改性葡聚糖和蛋白質(zhì)作為功能高分子的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、從材料學(xué)角度看,聚糖、蛋白質(zhì)以及聚核苷酸可視作生物體的基石。當(dāng)前,這三類天然高分子材料正向功能化、智能化、精細(xì)化和環(huán)境友好化方向發(fā)展,使其由結(jié)構(gòu)材料向具有光、聲、電、生物醫(yī)學(xué)、仿生、催化、分離、分析及能量轉(zhuǎn)換等效應(yīng)的納米功能材料方向發(fā)展。葡聚糖類材料與生物組織具有良好的相容性,無(wú)毒,而且可以在指定位置通過(guò)酶進(jìn)行降解,因此在生物技術(shù)和生物制藥等很多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。在生物制藥方面,改性葡聚糖經(jīng)常被做成納米載藥微粒,作為藥物控制釋放的載體;

2、在生物技術(shù)方面,以其良好的生物降解性能,可以被用來(lái)作為分離材料。某些蛋白質(zhì)如酶是生物催化劑,以其高效的催化效率和結(jié)構(gòu)的特異選擇性而受到廣泛的關(guān)注,還有其他的生物材料雖然不屬于酶,但是他們也表現(xiàn)出很好的酶類材料的特性,因此模擬酶和類酶材料的研究也得到了重視。對(duì)它們進(jìn)行研究可以為開發(fā)更多的友好新材料提供了更為廣泛的應(yīng)用基礎(chǔ)。 本論文采用淀粉、殼聚糖和二乙胺乙基-葡聚糖等葡聚糖類材料制得了生物分離材料和納米藥物載體;利用天然酶和蛋白質(zhì)

3、類酶材料的高效催化性能,研究了酶促反應(yīng)測(cè)定微量過(guò)氧乙酸濃度的新方法。對(duì)天然高分子的改性,采用了脫?;ⅵ幂椛浣到?、催化反應(yīng)、接枝和交聯(lián)等功能化實(shí)驗(yàn)方法,研究的主要內(nèi)容和結(jié)論如下: 1、馬來(lái)酸酐和淀粉在不同的反應(yīng)條件下進(jìn)行酯化反應(yīng):以二甲基亞砜為溶劑,不添加催化劑使馬來(lái)酸酐和淀粉反應(yīng);以N,N-二甲基甲酰胺為溶劑,不添加催化劑使馬來(lái)酸酐和淀粉反應(yīng);以N,N-二甲基甲酰胺為溶劑,加入吡啶為催化劑,改變時(shí)間和溫度等條件來(lái)進(jìn)行反應(yīng)。對(duì)反

4、應(yīng)后得到的產(chǎn)物用傅立葉變換紅外光譜儀進(jìn)行掃描,證明三種方式都可以使馬來(lái)酸酐接枝在淀粉分子鏈上;比較三種方法下馬來(lái)酸酐的取代度,沒(méi)有催化劑作用下的接枝產(chǎn)物,馬來(lái)酸酐取代度大概為5%,使用催化劑進(jìn)行反應(yīng)得到的接枝產(chǎn)物的馬來(lái)酸酐對(duì)羥基的取代度可以達(dá)到12%,羧基化程度比較高。 2、甲殼素用輻射劑量分別為40Gy、60Gy、80Gy的γ射線進(jìn)行輻照,經(jīng)過(guò)輻照的殼聚糖(CTS)的脫乙酰度隨著輻射劑量的增加而增加。對(duì)輻照過(guò)的殼聚糖和未經(jīng)輻照

5、過(guò)殼聚糖用粘度法測(cè)其分子量,未經(jīng)輻照過(guò)的殼聚糖分子量為2.71×105,脫乙酰度為77.26%;經(jīng)過(guò)輻照過(guò)的殼聚糖其分子量分別為1.78×105、1.07×105和1.00×105,脫乙酰度分別為82.53%、88.36%、90.07%。通過(guò)對(duì)硅膠進(jìn)行硅烷化,利用Shif堿反應(yīng),用乙二醛作CTS交聯(lián)劑和氨基化硅膠為偶聯(lián)劑,制得結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的2-(1,2-乙二醛)-亞胺-2-脫氧-β-D-葡聚糖樹脂,并接枝于硅烷化TCL層析硅膠,得到了硅膠接

6、枝2-乙二醛殼聚糖吸附劑。該新型吸附劑對(duì)金屬離子Cd2+、pb2+的吸附量大,吸附速度快,達(dá)到平衡的時(shí)間大為縮短。 3、用二乙胺乙基-葡聚糖和十六烷基三甲基溴化胺對(duì)聚氰基丙烯酸丁酯進(jìn)行修飾,使其成為陽(yáng)離子納米粒,用原子力顯微鏡對(duì)粒度進(jìn)行分析,得到的粒子的平均粒徑為87nm;用制得的陽(yáng)粒子納米粒吸附反義寡聚核苷酸,對(duì)其載藥的條件進(jìn)行優(yōu)化,得到當(dāng)pH為7時(shí)載藥效果最好,此時(shí)納米粒子的濃度為118.6mg.L-1,載藥量達(dá)到85.3μ

7、g.L-1,包封率為100%。 4、過(guò)氧乙酸(PacA)室內(nèi)作消毒劑時(shí),在空氣中的含量很低,用通常的化學(xué)分析方法很難檢測(cè)到。過(guò)氧乙酸以噴霧法和熏蒸法進(jìn)行空氣消毒,用氣體吸收管現(xiàn)場(chǎng)采樣,以酶催化分光光度法測(cè)定室內(nèi)環(huán)境中的微量過(guò)氧乙酸消毒劑的含量。實(shí)驗(yàn)證明PAcA在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化作用下,當(dāng)磷酸鹽緩沖液存在時(shí)能和苯酚、4-氨基安替比林發(fā)生Trinder反應(yīng)。與過(guò)氧化氫的酶催化分光光度法相似,35℃生成的醌式染料30min

8、顯色完全,在505nm處有最大吸收,對(duì)應(yīng)該波長(zhǎng)的吸光系數(shù)為12.72L/(mmol·cm),測(cè)量過(guò)氧化物的工作曲線的線性回歸方程為A=0.0038+12.72c(μmol.L-1),線性相關(guān)系數(shù)ρ>0.99,溶液組分(PAcA+H2O2)的檢出濃度為3.09μmol.L-1,對(duì)應(yīng)25mL過(guò)氧化物檢出限為7.73nmol,過(guò)氧乙酸的檢出限0.235μg。發(fā)展了一種過(guò)氧乙酸痕量分析的簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和靈敏的酶促反應(yīng)顯色方法。 5、用牛血紅

9、蛋白(BHb)代替辣根過(guò)氧化物酶(HRP)作為類酶催化劑,并嘗試將BHb鍵合到CTS上作為固定化類酶。在磷酸鹽緩沖液存在時(shí),使過(guò)氧乙酸和苯酚、4-氨基安替比林發(fā)生Trinder反應(yīng)??疾炝藀H值、時(shí)間和溫度對(duì)反應(yīng)的影響。通過(guò)正交試驗(yàn)確定了反應(yīng)的最佳條件為反應(yīng)溫度50℃、反應(yīng)時(shí)間50min、苯酚的量1.5mL、pH值為7.73。用過(guò)氧乙酸以噴霧法和熏蒸法進(jìn)行空氣消毒,用氣體吸收管現(xiàn)場(chǎng)采樣,以酶催化分光光度法測(cè)定室內(nèi)環(huán)境中的微量過(guò)氧乙酸消毒

10、劑的含量。測(cè)量過(guò)氧化物的工作曲線的線性回歸方程為A=0.0607+0.525c(μmol.L-1),線性相關(guān)系數(shù)ρ>0.99,溶液組分(PAcA+H2O2)的檢出濃度為17.346μmol.L-1,對(duì)應(yīng)25mL過(guò)氧化物檢出限為43.365nmol,過(guò)氧乙酸的檢出限0.330μg。 總之,葡聚糖類材料的功能化和蛋白質(zhì)類酶材料的催化應(yīng)用的研究,為進(jìn)一步開發(fā)用途廣泛、性能優(yōu)良的新型藥物載體和吸附劑提供了重要的理論和實(shí)踐基礎(chǔ),也使仿生分

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