1、目的：結合新疆葡萄和番茄的開發(fā)現狀，以番茄紅素和葡萄籽提取物為主要功效成分，研制純天然保健食品—復方降脂軟膠囊，并進行毒理學、功效學評價，制定產品質量標準，研究降脂作用機制。
　　方法：通過單因素設計篩選影響葡萄籽中原花青素超臨界CO2萃取的主要因素，通過正交實驗設計研究萃取最佳工藝；以原花青素和番茄紅素為主要功效成分，按照設計處方進行膠囊制備工藝研究、質量標準研究及毒理學研究；通過建立小鼠高脂血癥模型對膠囊處方功效進行初步驗證，

2、建立混合型大鼠高脂血癥模型進行膠囊降脂作用及機制研究。
　　結果：1．復方降脂軟膠囊的研制：（1）葡萄籽原花青素超臨界CO2萃取工藝研究：1）單因素實驗結果表明：萃取壓力15MPa、溫度50℃、時間30min、攜帶劑加入量400mL條件下，原花青素收率最高；2）正交實驗研究結果表明：葡萄籽中原花青素超臨界 CO2萃取的最優(yōu)工藝為：萃取壓力18MPa、溫度50℃、時間40min、攜帶劑加入量500mL。3）建立了高分離快速液相色譜測

3、定超臨界葡萄籽萃取液中原花青素含量的方法，在設定色譜條件下回歸方程為：y=639.0818x-28.961，R2=0.9997，在0.60～3.60mg/mL范圍內線性關系良好。（2）復方降脂軟膠囊處方篩選及制備工藝研究：1）膠囊處方：葵花籽油63.5％，葡萄籽提取物8.0%，番茄紅素油樹脂28.5%，按處方配制膠囊內容物藥液，其流動性、切斷性、內容物懸浮穩(wěn)定性均符合制劑要求；在膠囊殼常規(guī)配方基礎上，確定TiO2、莧菜紅、葡萄紫分別占囊

4、殼總質量的0.50%、0.20%、0.06％時，囊殼遮蔽及感觀效果最好，經小試和中試證明制備工藝科學可行；2）制定了復方降脂軟膠囊的質量標準，建立了膠囊中原花青素和番茄紅素的含量測定方法，經考察，上述測定方法專屬性強，精密度、重復性好，準確度佳；通過加速實驗考察軟膠囊制劑的穩(wěn)定性，裝量差異、崩解時限檢查均符合《中華人民共和國藥典》（2010版）相關要求；膠囊內容物中功效成分的含量、過氧化值等均符合相關規(guī)范的要求，產品的保質期不少于2年。

5、2．復方降脂軟膠囊毒理學與功效學評價：（1）膠囊急性毒性研究：經測試，膠囊對實驗各性別小鼠體重無明顯影響（P＞0.05），動物各系統(tǒng)未出現明顯中毒癥狀和體征，膠囊的經口急性毒性 MTD大于10g/kg?BW，屬實際無毒物。（2）膠囊內容物處方、葡萄籽提取物和番茄紅素對正常小鼠和高脂血癥小鼠的影響：1）膠囊內容物處方、葡萄籽提取物和番茄紅素無論單獨給藥還是聯(lián)合給藥，在實驗劑量下均對正常小鼠的體重和血清TC、TG、HDL、LDL沒有明顯影響

6、（P＞0.05），各組動物生長狀態(tài)良好；2）膠囊處方中、高劑量組可降低高脂血癥小鼠血清TC和LDL水平，升高HDL水平（P＜0.05）；但葡萄籽提取物和番茄紅素單獨給藥對高脂血癥小鼠血脂沒有明顯影響（P＞0.05）。（3）復方降脂軟膠囊功效學研究：1）從第0周開始，各組動物與空白組比較體重均明顯增加（P＜0.01）；第1周時，膠囊高劑量組與模型組比較，體重增長放緩（P＜0.05）；第6周時，各干預組體重均低于模型組（P＜0.05）；2）

7、在給藥第4周和第6周，與模型組比較，膠囊各劑量組和陽性對照組均可顯著降低高脂血癥模型大鼠血清TG和TC含量（P＜0.05）；3）膠囊在給藥第4周和第6周，與模型組比較，膠囊高劑量組血清HDL水平升高（P＜0.05），膠囊各劑量組和陽性對照組大鼠血清LDL水平降低（P＜0.01）；4）與模型組比較，膠囊中、高劑量組和陽性對照組可降低高脂血癥模型大鼠血清ApoB、LPa含量及ApoB/ApoAI比值（P＜0.01），適當提高血清ApoAI水

8、平，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；5）與模型組相比，膠囊各劑量組和陽性對照組可使肝組織SOD活性、GSH-Px活力上升，MDA含量降低(P＜0.01)。6）各組之間動物臟器指數差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；7）病理組織學結果顯示，膠囊可以明顯改善由于高脂飲食造成的肝細胞病理損傷，隨著劑量的增加病理損傷改善程度越明顯。3．復方降脂軟膠囊作用機制研究：（1）膠囊對脂代謝關鍵酶的影響：1）膠囊中、高劑量組和陽性對照組可升高高脂血癥大

9、鼠肝組織中HL含量，降低HMG-CoA含量，與模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；2）與模型組比較，膠囊高劑量組大鼠LCAT和LPL的含量升高（P＜0.01）。（2）膠囊降脂作用分子機制研究：1）與模型組比較，膠囊高劑量組動物肝臟 LDL-RmRNA的相對表達量上升（P＜0.05）；2）膠囊中、高劑量組動物肝臟PPARγmRNA的相對表達量高于模型組（P＜0.01）；3）膠囊可以上調高脂血癥模型大鼠肝臟 LXRamRNA的相對

10、表達量，但各組動物間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；4）膠囊各劑量組動物肝臟SR-BImRNA的相對表達量上升，其中高劑量組與模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；5）與模型組比較，膠囊各劑量組肝臟 ABCA1mRNA相對表達量上升，其中高劑量組與模型組差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　結論：1．葡萄籽中原花青素超臨界 CO2萃取的最優(yōu)工藝為：萃取壓力18MPa、溫度50℃、時間40min、攜帶劑加入量500mL，

11、放大實驗證實其工藝方法可靠，可用于工業(yè)生產；用高分離快速液相色譜檢測萃取液中原花青素含量，方法準確、可靠，重復性好，精密度佳，可以作為葡萄籽超臨界CO2萃取液中原花青素含量測定的方法；膠囊處方設計合理，制備工藝科學可行，質量可控，相關指標符合國家藥典（2010版）等規(guī)范要求，保質期不少于2年；膠囊中功效成分檢測方法準確可靠，原花青素平均含量87.90mg/g，RSD為1.32%，番茄紅素含量為15.24mg/g，RSD為1.27%；2．

12、膠囊經口急性毒性 MTD大于10g/kg·BW，屬實際無毒物；按膠囊設計處方配制的內容物，可以有效降低高脂血癥小鼠血清TC、LDL水平，升高血清HDL水平，降脂效果明顯優(yōu)于番茄紅素和原花青素單獨應用，提示二者在降脂功效方面具有協(xié)同作用；膠囊中試產品能顯著降低高脂血癥模型大鼠血清 TG、TC、LDL、ApoB和LPa水平，降低 ApoB/ApoA1比值，適當升高HDL和ApoA1水平；能提高機體抗氧化酶活性，降低MDA含量；能減輕高脂飲食