1、瘢痕過度增殖形成的增生性瘢痕長期不退化不僅明顯破壞人的體表完美，造成疼痛難忍、瘙癢不適等癥狀，甚者導致嚴重功能障礙，生活難以自理。通常增生性瘢痕早期增生活躍，癥狀嚴重，造成患者極大身心痛苦，后期由于增生性瘢痕發(fā)性退行性變，瘢痕趨于成熟穩(wěn)定，其不適癥狀明顯緩解。如何促使過度增生的瘢痕及早進入成熟穩(wěn)定階段是臨床亟待解決的難題。增生性瘢痕的退行性變是一個錯綜復雜的多因素、多階段、多基因共同作用的過程，闡明增生性瘢痕退行性變的分子生物學基礎和機

2、理，是整形外科領域的一個重要課題，而在基因水平上從增生性瘢痕退行性變這一角度對瘢痕機理和防治進行深入研究，尚未見報道。 [目的] 應用基因芯片技術從基因水平探索增生性瘢痕退行性變的機制，篩選出調(diào)控增生性瘢痕從過度增殖向成熟穩(wěn)定期轉化的退行性變相關基因群，并對退行性變相關基因進行實驗研究。 [方法] (1)收集8例同一患者不同生長時期(增殖活躍階段和成熟穩(wěn)定階段)的增生性瘢痕組織標本，按一步法抽提出增生期和

3、穩(wěn)定期的瘢痕組織總RNA，純化mRNA，分別制成Cy3和Cy5熒光標記cDNA探針，與含有14112個cDNA的高密度基因微矩陣芯片(BiostarH-140s)雜交，選取差異表達顯著的cDNA片段，到NCBI數(shù)據(jù)庫中檢索和比對，對獲得全長基因，進行計算機生物信息學分析，篩選出增生性瘢痕退行性變相關的已知和未知基因群。 (2)應用TUNEL、免疫組織化學、原位雜交、RT-PCR、細胞圖像分析等方法，對篩選出的增生性瘢痕退行性變相

4、關基因群中的豐度高、Ratio值大的感興趣基因進行原位表達比較及蛋白功能檢測，以探討其在增生性瘢痕退行性變過程中的變化規(guī)律和內(nèi)在聯(lián)系。 [結果] (1)資料分析表明，在14112個基因中，退變后穩(wěn)定期的增生性瘢痕組織與增殖活躍的增生性瘢痕組織之間存在差異表達基因。按照Scanarray4000掃描Ratio值大于2或小于0.5作為基因點，共篩選出增生性瘢痕退行性變差異表達基因840條，其中上調(diào)基因438條，下調(diào)基因362

5、條，新基因102條。包括細胞凋亡基因、原癌基因和抑癌基因、離子通道和運輸?shù)鞍?、細胞骨架和運動基因、DNA合成和修復重組蛋白、細胞受體、免疫相關、細胞信號和傳遞蛋白、代謝蛋白、翻譯合成、發(fā)育相關等多種基因參與增生性瘢痕退行性變。 (2)TUNEL(DNA末端轉移酶標記dUTP)檢測表明，發(fā)生退行性變的成熟期增生性瘢痕凋亡過度，而增殖活躍的增生期的增生性瘢痕不足，二者凋亡指數(shù)(apoptosisindex，Al)分別為26.51±1

6、1.07和8.25±2.74(P＜0.01)。免疫組化和原位雜交結果顯示，在成熟退變的增生性瘢痕組織中Caspase3呈強陽性，而在增生期的增生性瘢痕組織中Caspase3呈弱陽性或陰性；成熟期的增生性瘢痕中TGFβ3和TGFRⅡ的表達強度強于增生期，而TGFβ1、TGFβ2和TGFRⅠ的表達強度則相反。 [結論] 增生性瘢痕的退行性變是包括細胞凋亡基因、原癌基因和抑癌基因、離子通道和運輸?shù)鞍住⒓毎羌芎瓦\動基因、DNA