1、近年來,高通量的基因組學技術使我們對腫瘤相關的基因有了深入的了解。但是,這并不足以使我們能夠在分子水平對腫瘤發(fā)生的機制進行深入的剖析,基因組學技術無法對腫瘤蛋白水平、轉錄/轉錄后修飾以及蛋白—蛋白相互作用進行監(jiān)測[1]。因此,有必要利用蛋白質組學技術對腫瘤相關的蛋白進行細致的研究。作為蛋白質組學的核心技術之一的雙向凝膠電泳(2-DE)是1975年由0’Farrell等[2]首先發(fā)明的,其基本原理是利用蛋白質的等電點和分子量的不同而將它們

2、相互分離。利用2-DE對腫瘤與正常組織差異表達蛋白質進行分離和鑒定,有助于尋找腫瘤的特異分子標志物,可作為一種潛在的診斷工具。
　　胃癌是一種常見的惡性腫瘤,其死亡率在所有惡性腫瘤中排第二位,世界上每年大約有75萬人死于胃癌[3]。造成胃癌死亡率高的原因主要是其早期診斷率非常低,只有不到一半的患者能夠在早期胃癌時被診斷。據(jù)AJCC的調查,IV期胃癌患者的5年生存率只有7％到10.1%,而早期胃癌(IA期)患者的5年生存率可達78%

3、到93.3%[4,5]。因此,提高早期診斷率對改善胃癌患者的預后十分關鍵。利用蛋白質組學的技術對臨床的腫瘤標本進行研究,可以發(fā)現(xiàn)腫瘤相關的分子標志物。這類標志物既可以作為研發(fā)新的早期診斷方法的基礎,也可以為了解腫瘤發(fā)生、發(fā)展的分子機制提供線索。
　　胃腺癌是胃惡性腫瘤中最常見的病理類型,大約占其90%以上。我們希望通過對胃腺癌及正常胃組織雙向電泳的技術進行優(yōu)化,提高對堿性區(qū)域和低豐度蛋白的分離、檢測,改善胃腺癌及正常胃組織蛋白質圖

4、譜的分辨率。在本研究的第一部分中,我們利用4個pH范圍梯度重疊的IPG膠條對臨床獲取的胃腺癌及正常胃組織進行2-DE,分別獲得了各自的總蛋白圖譜。通過分析胃腺癌及其配對正常胃組織的2DE圖譜,共找出115個差異表達蛋白點。在研究的第二部分中,通過對著115個差異蛋白點分別經MALDI-TOF-MS質譜鑒定和數(shù)據(jù)庫檢索,共鑒定出70種差異表達的蛋白質。其中包括鈣結合蛋白、波形蛋白、過氧化物歧化酶、α-烯醇酶、鈣調理蛋白等27種在胃腺癌組織