1、目的:
　　建立去卵巢大鼠骨質疏松模型，采用復方腦復康、復方阿司匹林和前兩者組成的四藥復方對該骨質疏松模型進行干預，觀察三組復方藥物對骨質疏松的預防作用并將其與雌激素替代療法進行比較，探討三組復方藥物預防骨質疏松的作用機制及優(yōu)越性。
　　方法:
　　4月齡SPF級雌性未交配SD大鼠54只，體重（254±20）g，隨機分為7組，除基礎組6只外，其余每組8只。基礎組(BAS):不給藥，實驗開始即處死取材;假手術組(SHAM

2、)行假手術，給予溶劑對照;其他組均行雙側卵巢切除術，去卵巢組(OVX)給予溶劑對照;己烯雌酚組(D30)給予己烯雌酚30μg/kg/d;復方腦復康組(OVX+P-S)給予復方腦復康（康力龍2.15mg/kg/d+腦復康0.864g/kg/d）;復方阿司匹林組(OVX+A-D10)給予復方阿司匹林(阿司匹林9mg/kg/d+己烯雌酚10μg/kg/d);四藥復方組給予(OVX+A-D10+P-S)給予復方阿司匹林（阿司匹林9mg/kg/d

3、+己烯雌酚10μg/kg/d）和復方腦復康（康力龍2.15mg/kg/d+腦復康0.864g/kg/d）。所有藥物按5ml/kg灌胃給藥，每天一次，連續(xù)90d。所有動物實驗結束前第14d、13d各行頸部皮下注射四環(huán)素(35mg/kg)，作為第1次熒光標記，在實驗結束前第4d、3d各行頸部皮下注射鈣黃綠素(10mg/kg)作為第2次熒光標記，以在骨表面形成綠色雙熒光標志，兩次熒光標記間隔時間為10d。實驗結束時，心臟取血處死大鼠，取血清及

4、大腦勻漿作生化指標檢測;取左側脛骨和第4腰椎進行骨組織形態(tài)計量學參數測量;取左股骨和第5腰椎進行骨密度和生物力學參數測量;取左股骨測定羥脯氨酸含量;取子宮行石蠟包埋，HE染色后進行形態(tài)學分析觀察和子宮內膜厚度測量;取主要臟器測定器官指數。
　　結果:
　　1.去卵巢后大鼠發(fā)生典型骨質疏松的變化:
　　去卵巢后大鼠與假手術大鼠比較，具有以下特點:
　　(1)脛骨上段松質骨的骨丟失明顯，表現為骨小梁面積百分數(％Tb

5、.Ar)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁數目(Tb.N)均較假手術對照組顯著降低(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)，骨小梁分離度(Tb.Sp)顯著增加（P＜0.05）;熒光周長百分數(％L.Pm)和骨形成率(BFR/TV)也呈顯著增加(P＜0.05，P＜0.05)。破骨細胞數量和周長百分數均顯著升高(P＜0.01，P＜0.01)。
　　(2)腰椎松質骨的骨丟失明顯，表現為骨小梁面積百分數(％Tb.Ar)、骨小梁厚度(T

6、b.Th)、骨小梁數目(Tb.N)均呈現較假手術對照組顯著降低(P＜0.01，P＜0.05，P＜0.01)，骨小梁分離度(Tb.Sp)顯著增加(P＜0.01);動態(tài)參數無統計學差異。
　　(3)脛骨中段皮質骨靜態(tài)和動態(tài)參數較假手術對照組均無統計學差異。
　　(4)全股骨骨密度、生物力學參數彈性載荷和彎曲能量均較假手術對照組明顯降低(P＜0.05，P＜0.05，P＜0.05);而腰椎骨密度和生物力學參數均無統計學差異。

7、　　(5)腦勻漿生化指標谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)顯著降低(P＜0.05);血清總膽固醇顯著增高(P＜0.05)，血鈣顯著降低（P＜0.05）;骨消化液羥脯氨酸含量(Hyp)無統計學差異。
　　(6)去卵巢使體重明顯增加(P＜0.05)，肝指數、脾指數、腎上腺指數、腦指數和腎指數均顯著降低(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)。
　　(7)去卵巢使子宮重量及子宮內膜厚度明顯降低(P＜

8、0.01，P＜0.01)。
　　2.己烯雌酚(D30)對去卵巢大鼠的影響
　　去卵巢后大鼠補充己烯雌酚，與去卵巢大鼠組比較，具有以下特點:
　　(1)己烯雌酚能有效預防去卵巢大鼠所致的骨質疏松。
　?、倜劰巧隙嗡少|骨的％Tb.Ar、Tb.N均較去卵巢組顯著增加（P＜0.01，P＜0.01），Tb.Sp則顯著降低(P＜0.01);而％L.Pm顯著降低(P＜0.05)，其余動態(tài)指標無統計學差異。破骨細胞數量和周長百分

9、數均顯著降低(P＜0.01，P＜0.01)。
　　②腰椎松質骨的％Tb.Ar、Tb.N均較去卵巢組顯著增加(P＜0.05，P＜0.05)，Tb.Sp則顯著降低(P＜0.05);而％L.Pm顯著降低(P＜0.05)，其余動態(tài)指標無統計學差異。
　　③脛骨中段皮質骨靜態(tài)參數改變無統計學差異;骨外膜骨形成率(P-MAR)顯著降低(P＜0.05)。
　　④股骨骨密度、股骨生物力學參數彈性載荷和彎曲能力均顯著增加(P＜0.05，

10、P＜0.05，P＜0.05)。腰椎骨密度和生物力學參數均無統計學差異。
　?、莨窍篐yp明顯增加(P＜0.05);腦勻漿生化指標GSH-PX也顯著增高(P＜0.01);血鈣、血磷均有顯著升高(P＜0.01，P＜0.05)，血清堿性磷酸酶(ALP)顯著降低(P＜0.05)。
　　(2)己烯雌酚可使去卵巢大鼠體重顯著降低(P＜0.05);腦、肝臟、脾臟、腎上腺和腎臟指數均顯著升高（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01，P

11、＜0.01，P＜0.01）。
　　(3)己烯雌酚可使子宮重量及子宮內膜厚度顯著增加(P＜0.01，P＜0.01)。
　　(4)己烯雌酚可有效降低去卵巢大鼠血脂膽固醇，升高甘油三酯水平。己烯雌酚使去卵巢后大鼠血清總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)均顯著降低(P＜0.01、P＜0.05)，而TG顯著增高(P＜0.05)。
　　3.復方腦復康(P-S)對去卵巢大鼠的影響:
　　去卵巢后大鼠補充復方腦復康

12、，與去卵巢大鼠組及己烯雌酚組相比較，具有以下特點:
　　(1)復方腦復康能有效預防去卵巢大鼠所致的骨質疏松。
　?、倥c去卵巢組比較，復方腦復康組脛骨上段松質骨的％Tb.Ar、Tb.Th和Tb.N均顯著增加(P＜0.05，P＜0.01，P＜0.05);動態(tài)指標無統計學差異;破骨細胞數量和周長百分數均顯著降低（P＜0.01，P＜0.01）。與己烯雌酚組相比，復方腦復康組Tb.Th顯著增加(P＜0.05)，動態(tài)指標和骨吸收指標無統

13、計學差異。
　　②與去卵巢組比較，復方腦復康組腰椎松質骨動靜態(tài)指標均無統計學差異;與己烯雌酚組相比，復方腦復康組Tb.N顯著降低(P＜0.05)，Tb.Sp顯著增加(P＜0.05)。
　?、叟c去卵巢組比較，復方腦復康組脛骨中段骨內膜熒光標記周長百分數(％E-L.Pm)顯著降低(P＜0.01)，其余動靜態(tài)指標均無統計學差異。
　　④與去卵巢組比較，復方腦復康組腰椎骨密度、股骨骨密度、股骨斷裂載荷和彈性載荷均顯著增加(P＜

14、0.05，P＜0.05，P＜0.05，P＜0.05);與己烯雌酚組相比，復方腦復康組斷裂載荷、彈性載荷和彎曲能量均顯著增加(P＜0.05，P＜0.05，P＜0.05)。
　　(2)與去卵巢組比較，復方腦復康組腦勻漿生化指標GSH-PX顯著增高(P＜0.01)，血鈣和血磷顯著增加(P＜0.05，P＜0.05)，TG和HDL-C顯著降低(P＜0.01、P＜0.05);與己烯雌酚組相比，復方腦復康組超氧化物歧化酶(SOD)顯著增加(P＜

15、0.05)，血清TC、LDL-C和HDL-C顯著增加(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.05)，血鈣顯著降低(P＜0.05)。
　　(3)與去卵巢組比較，復方腦復康組對體重影響不顯著，肝臟指數顯著增加(P＜0.05);與己烯雌酚組相比，復方腦復康組腦、肝臟、脾臟和腎上腺指數顯著減少(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)。
　　(4)與去卵巢組比較，復方腦復康使子宮重量及子宮內膜厚度顯著增加(P＜0.01

16、，P＜0.01)。與己烯雌酚組相比，復方腦復康組子宮指數和子宮內膜厚度顯著降低（P＜0.01，P＜0.05）。
　　4.復方阿司匹林(A-D10)對去卵巢大鼠的影響:
　　去卵巢后大鼠補充復方阿司匹林，與去卵巢大鼠組及己烯雌酚組相比較，具有以下特點:
　　(1)復方阿司匹林能有效預防去卵巢大鼠所致的骨質疏松。
　　①與去卵巢組比較，復方阿司匹林組脛骨上段松質骨的％Tb.Ar和Tb.N均顯著增加(P＜0.01，P＜

17、0.01)，Tb.Sp顯著減少(P＜0.01);動態(tài)指標無統計學差異;破骨細胞數量和周長百分數均顯著降低(P＜0.01，P＜0.01)。與己烯雌酚組相比，復方阿司匹林組靜態(tài)指標和骨吸收指標無統計學差異。
　?、谂c去卵巢組比較，復方阿司匹林組腰椎松質骨靜態(tài)指標均無統計學差異;動態(tài)指標％L.Pm、BFR/BS和BFR/TV顯著增加(P＜0.05，P＜0.05，P＜0.05);與己烯雌酚組相比，復方阿司匹林組％L.Pm、BFR/BS、B

18、FR/BV和BFR/TV顯著增加(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05)。
　?、叟c去卵巢組比較，復方阿司匹林組脛骨中段骨內膜熒光標記周長百分數(％E-L.Pm)顯著降低(P＜0.05)，其余動靜態(tài)指標均無統計學差異。
　　④復方阿司匹林可使去卵巢大鼠股骨骨密度顯著增加(P＜0.05);復方阿司匹林組與去卵巢組比較或者與己烯雌酚組相比，生物力學指標均無統計學差異。
　　(2)與去卵巢組比較，復方阿司匹

19、林組腦勻漿生化指標GSH-PX顯著增高(P＜0.01)，單胺氧化酶(MAO)顯著降低(P＜0.01);血清TC、TG和LDL-C顯著降低(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01);與己烯雌酚組相比，復方阿司匹林組TG、LDL-C、Ca和P顯著降低(P＜0.01，P＜0.05，P＜0.05，P＜0.05)，ALP顯著升高(P＜0.05)。
　　(3)與去卵巢組比較，復方阿司匹林組體重顯著降低(P＜0.05)，腦、肝臟、脾臟、腎上腺

20、和腎臟指數顯著增加(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01，P＜0.05，P＜0.01);與己烯雌酚組相比，復方阿司匹林組肝臟和腎上腺指數顯著減少(P＜0.05，P＜0.05)。
　　(4)與去卵巢組比較，復方阿司匹林組使子宮重量及子宮內膜厚度顯著增加(P＜0.05，P＜0.01)。與己烯雌酚組相比，復方阿司匹林組子宮指數和子宮內膜厚度無統計學差異。
　　5.四藥復方(P-S+A-D10)對去卵巢大鼠的影響:
　　去

21、卵巢后大鼠補充四藥復方，與去卵巢大鼠組及己烯雌酚組相比較，具有以下特點:
　　(1)四藥復方能部分預防去卵巢大鼠所致的骨質疏松。
　?、倥c去卵巢組比較，四藥復方組脛骨上段松質骨的Tb.Th和Tb.N均顯著增加(P＜0.05，P＜0.01)，％L.Pm顯著增加(P＜0.05)，破骨細胞數量和周長百分數均顯著降低(P＜0.01，P＜0.01);與己烯雌酚組相比，四藥復方組Tb.Th顯著增加(P＜0.01)，而Tb.Sp顯著減少（

22、P＜0.05）;％L.Pm和BFR/TV顯著增加(P＜0.05，P＜0.05)。
　?、谂c去卵巢組比較，四藥復方組腰椎松質骨動靜態(tài)指標均無統計學差異;與己烯雌酚組相比，四藥復方組Tb.N顯著減小(P＜0.05)，而Tb.Sp顯著增加(P＜0.05); MAR和BFR/BS組顯著增加(P＜0.05，P＜0.05)。
　?、叟c去卵巢組比較，四藥復方組脛骨中段骨動靜態(tài)指標均無統計學差異;與己烯雌酚組相比，四藥復方組骨外膜礦化沉積率

23、(P-MAR)顯著增加(P＜0.05)。
　?、芩乃帍头娇墒谷ヂ殉泊笫蠊晒枪敲芏蕊@著增加(P＜0.05);與去卵巢組相比，四藥復方組彈性載荷和彎曲能量顯著增高(P＜0.05，P＜0.05);與己烯雌酚組相比，四藥復方組彈性載荷和彎曲能量顯著增高(P＜0.05，P＜0.05)。
　　(2)與去卵巢組比較，四藥復方組腦勻漿生化指標GSH-PX顯著增高(P＜0.01)血清TC、TG和LDL-C顯著降低(P＜0.01，P＜0.01，

24、P＜0.01)。與己烯雌酚組相比，四藥復方組TG和Ca顯著降低(P＜0.01，P＜0.05)，ALP顯著升高(P＜0.05)。
　　(3)與去卵巢組比較，四藥復方對大鼠體重影響不顯著，肺臟指數顯著降低(P＜0.05);與己烯雌酚組相比，四藥復方組腦、肝臟、脾臟、腎上腺、腎臟和肺臟指數顯著降低（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01）。
　　(4)與去卵巢組比較，四藥復方組使子宮重量

25、及子宮內膜厚度顯著增加(P＜0.05，P＜0.01)。與己烯雌酚組相比，四藥復方組子宮指數顯著降低(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.去卵巢可導致典型的高轉換型骨質疏松，伴隨骨生物力學性能降低，并造成體重升高，子宮萎縮，血脂紊亂，腦過氧化物酶降低。
　　2.己烯雌酚可預防去卵巢導致的骨質疏松，降低骨轉換水平，增強骨生物力學性能，使大鼠體重降低，子宮增厚，血膽固醇降低，但甘油三酯升高，腦過氧化物酶升高。
　　3

26、.復方腦復康可有效預防去卵巢導致的骨質疏松，抑制骨吸收而不抑制骨形成，增強骨生物力學性能，對大鼠體重影響不大，子宮刺激作用輕，血甘油三酯降低，腦過氧化物酶水平升高。
　　4.復方阿司匹林可有效預防去卵巢導致的骨質疏松，抑制骨吸收而不抑制骨形成，骨生物力學性能無統計學差異，大鼠體重減輕，子宮增厚，血膽固醇和甘油三酯降低，腦過氧化物酶水平升高，單氨氧化酶水平降低。
　　5.四藥復方可部分預防去卵巢導致的骨質疏松，抑制骨吸收而不抑