再生障礙性貧血患者Treg-Th17細胞失衡及臍帶MSCs對其調節(jié)作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本實驗擬通過流式細胞術檢測再生障礙性貧血(aplasticanemia,AA)患者外周血Treg細胞與Th17細胞占單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)的百分比,初步闡明Treg/Th17細胞失衡在AA發(fā)病機制中的作用及意義。并采用組織塊平鋪法進行臍帶間充質干細胞(Umbilical cord-derived mesenchymal stemcells,UC-MSCs)的原

2、代分離與培養(yǎng),探討UC-MSCs對AA患者Treg/Th17細胞失衡的調節(jié)。
  方法:
  1、UC-MSCs的分離培養(yǎng)和鑒定:取足月正常分娩或剖腹產的新生兒臍帶,采用組織塊平鋪法分離、培養(yǎng)臍帶間充質干細胞。采用流式細胞術(Flow cytometry,FCM)檢測表面CD34、CD45、CD90、CD105的表達。
  2、FCM檢測10例健康對照者、15例AA患者外周血Treg細胞和Th17細胞分別占PBMCs的

3、百分比,比較Treg/Th17細胞的比率。
  3、將AA患者的PBMCs與UC-MSCs共培養(yǎng)72h,檢測AA患者單獨培養(yǎng)組和與UC-MSCs共同培養(yǎng)組Treg細胞和Th17細胞分別占 PBMCs的百分比,比較Treg/Th17比率的變化。
  結果:
  1、經FCM鑒定MSCs表面標記CD90、CD105陽性率≥98%,CD34、CD45陽性率≤1%。
  2、AA患者組外周血Treg細胞百分率明顯低于健康

4、對照組(P<0.05),Th17細胞百分率明顯高于健康對照組(P<0.05),Treg/Th17細胞比率明顯低于健康對照組(P<0.05)。
  3、AA患者的PBMCs與UC-MSCs共培養(yǎng)后, Treg細胞百分率明顯高于單獨培養(yǎng)組(P<0.05),Th17細胞百分率明顯低于單獨培養(yǎng)組(P<0.05),Treg/Th17細胞比率較單獨培養(yǎng)組明顯升高(P<0.05)。
  結論:
  1、AA患者外周血Treg細胞百分

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