1、臨床免疫學檢驗臨床免疫學檢驗1、免疫：是機體識別和排斥抗原性異物的一種生理功能2、免疫防御（對外）；免疫自穩(wěn)（防自身免疫病）；免疫監(jiān)視（防腫瘤）。3、中樞免疫器官：骨髓、胸腺；外周免疫器官：淋巴結、脾臟（最大）、黏膜相關淋巴組織4、B細胞：通過識別膜免疫球蛋白來結合抗原，介導體液免疫；B細胞受體=BCR=mIg表面標志：膜免疫球蛋白（SmIg）、Fc受體、補體受體、EB病毒受體和小鼠紅細胞受體。成熟B細胞：CD19、CD20、CD21、

2、CD22（成熟B細胞的mIg主要為mIgM和mIgD）同時檢測CD5分子，可分為B1細胞和B2細胞。B細胞功能檢測方法：溶血空斑形成試驗（體液免疫功能）。5、T細胞：介導細胞免疫。共同表面標志是CD3（多鏈糖蛋白）；輔助T細胞的標志是CD4；殺傷T細胞的標志是CD8；T細胞受體=TCR。T細胞和NK細胞的共同表面標志是CD2（綿羊紅細胞受體）；CD3＋CD4＋CD8－=輔助性T細胞（Th）CD3＋CD4－CD8＋=細胞毒性T細胞（Tc或

3、CTL）（T細胞介導的細胞毒試驗）CD4＋CD25＋=調節(jié)性T細胞（Tr或Treg）T細胞功能檢測：植物血凝素（PHA）刀豆素（CONA）刺激T細胞增殖。增殖試驗有：形態(tài)法、核素法。T細胞亞群的分離：親和板結合分離法，磁性微球分離法，熒光激活細胞分離儀分離法E花環(huán)試驗是通過檢測SRBC受體而對T細胞進行計數(shù)的一種試驗；6、NK細胞：具有細胞介導的細胞毒作用。直接殺傷靶細胞（腫瘤細胞和病毒感染的細胞）表面標志：CD16（ADCC）、CD5

4、6。測定人NK細胞活性的靶細胞多用K562細胞株，而測定小鼠NK細胞活性則常采用YAC1細胞株。7、吞噬細胞包括：單核吞噬細胞系統(tǒng)（MPS，表面標志CD14，包括骨髓內的前單核細胞、外周血中的單核細胞和組織內的巨噬細胞）和中性粒細胞。（表達MHCⅡ類分子）8、人成熟樹突狀細胞（DC）（專職抗原呈遞功能）：表面標志為CD1a、CD11c和CD83。9、免疫球蛋白可分為分泌型（sIg，主要存在于體液中，具有抗體功能）及膜型（mIg，作為抗原

5、受體表達于B細胞表面，稱為膜表面免疫球蛋白）10、免疫球蛋白按含量多少排序：IgG＞IgA＞IgM＞IgD＞IgE五類（按重鏈恒定區(qū)抗原性（CH）排序）免疫球蛋白含量測定：單向環(huán)狀免疫擴散法、免疫比濁法。11、免疫球蛋白的同種型抗原決定簇位于恒定區(qū)（CH、CL）12、抗體由漿細胞產(chǎn)生?？贵w分子上VH和VL（高變區(qū)）是抗原結合部位。30、抗血清常見保存條件：28℃保存；冷凍保存（最常用）；真空干燥保存（510年）。31、雜交瘤細胞放入液氮

6、（196℃）前，需要逐步降溫。復蘇細胞時，從液氮罐內取出凍存管，立即浸入37℃水浴。32、凝集反應分為兩個階段：①抗原抗體的特異性結合；②出現(xiàn)可見的顆粒凝聚。33、直接凝集反應：細菌、螺旋體和紅細胞等顆粒性抗原，在適當?shù)碾娊赓|（0.85%氯化鈉）參與下可直接與相應抗體結合出現(xiàn)凝集?？乖?凝集原，抗體=凝集素。34、玻片凝集試驗：主要用于抗原的定性分析，AB0血型的測定。試管凝集試驗：肥達氏試驗、外斐試驗、輸血交叉配血試驗；35、正向間接

7、血凝反應（PHA）：紅細胞包被抗原，用以檢測抗體。（凝集）反向間接血凝反應（RPHA）：紅細胞包被抗體，用以檢測抗原。（凝集）36、間接血凝抑制試驗：可用于檢測抗體、自身抗體、變態(tài)反應性抗體，也可測定抗原。（不凝集）37、金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）協(xié)同凝集反應(反向間接凝集)38、血凝試驗（載體為綿羊、家兔、雞的紅細胞及O型人紅細胞）可在微量滴定板或試管中進行，將標本倍比稀釋，一般為1:64，同時設不含標本的稀釋液為對照孔。凡紅細胞

8、沉積于孔底，集中呈一圓點的為不凝集。如紅細胞凝集，則分布于孔底周圍。39、膠乳凝集試驗（間接凝集），所用載體為聚苯乙烯膠乳；明膠凝集試驗（間接）將病毒抗原或重組抗原吸附于粉紅色明膠顆粒：HIV1抗體和抗精子抗體檢測40、抗球蛋白試驗，又稱Coombs試驗，是檢測抗紅細胞不完全抗體的一種很有用的方法。包括直接Coombs試驗（檢測紅細胞上的不完全抗體）和間接Coombs試驗（游離在血清中的不完全抗體）41、沉淀反應分兩個階段：第一階段為抗

9、原抗體發(fā)生特異性結合，幾秒到幾十秒即可完成，出現(xiàn)可溶性小的復合物，肉眼不可見。第二階段為形成可見的免疫復合物，約需幾十分鐘到數(shù)小時才能完成，如沉淀線、沉淀環(huán)。絮狀沉淀試驗：絮狀沉淀試驗：抗原抗體溶液在電解質的存在下結合，形成絮狀沉淀物，這種絮狀沉淀受抗原和抗體比例的直接影響，因此常用來作為測定抗原抗體反應最適比例的方法。42、免疫比濁：最適pH為6.5～8.5，磷酸鹽緩沖液。（R型抗體，增濁劑如聚乙二醇（PEG）、吐溫20）。適合于大批