1、福建農(nóng)林大學博士學位論文農(nóng)材菌介導幾丁質酶和β-1，3-葡聚糖酶基因遺傳轉化花生（Arachis hypogaea L.）的研究姓名：單世華申請學位級別：博士專業(yè)：作物遺傳育種指導教師：莊偉建2003.4.1福建農(nóng)林大學博士學位論文劃傷轉化更佳：菌液侵染時間以1 0 ～1 5 m i n 相對利于外源基因轉化。胚狀體和胚小葉再生途徑基因轉化目前僅分別得到數(shù)十?？剐匝?，需進一步誘導或伸長培養(yǎng)鑒定，二者均以1 0 ～2 0 m i n 侵

2、染時間較好，共培養(yǎng)均以7 2 h r 利于得到抗性芽，并且胚軸外植體基因轉化時在體胚誘導伸長階段進行K r n 篩選對提高抗性芽數(shù)量有利。子葉外植體轉化褐化現(xiàn)象較嚴重，種子的新鮮程度和品種類型對轉化有一定影響，目前僅得到1 株抗性植株需進一步鑒定。研究發(fā)現(xiàn)，所使用的兩品種閫在不同的轉化處理中也有一定差異。針對原有攜帶質粒載體的農(nóng)桿菌菌株對抗生素不敏感的特點進行了菌株轉按，質粒載體轉入新的農(nóng)桿菌菌株后，在含適宜濃度抗生素的固／液體Y E

3、P 培養(yǎng)基皆完全被抑制，從而被成功用于本研究。為比較研究外源基因轉化情況及抗性植株生長狀況，選擇煙草品種翠碧l 號進行相同基因轉化試驗，P c R 檢測得到1 0 株左右陽性植株，轉化率為3 4 ～7 0 ％。研究發(fā)現(xiàn)，3 ～5 m i n 侵染時間較好，工程菌液濃度以0 D ‰為0 ．5轉化率最高。目前轉化植株已得到種子，對后代的分離情況和抗病性鑒定也隨后進行。關鍵詞：花生，再生體系，幾丁質酶基因，B —l ，3 一葡聚糖酶基因，農(nóng)桿