1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文題目蟾毒靈對裸鼠人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤生長與轉(zhuǎn)移的影響及其機制Theeffectandmechanismofbufalinongrowthstageandmetastaticpotentialofhepatocellularcarcinomainnudemice院系：中山醫(yī)院專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床(腫瘤研究)姓名：張洲姬指導(dǎo)小組成員名單：楊云柯副教授李立新副主任醫(yī)師王國驊主治醫(yī)師本課題由國家中醫(yī)藥管理局“十二五“腫瘤

2、重點?？平ㄔO(shè)項目和上海市衛(wèi)生局科研課題(20124056)聯(lián)合資助二零一四年四月復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文蟾毒靈對裸鼠人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤生長與轉(zhuǎn)移的影響及其機制中文摘要背景最新研究指出原發(fā)性肝癌因高發(fā)病率、高死亡率(惡性腫瘤發(fā)病率中男性居第五、女性居第七，死亡率中男性居第二、女性居第六)，已然倍受全球矚目。即便手術(shù)切除、介入栓塞、伽瑪射線、射頻消融、肝移植等治療技術(shù)日益完善，一旦評定為晚期肝癌，其中位生存時間僅68個月。因此，如何預(yù)防肝

3、癌的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，從而提高肝癌患者生存率，是目前研究的主要方向。本課題組在既往研究成果基礎(chǔ)上，首次提出：肝癌高復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移率的主要原因是“肝癌余毒未清”的假說，認(rèn)為一方面肝癌形成的主要危險因素包括肝炎病毒、黃曲霉素、有機氯化合物、藻類毒素等未得到有效控制，另一方面，適宜肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的腫瘤微環(huán)境持續(xù)存在。因此，如何持續(xù)清除“肝癌余毒”可能成為預(yù)防肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的主要路徑。蟾酥制劑具有“祛濕化瘀、清熱解毒”功效，提取物蟾毒靈(bufali

4、n)的近期研究成果均被證實其可抑制肝癌細(xì)胞株的增殖、侵襲、遷移，其中體外實驗機制針對AKT靶點，影響AKT／GSK313／13catenin／Ecadherin信號通路相應(yīng)因子，并且結(jié)合腫瘤微環(huán)境的角度，己證實其具備抑制多種惡性腫瘤細(xì)胞株侵襲及遷移的能力，逐步成為國內(nèi)、外研究焦點問題。原發(fā)性肝癌具有器官傾向性，所以建立單克隆人肝癌細(xì)胞株肺靶向轉(zhuǎn)移裸鼠模型，運用bufalin驗證之前體外實驗機制，進一步確定有效的體內(nèi)治療方法勢在必行。目的

5、本研究從體內(nèi)實驗觀察bufalin對裸鼠人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤的生長、肝癌組織壞死及細(xì)胞凋亡、肺轉(zhuǎn)移灶形成的影響，并以AKT作為靶點，進一步深入探討其對肝原位移植瘤AKT／GSK3B／Bcatenin／Ecadherin信號通路相關(guān)蛋白的變化趨勢及相關(guān)現(xiàn)象產(chǎn)生的機理。方法建立熒光高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞株HCCLM3R和相應(yīng)裸鼠模型的基礎(chǔ)上，隨機分組符合造模標(biāo)準(zhǔn)的人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤裸鼠，運用生理鹽水(NS)為陰性對照組、1mg／kgbuf