1、家蠶絲素蛋白具有優(yōu)良的生物相容性，其用作組織工程支架等生物醫(yī)用材料前景廣闊。但未經交聯的絲素材料易溶于水，難以實際應用。尋求一種使絲素蛋白材料的生物相容性和物理性能都較好，且可調控其生物降解速率的新的交聯手段，是絲蛋白生物材料領域的迫切需求。酪氨酸酶是一種含銅的金屬酶，廣泛分布于微生物、動植物及人體中，與生物體合成色素直接相關。本文用酪氨酸酶催化絲素大分子間的交聯反應，制備再生絲素蛋白材料，對交聯絲素材料的結構、物理性能以及體外酶降解行

2、為進行系統性的研究，并以絲素膜為載體進行L929細胞體外培養(yǎng)，研究交聯絲素膜的細胞相容性。
　　 首先，用流延法制備酪氨酸酶催化交聯的絲素膜。熱水溶失率的測試結果表明交聯后絲素膜的耐水性得到顯著提高，膜的交聯度隨著酪氨酸酶添加量的增加而有所增大。交聯膜的紅外吸收光譜顯示，在酪氨酸酶的催化作用下，絲素蛋白的酪氨酸殘基氧化為鄰苯醌，并與自由氨基發(fā)生分子間和分子內的交聯。氨基酸分析結果表明，經交聯后膜內酪氨酸和賴氨酸含量減少，進一步說

3、明酪氨酸酶能夠催化絲素蛋白中的酪氨酸和賴氨酸發(fā)生相互作用從而有效地交聯絲素蛋白。X-射線衍射結果表明交聯絲素膜仍以無定形結構為主，與未經交聯的絲素膜相比，凝聚態(tài)無顯著變化。絲素膜經酪氨酸酶催化交聯后，斷裂強度有所提高，斷裂伸長率變化不明顯。
　　 其次，用冷凍干燥法制備酪氨酸酶催化交聯的多孔材料。研究表明，經酪氨酸酶催化交聯后，絲素多孔材料的熱水溶失率明顯降低。紅外吸收光譜、X-射線衍射和熱分析結果表明，交聯后的多孔材料以無定形

4、結構為主。交聯多孔材料的孔徑、孔隙率隨著絲素溶液濃度的增大和冷凍溫度的降低而減小。
　　 再次，選擇膠原酶IA作為體外催化絲素蛋白材料水解的模型酶，研究不同交聯度的絲素膜的體外生物降解行為。結果表明，隨著絲素膜交聯度的增大，其降解速率顯著減緩，降解產物中的游離氨基酸含量減少。通過調節(jié)交聯度，可以調控絲素膜的生物降解速率。
　　 最后，通過體外細胞培養(yǎng)研究了L929細胞在酪氨酸酶催化交聯絲素膜上的粘附、生長和增殖狀態(tài)。用熒