiàn)出豐富的多樣性。即21對(duì)SSR引物能夠很好的區(qū)分本研究的各個(gè)材料,可用于突變材料的檢測(cè)。
4利用21對(duì)引物對(duì)經(jīng)EMS誘變的愈傷組織和組培芽成活的共320株植株進(jìn)行多態(tài)性擴(kuò)增,均未檢測(cè)出遺傳變異植株。而對(duì)經(jīng)EMS溶液處理的田間莖芽篩選出的共1000株植株進(jìn)行多態(tài)性擴(kuò)增,共檢測(cè)出31株突變株。
5對(duì)突變株及對(duì)照植株的七項(xiàng)田間農(nóng)藝性狀進(jìn)行調(diào)查,
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