1、多基因譜系分析是研究微生物群體遺傳的一種有效方法,它具有穩(wěn)定、直觀、可靠、可重復(fù)性強等特點,已廣泛應(yīng)用于真菌群體遺傳多樣性、種群自然繁殖方式的研究中。本研究利用多基因譜系分析方法對松乳菇(Lactarius delicious)自然種群的群體遺傳特性進行分析,分析了同一地區(qū)或不同地區(qū)菌株之間和種群之間的遺傳變異方式和規(guī)律,闡明了松乳菇的主要自然種群繁殖方式。主要結(jié)果如下:
　　 (1)利用ITS序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹進行系統(tǒng)分析,并

2、結(jié)合子實體及孢子的形態(tài)特征對湖南省各地松林中分布最多的4種松菌(CSUFTHH1、CSUFTHH2、CSUFTZJ和CSUFTHY)進行鑒定。確定樣品CSUFTHH1、CSUFTHH2、CSUFTZJ和CSUFTHY分別為Lactarius sp.、松乳菇(Lactarius deliciosus)、橙紅乳菇(Lactarius akahatsu)以及紅汁乳菇(Lactarius hatsudake)。其中采集自湖南松林中的松乳菇(L.

3、deliciosus)的形態(tài)學(xué)及分子鑒定結(jié)果屬首次報道。
　　 (2)擴增得到了中國南方3個省9個不同地區(qū)的68個松乳菇的rDNA ITS序列。遺傳分析發(fā)現(xiàn),得到的68個松乳菇樣品的ITS序列可認定為7種單倍體型,這些單倍體型聚集為2個不同的系統(tǒng)進化群體,表現(xiàn)出兩種不同的系統(tǒng)進化方向。AMOVA測試中,觀察到的總的單倍體型變異頻率主要體現(xiàn)在不同地理種群的個體內(nèi)(84％)。剩下的16％屬于不同地理種群間的變異,PhiPT的顯著性分

4、析結(jié)果P<0.01。Mantel測試顯示地理距離與遺傳差異FST值的線性關(guān)系不顯著?？梢?松乳菇自然種群間有一定程度的基因漂流發(fā)生。群體遺傳分析還發(fā)現(xiàn)在松乳菇自然種群中存在顯著遺傳分化,且遺傳分化程度與地理距離沒有顯著的線性關(guān)系。
　　 (3)利用設(shè)計的多對引物成功的擴增得到松乳菇ITS、LSU以及mtSSU序列,并進行多基因譜系分析。分析結(jié)果中,多種跡象表明遺傳重組在松乳菇自然種群的遺傳方式中占有重要的地位。基因譜系比對分析中