注射dsRNA干擾甜菜夜蛾幾丁質合成酶基因的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、幾丁質是昆蟲生長和發(fā)育的關鍵物質，任何干擾昆蟲幾丁質合成的物質都會對昆蟲的生長和發(fā)育產生劇烈的影響，甚至使昆蟲死亡。幾丁質合成途徑是理想的殺蟲劑作用靶標。近幾年發(fā)展的RNA干擾技術為抑制幾丁質合成酶基因的表達提供了一種新方法。　　在本實驗中，作者嘗試從甜菜夜蛾幾丁質合成酶基因催化域片斷中選擇3段擬干擾序列，長度分別為406bp，453bp和260bp，并采用體外轉錄的方法合成了對應的dsRNA。將所得的dsRNA注射進3齡末期幼蟲體內

2、，研究其對目的基因表達的抑制效果。RT-PCR檢測結果表明，406bp和453bp這2段dsRNA能夠有效地抑制目的基因的表達，并且在注射4天后抑制效果最佳，而260bp沒有明顯的抑制效果。但尚未觀察到表型上的不同，可能是時間不夠長或樣本量不夠大，也可能是dsRNA的干擾效果在表型上還看不出來?！　嶒灲Y果表明干涉效果受注射dsRNA的量及其應用dsRNA的發(fā)育階段的影響。從注射劑量上看，每頭幼蟲要注射dsRNA2.0μg左右才能達到

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