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文檔簡介
1、福建農(nóng)林大學博士學位論文農(nóng)材菌介導幾丁質酶和β-1,3-葡聚糖酶基因遺傳轉化花生(Arachis hypogaea L.)的研究姓名:單世華申請學位級別:博士專業(yè):作物遺傳育種指導教師:莊偉建2003.4.1福建農(nóng)林大學博士學位論文劃傷轉化更佳:菌液侵染時間以1 0 ~1 5 m i n 相對利于外源基因轉化。胚狀體和胚小葉再生途徑基因轉化目前僅分別得到數(shù)十??剐匝?,需進一步誘導或伸長培養(yǎng)鑒定,二者均以1 0 ~2 0 m i n 侵
2、染時間較好,共培養(yǎng)均以7 2 h r 利于得到抗性芽,并且胚軸外植體基因轉化時在體胚誘導伸長階段進行K r n 篩選對提高抗性芽數(shù)量有利。子葉外植體轉化褐化現(xiàn)象較嚴重,種子的新鮮程度和品種類型對轉化有一定影響,目前僅得到1 株抗性植株需進一步鑒定。研究發(fā)現(xiàn),所使用的兩品種閫在不同的轉化處理中也有一定差異。針對原有攜帶質粒載體的農(nóng)桿菌菌株對抗生素不敏感的特點進行了菌株轉按,質粒載體轉入新的農(nóng)桿菌菌株后,在含適宜濃度抗生素的固/液體Y E
3、P 培養(yǎng)基皆完全被抑制,從而被成功用于本研究。為比較研究外源基因轉化情況及抗性植株生長狀況,選擇煙草品種翠碧l 號進行相同基因轉化試驗,P c R 檢測得到1 0 株左右陽性植株,轉化率為3 4 ~7 0 %。研究發(fā)現(xiàn),3 ~5 m i n 侵染時間較好,工程菌液濃度以0 D ‰為0 .5轉化率最高。目前轉化植株已得到種子,對后代的分離情況和抗病性鑒定也隨后進行。關鍵詞:花生,再生體系,幾丁質酶基因,B —l ,3 一葡聚糖酶基因,農(nóng)桿
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