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文檔簡介
1、目的:通過對加味桂枝茯苓顆粒對大鼠前列腺增生組織中bcl-2、bax基因調控的研究,探討加味桂枝茯苓顆粒對良性前列腺增生癥的作用機制,為中醫(yī)中藥治療良性前列腺增生癥提供理論及相關實驗數據支持。
方法:取清潔級雄性SD大鼠90只,隨機分為對照組25只,模型組65只。使用氯胺酮注射液(100mg/kg)經腹腔注射麻醉,無菌條件下,采用陰囊切口,將睪丸及其附屬組織充分游離并切除雙側睪丸,縫合陰囊皮膚,置于清潔鼠籠內,1周后大鼠自然恢
2、復。然后給予正常組大鼠生理鹽水0.1ml/只,皮下注射,每日1次;模型組大鼠給予溶于橄欖油的丙酸睪丸酮5mg/kg,頸背部皮下注射;21天后分別隨機取正常組和模型組大鼠各5只;斷頸處死后取其前列腺組織,計算前列腺指數。將前列腺組織固定包埋,作HE染色。結合前列腺指數與病理結果證明造模成功。將剩余模型組60只大鼠進行隨機再分組,隨機分為3組:空白增生組(B組):20只;加味桂枝茯苓顆粒組(C組):20只;非那雄胺組(D組):20只,設定空
3、白對照組為A組。給予空白對照組與空白增生組大鼠生理鹽水2ml灌胃每天一次,加味桂枝茯苓顆粒組大鼠給予加味桂枝茯苓顆粒水液10g/kg/d,2ml/d;非那雄胺組大鼠給予非那雄胺1mg/kg/d灌胃,2ml/d,以上4組均連續(xù)灌胃30d。然后各組大鼠稱重后以斷頸法處死。取前列腺組織,用微量稱稱重、測量前列腺體積、計算前列腺指數、HE染色后在光鏡下觀察大鼠前列腺的組織的形態(tài)改變、采用電鏡觀察大鼠前列腺組織的細胞形態(tài)變化、采用免疫組織化學法檢
4、測大鼠前列腺組織中bcl-2、bax基因表達量。
結果:
(1)大鼠去勢后采取丙酸睪丸酮腹腔注射法成功復制前列腺增生模型。與正常組相比,其他各模型組大鼠前列腺腺體濕重、體積及前列腺指數均明顯增加(P<0.01),差異有統(tǒng)計學意義。
(2)光鏡下空白增生組大鼠前列腺腺體排列緊密,明顯呈結節(jié)狀增生,腺泡上皮細胞增厚為高柱狀,上皮呈復層或假復層排列,大部分腺上皮形成乳頭狀突起突向腺腔內,腺腔小,腺腔內分泌物增多,
5、腺體間可見小血管擴張。加味桂枝茯苓顆粒組和非那雄胺組:部分腺腔變大,乳頭狀突起較增生對照組減少,上皮細胞單層柱狀與高柱狀兼有,多為單層柱狀,腺腔內基本無分泌物,間質偶見小血管擴張。
(3)電鏡下空白增生組大鼠前列腺上皮細胞呈高柱狀,腺體上皮層數增多,核大小不一致,胞質豐富,粗面內質網呈囊狀高度擴張,囊內充滿高密度蛋白顆粒;線粒體輕度腫脹(部分含有空泡),細胞表面有規(guī)則整齊的指狀突起,腔內有中等密度分泌物,有些細胞內可見致密圓形
6、分泌顆粒。加味桂枝茯苓顆粒組:前列腺上皮細胞呈短柱狀或扁平立方狀,細胞核不規(guī)則,濃縮,核致密度增高,異染色質積聚,靠邊呈團塊甚至月牙狀,常染色質致密均質化,胞質有大量空泡;內質網濃縮,線粒體空化(萎縮死亡),胞質中分泌顆粒集中在細胞頂端,顆粒周圍有空化環(huán),有顆粒形成頓錯現象,表面指狀微絨毛極少,腔內分泌物少。
(4)空白增生組bcl-2基因表達量顯著高于空白對照組(P<0.01),bax基因表達量明顯低于空白對照組(P<0.0
7、1);加味桂枝茯苓顆粒組和非那雄胺組bcl-2基因表達量低于空白增生組(P<0.01),bax基因表達量明顯高于空白對照組(P<0.01);加味桂枝茯苓顆粒組bcl-2、bax基因表達與非那雄胺組相似,無明顯差異(P>0.05)。
結論:
(1)加味桂枝茯苓顆??山档颓傲邢僦笖?,縮小前列腺體積,可明顯抑制大鼠前列腺增生。
(2)加味桂枝茯苓顆粒通過改善腺體排列密度,減少乳頭狀結構數量,抑制大鼠前列腺腺上皮的
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