1、目的:
　　研究在H9c2心肌細胞在缺氧/復氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）條件下缺氧誘導因子(hypoxia inducible factor-1，HIF-1)與ROCK激酶(Rho-associatedkinase1，ROCK-1)的表達及相互關(guān)系，以及兩者對心肌細胞的作用機制。
　　方法:
　　(1)通過體外培養(yǎng)H9c2心肌細胞，建立缺氧復氧模型（95％N2和5％CO2）;
　　(2

2、)通過Western blot印跡法分別檢測缺氧和復氧時HIF-1與RCOK-1的蛋白表達情況;篩選出表達最高的缺氧和復氧時間點;
　　(3)在篩選好的缺氧10h和復氧6h、8h、10h時間點進行缺氧復氧處理。然后實驗分四組進行:①正常對照組;②H/R組;③H/R加YC-1組(HIF-1抑制劑);④H/R加Y-27632組（ROCK-1抑制劑）;
　　(4)采用RT-PCR和Western blot印跡檢測各組間HIF-1與

3、ROCK-1的mRNA和蛋白表達情況，流式細胞儀檢測細胞凋亡情況，MTT檢測細胞生長活力。
　　結(jié)果:
　　(1)心肌細胞缺氧處理時，HIF-1與ROCK-1蛋白表達量均明顯增加，缺氧10h時均有較明顯的表達;
　　(2)在0～24h的復氧時間里，HIF-1與ROCK-1的蛋白表達在6h、8h、10h這三個時間段表達較高;
　　(3)于復氧6h、8h、10h時加入HIF-1抑制劑YC-1后，結(jié)果顯示:HIF-1及

4、ROCK-1的蛋白表達顯著低于對應時間段的H/R組(P＜0.05);細胞凋亡率顯示與H/R組相應各組間對比顯著降低(P＜0.05);MTT顯示細胞存活率與H/R組相比明顯升高(P＜0.05);
　　(4)于復氧6h、8h、10h時加入ROCK-1抑制劑Y-27632后，結(jié)果顯示:①ROCK-1的mRNA和蛋白表達均低于H/R組和正常組(P＜0.05)，而HIF-1的蛋白及mRNA表達明顯高于H/R組(P＜0.05);細胞凋亡率顯示

5、與H/R組相應各組間對比顯著升高(P＜0.05);MTT顯示細胞存活率與H/R組相比，明顯降低下降(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　(1) H9c2心肌細胞在缺氧/復氧條件下，HIF-1與ROCK激酶分別在缺氧10h和12h表達達高峰;在復氧4h，6h，8h，10h有較高的表達;
　　(2)抑制HIF-1的表達，可使H9c2心肌細胞在缺氧10h和復氧6h-10h時抑制細胞凋亡;
　　(3)在H9c2心肌細胞缺氧