1、生物體的生長分化、遺傳物質的傳遞及基因突變等生物效應,都與細胞所處的力學環(huán)境息息相關。機械應力作用于生物體,經機械一生物信號轉換在生物體內發(fā)揮著重要作用,它可參與組織器官結構、功能的調節(jié),還能影響正常細胞的增殖、分化、凋亡及代謝。在腫瘤學方面,機械應力同樣影響著癌細胞的異常增殖、凋亡及轉移,但關于機械應力對癌細胞生物效應的誘導作用及機理研究尚有待進一步研究。本實驗通過FX-4000柔性基底加載裝置,對人口腔鱗狀KB細胞進行體外加載培養(yǎng),

2、卸載后用流式細胞儀檢測分析KB細胞的凋亡情況、運用實時熒光定量PCR檢測分析KB細胞凋亡相關基因表達的情況、結合低劑量抗癌藥物順鉑對KB細胞凋亡的影響,探討機械應力促進人口腔鱗狀KB細胞凋亡的機理。
　　 主要工作如下:
　　 1、周期性拉伸對KB細胞凋亡的影響本實驗運用FX-4000柔性基底加載系統(tǒng),以不同的加載程式(方波、24小時、頻率0.5Hz,拉伸幅度為10％及15%兩組),對人口腔鱗癌KB細胞進行體外加載培養(yǎng),

3、同時設定靜態(tài)對照組。卸載后用流式細胞儀檢測分析KB細胞的凋亡情況、實時熒光定量PCR檢測分析KB細胞凋亡相關基因Bc1-2、Bax和Caspase-3的表達情況,實驗結果:①流式細胞儀檢測凋亡率:10%、15%周期性拉伸實驗組的KB細胞平均凋亡率與靜態(tài)對照組比較均上升(P＜0.05);15%周期性拉伸實驗組平均凋亡率顯著高于10%周期性拉伸實驗組(P＜0.05)。②實時熒光定量PCR檢測:10%、15%周期性拉伸實驗組較靜態(tài)對照實驗組的

4、Bc1-2mRNA相對表達量均有降低;15%周期性拉伸實驗組與10%周期性拉伸實驗組比較,15%周期性拉伸實驗組的Bc1-2 mRNA相對表達量下降顯著(P＜0.05);10%、15%周期性拉伸實驗組較靜態(tài)對照實驗組的BaxmRNA和Caspase-3 mRNA相對表達量成上升趨勢(P＜0.05);15%周期性拉伸實驗組Bax mRNA和Caspase-3 mRNA相對表達量與10%周期性拉伸比較,15%周期性拉伸實驗組的Bax mRN

5、A和Caspase-3 mRNA相對表達量增長顯著(P＜0.05)。
　　 2、順鉑對KB細胞凋亡的影響實驗選用低劑量順鉑對KB細胞進行藥物干預,實驗結果:①12小時、1μg/ml順鉑實驗組KB細胞平均凋亡率較對照組沒有明顯改變(P＞0.05);24小時、1μg/ml順鉑實驗組KB細胞平均凋亡率增加(P＜0.05);②12小時、4μg/ml順鉑實驗組KB細胞平均凋亡率較對照組有明顯提高(P＜0.05);24小時、4μg/ml順鉑

6、實驗組KB細胞平均凋亡率顯著增長(P＜0.05);
　　 實驗結果表明:
　　 1、周期性拉伸促進了人口腔鱗癌KB細胞的凋亡,且15%周期性拉伸實驗組的凋亡率大于10%周期性拉伸實驗組細胞的凋亡率;
　　 2、周期性拉伸不同程式均誘導凋亡因子Bc1-2、Bax和Caspase-3的表達顯著改變,15%周期性拉伸實驗組對凋亡因子bc1-2、Bax和Caspase-3表達的影響作用顯著高于10%周期性拉伸實驗組(P＜