1、本研究利用雜交瘤技術研制出氯霉素單克隆抗體,建立了氯霉素快速檢測方法，并在食品安全檢測中得到初步應用。 本研究分別采用羰基二咪唑法和戊二醛法將氯霉素偶聯(lián)到蛋白載體上，制備出BSA-CAP和OVA-CAP，分別作為免疫抗原和包被抗原。用BSA-CAP免疫BALB/c小鼠，取免疫鼠脾淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞SP2/0作融合實驗，篩選出 6株能穩(wěn)定產生氯霉素抗體的雜交瘤細胞株，并制備出單克隆抗體，經鑒定6株單抗亞型均為IgG1，效價在

2、1：107～1：109之間。 設計了直接競爭ELISA檢測方法，并對包被條件、包被濃度、競爭反應時間等條件進行了優(yōu)化，建立了完整的ELISA檢測方案。該方法的檢測時間在1.5h之內，最低檢測限為0.05ng/ml，I50為0.9ng/ml，與其他幾種抗生素的交叉反應均小于0.1％，優(yōu)于國家現(xiàn)有氯霉素殘留限量的檢測要求。 同時建立了檢測氯霉素的膠體金免疫層析方法。采用免疫競爭法，將抗氯霉素單克隆抗體-膠體金結合物包被在膠體