1、缺血預處理是指預先給予一次或多次短暫的缺血，以增強組織對隨后長時間缺血再灌注損傷的耐受性或適應性。缺血再灌注損傷常見于休克時微循環(huán)的疏通、冠狀動脈痙攣的緩解、心腦血管栓塞再通、心肺手術后和心臟驟停后心肺腦復蘇、斷肢再植、器官移植血供恢復等，是引起隨后器官功能障礙的主要原因之一。大量的研究表明缺血預處理能顯著減輕隨后的缺血再灌注損傷。肺缺血再灌注損傷多見于體外循環(huán)心內直視術、肺動脈袖狀切除術、肺移植術及需要阻斷一側肺動脈才能進行的肺葉切除

2、術中，對肺功能恢復不利，并可能引起術后并發(fā)癥和影響預后。肺缺血預處理是防治肺缺血再灌注損傷最有效的措施，但其確切的保護機制尚未闡明。研究顯示，給予缺血預處理的肺組織與未予缺血預處理的肺組織相比，在經過隨后長時間的缺血再灌注后，表現(xiàn)出更好的缺血耐受性和再灌注耐受性，其中性白細胞浸潤，肺水腫，局部出血和肺泡破裂均明顯減少，其細胞結構，內環(huán)境平衡，微循環(huán)灌注，能量代謝，組織功能和遺傳重組等方面具有更好的延續(xù)性和恢復能力。廣大科學工作者從動物實

3、驗和臨床實驗對肺缺血預處理的肺保護機制進行了卓有成效的研究，發(fā)現(xiàn)腺苷、緩激肽、花生四烯酸代謝產物、阿片類、兒茶酚胺類、自由基、鈣離子、一氧化氮和活性氧等與保護效應的啟動相關；G蛋白、磷脂酶C、蛋白激酶A、酪氨酸蛋白激酶及絲裂原活化的蛋白激酶等與保護效應的介導相關，而保護效應的發(fā)揮則與ATP敏感鉀通道、5’核苷酶與腺苷、轉錄因子、誘生型一氧化氮合成酶、環(huán)氧化酶2、醛糖還原酶、抗自由基酶類和熱休克蛋白等相關。雖然已有的研究揭示了一些肺缺血預

4、處理的保護機制，但目前仍然不能完全解釋肺缺血預處理引起的保護效應并有效逆轉缺血再灌注損傷。 肺缺血預處理的臨床研究開展較晚，但是缺血預處理作為大手術的輔助措施能夠安全而巧妙地實施。蛋白質組學技術為研究缺血預處理的保護機制提供了新的工具。為此，本研究以臨床中的手術患者為對象，采用蛋白質組學技術和方法研究缺血預處理抗人肺缺血再灌注損傷的分子機制。 首先選擇合適的手術患者分別歸入假手術組(Sham group，S組)、缺血再灌

5、注組(Ischemia-reperfusion group，I/R組)和缺血預處理組(Ischemic preconditioning group，IP組)。I/R組經歷單純的缺血再灌注，IP組在缺血再灌注前予以缺血預處理，S組始終保持供血與通氣，在術后收取標本。然后采用一步抽提法制備S組，I/R組和IP組肺組織的總蛋白質，應用雙向凝膠電泳技術建立了重復性和分辨率均較好的S組，I/R組和IP組肺組織總蛋白質的雙向凝膠電泳圖譜。PDQue

6、st軟件對三組肺組織蛋白質的雙向電泳圖譜進行了分析比較，得出20個4倍以上差異表達的蛋白質點，采用MALDI-TOF-MS對差異表達的蛋白質進行質譜分析，獲取MALDI-TOF-MS肽質量指紋圖譜，數據庫搜索鑒定了17個差異表達的蛋白質。最后，為了驗證比較蛋白質組學研究結果，采用Western blot技術對部分差異表達蛋白質在IP組和I/R組肺組織中的表達水平進行了檢測，其結果與比較蛋白質組學研究的結果一致。 本研究在建立S組

7、、FR組和IP組肺組織總蛋白質雙向電泳圖譜的基礎上，采用質譜分析結合數據庫搜索共鑒定出17個明顯差異表達的蛋白質，這些蛋白質按功能主要可以分為八類，即代謝相關酶類，抗氧化劑，貯鐵蛋白，鈣結合蛋白質，分子伴侶，細胞骨架蛋白質，細胞增殖相關蛋白，以及信號傳導相關蛋白質。其中一些蛋白質與自發(fā)性抗缺血再灌注損傷有關，一些蛋白質如HSP27及Cu/ZnSOD則與缺血預處理抗缺血再灌注損傷的主動效應有關，還有一些蛋白質與缺血預處理抗缺血再灌注損傷的