1、目的:卵巢惡性腫瘤是女性生殖器官常見的三大惡性腫瘤之一，由于卵巢位于盆腔深部，早期病變不易發(fā)現(xiàn)，晚期病例也缺乏有效的治療手段，因此卵巢惡性腫瘤致死率居婦科惡性腫瘤首位，已成為嚴重威脅婦女生命和健康的主要腫瘤。卵巢癌的組織類型繁多，其中上皮性卵巢癌占卵巢惡性腫瘤的85～90％，其發(fā)病隱匿，早期無癥狀，發(fā)現(xiàn)時往往已是晚期，這使得該腫瘤的早診早治顯得異常困難。
　　對于卵巢癌的治療，適當?shù)氖中g配合有效化療可大大提高病人的存活率，其中上皮

2、性卵巢癌對化療藥物較敏感。其傳統(tǒng)的化療方法是紫杉醇加鉑類，但是多數(shù)患者停藥一段時間后會復發(fā)，這可能和卵巢癌的發(fā)病機制尚不清楚和腫瘤耐藥有關。
　　緩激肽(BK)是機體炎癥時釋放的一種血管活性肽，通過和細胞膜上的B1受體和B2受體結合而起效。對卵巢癌、胃癌和肝癌等多種病人的胸腹腔滲液檢查均發(fā)現(xiàn)高濃度的BK水平，對其受體的研究發(fā)現(xiàn)，B1受體和B2受體單獨或同時在人類多種腫瘤細胞呈高表達。這些研究提示，B1R、B2R或二者均可參與腫瘤的

3、增殖。但BK受體亞型在卵巢癌組織的表達尚未有一致報道。
　　在本部分研究中，我們首先就上皮性卵巢癌患者和卵巢良性腫瘤患者經手術切除的腫塊組織中BK受體亞型及其下游的主要信號分子NO產生的酶eNOS和iNOS的表達進行了比較研究。在此基礎上，觀察了B2受體的特異性拮抗劑HOE-140單獨或聯(lián)合應用阿霉素(DOX)對人卵巢癌細胞SKOV3的影響及可能的作用機制。該研究有望找到更好的腫瘤靶位，從而改善卵巢癌患者的生存質量。
　　方

4、法:
　　1.卵巢癌組織中緩激肽B1受體、B2受體及eEOS、iNOS的表達選取臨床確診的卵巢癌患者及卵巢上皮性良性腫瘤患者各20例。年齡在35～55歲之間。無高血壓、糖尿病等內科疾病及遺傳病病史。
　　采用患者手術切除后經病理確診為卵巢上皮性良性腫瘤及上皮性卵巢癌患者的卵巢標本，免疫組化法檢測卵巢癌組織中B1、B2及eNOS及iNOS的表達。
　　2.血清中NO活性測定在治療前抽取初步診斷為卵巢癌的患者靜脈血液5 m

5、l20例，（其中15例術后病理證實為上皮性卵巢癌），另抽取正常人靜脈血液5 ml20例，離心，分離上清液，采用NO試劑盒測定血液中NO含量。
　　3.DOX和HOE-140單獨或聯(lián)合應用對SKOV3細胞增值的影響采用MTT法檢測不同濃度的阿霉素（3，10，30，100和300μmol/L）或HOE-140(0.01，0.1，1，10和100μmol/L)和SKOV3作用24小時后細胞的存活情況。在此基礎上，比較二者聯(lián)合用藥（DOX

6、10μmol/L+HOE14010μmol/L）和分別單獨應用相同劑量的DOX或HOE-140對SKOV3的細胞毒作用。
　　4.DOX和HOE-140單獨或聯(lián)合應用對SKOV3細胞凋亡的影響將SKOV3細胞分別與DOX10μmol/L、HOE-14010μmol/L或聯(lián)合應用DOX10μmol/L+HOE-14010μmol/L作用24 h，采用原位末端標記技術觀察（TUNEL試劑盒）細胞凋亡情況。
　　結果:
　　

7、1.卵巢組織標本B1、B2受體、eEOS和iNOS的表達對臨床上確診為卵巢癌患者和卵巢良性腫瘤患者手術后切取的卵巢組織進行免疫組化結果顯示，B1受體在良性卵巢組織中幾乎不表達，B2受體在良性卵巢組織中有表達，eNOS在良性卵巢組織中有少量表達，iNOS無明顯表達，和卵巢良性腫瘤患者的卵巢組織相比，卵巢癌組織細胞中B1受體、B2受體、eNOS及iNOS均呈高表達。
　　2.血清中NO含量測定對所采集血清中NO含量測定結果表明，卵巢癌

8、患者血清中NO含量顯著高于正常人血清中的含量（P＜0.01）。
　　3.對SKOV3細胞增殖的影響MTT法檢測結果顯示，將不同濃度的DOX（3，10，30，100和300μmol/L）或HOE-140(0.01，0.1，1，10和100μmol/L)與SKOV3共同孵育24小時后，二者均對SKOV3細胞的增殖有一定的抑制作用。其中HOE-14010μmol/L的抑制率是12.7％，而DOX10μmol/L的抑制率為26.8％。二者

9、聯(lián)合應用的抑制率為37.5％，其聯(lián)合應用的對SOV3細胞的抑制作用明顯強于二者單獨應用（P均＜0.01）。
　　4.對SKOV3細胞凋亡的影響Tunnel染色顯示，單獨應用10μmol/L HOE-140或DOX處理SKOV3細胞24小時均可誘導SKOV3細胞的凋亡，兩者聯(lián)合應用誘導SKOV3細胞的凋亡作用明顯強于單獨應用。
　　結論:
　　1.上皮性卵巢癌患者血清中NO含量較正常人為高，其卵巢組織中B1、B2、eNO