偷窥国产在线91,亚洲无线国产观看原创,日本精品aⅴ一区二区三区,久久九九兔免费精品6

簡介：北京中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文中西醫(yī)結(jié)合治療小兒病毒性心肌炎臨床研究姓名喻燕萍申請學(xué)位級別碩士專業(yè)中醫(yī)兒科指導(dǎo)教師肖和印200251墮墨墮壘墮芝墮童堡魚盟壅盟墮墮ABSTRACTINFANTILEVIRALMYOCARDITISISONEOFTHECOMMONDISEASESOFTHEINFANTILECARDIOVASCULARSYSTEMAMONGTHEPEDIATRICDISEASESRESULTEDFROMVIRUSINFECTION，CARDIACMUSCLEEMERGESACUTEORCHRONICINFLAMMATORYAFFECTIONSOFAR，NOONEHASN’TGOTANYPRECISESTATISTICALDATAABOUTINCIDENCEOFINFANTILEVIRALMYOCARDITISBUTALOTOFCLINICALMATERIALSSHOWTHATTHEINCIDENCEOFINFANTILEVIRALMYOCARDITISISTENDEDTISEREGARDINGTOITSTREATMENT，ATPRESENTTHEREHASN’TBEENMUCHREALLYEFFECTIVEANDSAFEMETHODINWESTERNMEDICINEIFANYITISTHEHETEROPATHYORSUPPORTINGTREATMENTHOWEVERTHETRADITIONALCHINESEMEDICINEDISPLAYSCERTAINDOMINANCEINANTIVIRA】FUNCTION，SCAVENGINGOXYRADICAL，IMPROVINGORGANISMALIMMUNOCOMPETENCE，ETCTHEREFORE，THECOMBINEDTREATMENTOFTRADITIONALCHINESEANDWESTERNMEDICINEMAKESUPTHEDEFECTOFTHETRADITIONALCHINESEMEDICINEANDSTRENGTHENSTHEEFFECTOFWESTERNMEDICINEINORDERTOFURTHERPROBETHECLINICALAPPLICATIONRESULTOFTHECOMBINEDTREATMENTOFTRADITIONALCHINESEANDWESTERNMEDICINEININFANTILEVIRAIMYOCARDITIS，THEAUTHORCARRIEDONTHISRESEARCHTHISSTUDYMAINLYCONTAINSTWOPARTSLITERATUREREVIEWANDCLINICALRESEARCHINTHEPARTOFLITERATUREREVIEWFIRSTLYTHEAUTHORDISCUSSESTHEETIOPATHOGENESIS，PATHOGENESIS，ANDTHENSUMMARIZESDIFFERENTTREATMENTMETHODSOFMODERNCHINESEMEDICINEFORINFANTILEVIRAIMYOCARDITISSUCHASTHETREATMENTBASEDONTHEDIFFERENTIAIDIAGNOSIS，SPECIALIZEDPRESCRIPTIONFORSPECIALTYPEANDTHECOMBINEDTREATMENTOFTRADITIONALCHINESEANDWESTERNMEDICINEINTHEEND，THEAUTHORREVEALSTHEPRESENTSITUATIONANDWEAKNESSOFTHERESEARCHININFANTILEVIRALMYOCARDITISINTHEPARTOFCLINICALOBSERVATION，69CASESOFINFANTILEVIRALMYOCARDITISHAVEALLBEENTREATEDBYTHECOMBINEDTREATMENTOFTRADITIONALCHINESEANDWESTERNMEDICINE’ONTHEONEHAND，WESTERNMEDICINESCONTAINANTIVIRALDRUG，OXYRADICALSCAVENGERANDNUTRITIONALDRUGOFMYOCARDIUMONTHEOTHERHAND，THETRADITIONALCHINESEMEDICINEAPPLIESCLINICALEFFECTIVEMEDICINESINPRESCRIPTIONANDCOMPATIBILITYBASEDONTHEDIFHRENTIAIDIAGNOSISAFTERTREATMENTTHECLINICAIRESULTSOFTHEPATIENTSWITHDIFFERENTSUFFERINGCOURSEORDIFFERENTSUFFERINGDEGREEBEFOREANDAFTERTREATMENTHAVEBEENOBSERVED，INCLUDINGCLINICALSYMPTOMS，ELECTFOCARDIOGRAM，MYOCARDIALBIOCATALYSTANDSOMERELATEDLABORATORYEXAMINATIONMEANWHILE，THEAUTHORANALYZESTHEETIOPATHOGENESIS，PATHOGENESISINWESTERNMEDICINEANDTRADITIONALCHINESEMEDICINEOFINFANTILEVIRALMYOCARDITISFROMTHECOURSEOFTREATMENTTHEAUTHORSUMMARIZESSOMEEXPERIENCEINTHETREATMENTOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEOFINFANTILEVIRALMYOCARDITISTHEABOVECLINICALRESEARCHINDICATESLTHEMAINETIOPATHOGENESISOFINFANTILEVIRALMYOCARDITISINTHETRADITIONAL

簡介：偽狂犬病病毒PSEUDBIESVIRUSPRV屬皰疹病毒科、甲型皰疹病毒亞科中的豬皰疹病毒Ⅰ型，它能導(dǎo)致多種家畜和野生動物發(fā)生急性傳染病。豬是該病毒的貯存者和傳染源，豬感染PRV后常表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)的功能紊亂和呼吸系統(tǒng)疾病并引起嚴重的繁殖障礙。該病已給我國乃至全球的養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失，預(yù)防、控制并最終根除該病是我國當前面臨的一項艱巨任務(wù)。采用安全有效的疫苗進行免疫預(yù)防，是控制該病的主要措施。本試驗旨在構(gòu)建含GFP報告基因的偽狂犬病病毒GG基因缺失表達載體。通過酶切、補平、連接的方法對PUSK載體質(zhì)粒進行改造，消除了該載體上的BAMHI和HINDⅢ兩酶切位點。并將改造后的PUSK命名為PUSBH。根據(jù)PACGFP1C1基因序列設(shè)計一對引物，分別在引物的上、下游5’端引入了NOTI酶切位點，通過PCR擴增將目的基因ACGFP包括GFP、CMV、MCS、SV40POLYA克隆入PGEMTEASY載體內(nèi)，構(gòu)建了重組質(zhì)粒。經(jīng)酶切和PCR鑒定證明插入片段是ACGFP基因，并將重組質(zhì)粒命名為PTGFP。用NOTI酶切重組質(zhì)粒PTGFP和載體PUSBH并回收，將載體去磷酸化后與目的片段ACGFP鏈接，通過PCR擴增、酶切、序列測定證明，該轉(zhuǎn)移載體構(gòu)建成功。并將其命名為PUSG。該轉(zhuǎn)移載體含有四個單一酶切位點可供外源基因的插入，從而為構(gòu)建以偽狂犬病毒作載體的二價或多價基因工程疫苗打下了基礎(chǔ)。利用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法，將轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒PUSG與PRV基因組DNA共轉(zhuǎn)染PK15細胞。于熒光顯微鏡下48H便能觀察到綠色熒光，用吸管將有熒光的病變細胞吸出，經(jīng)過三次連續(xù)傳代得到了純化病毒。并經(jīng)過PER和酶切鑒定重組病毒構(gòu)建成功。重組病毒的獲得為下一步研制二價或多價疫苗的篩選提供了方便。

簡介：流行性感冒以下簡稱流感是第一個實行全球監(jiān)測的傳染病，由流感病毒引起。流感病毒的抗原性變異與流感的發(fā)生和流行密切相關(guān)，尤其以血凝素HA1基因的變異最為重要。1997年香港禽H5N1流感病毒感染人以及1999年韶關(guān)市發(fā)生禽H9N2流感病毒感染人的事件后，韶關(guān)市按照上級要求加強了流感的監(jiān)測。這十年來流感病毒感染產(chǎn)生了怎樣的變化，原來的防控策略是否需要調(diào)整，怎樣應(yīng)對流感活動的頻繁帶來的新挑戰(zhàn)，未作過研究分析。本研究為分析韶關(guān)流感病毒感染狀況與流行的特征，掌握本地區(qū)主要流感流行毒株H3亞型和B型流感病毒血凝素HA1基因的變異情況，填補本地區(qū)流感病毒分子生物學(xué)研究的空白，為防治流感提供科學(xué)對策。研究目的1分析韶關(guān)市流感病毒感染狀況，掌握流感流行的特征。2分析韶關(guān)市主要流感流行毒株H3亞型及B型病毒血凝素HA1基因的變異情況，填補本地區(qū)流感病毒分子生物學(xué)研究的空白。材料與方法1材料11收集韶關(guān)市現(xiàn)存1998年至今流感監(jiān)測資料。12流感病毒H3亞型及B型毒株來源韶關(guān)市疾控中心保存的歷年流感毒株。2研究方法21用描述性流行病學(xué)方法對韶關(guān)市流感流行情況進行分析。22用MDCK細胞復(fù)蘇凍存的流感毒株，選擇滴度較高的毒株測定血凝素HA1基因序列，使用BIOEDIT、DNASTARTMEGALIGN，CLUSTALW、TREEVIEWX等生物軟件包對序列進行編輯、比對、進化分析。研究結(jié)果1韶關(guān)市1998～2007年流感流行情況1998～2007年共采集流感樣患者標本5062人份，經(jīng)分離鑒定流感病毒陽性303株，分離率為599％；在303株流感病毒株中，H3亞型流感病毒245株8086％，B型流感病毒34株1122％，H1N1流感病毒20株660％，首次發(fā)現(xiàn)禽H9N2流感病毒感染人，并檢出4株132％禽H9N2流感病毒；10年中共報告疫情128起，以3～7月份為爆發(fā)高峰，以中、小學(xué)校居多，以H3亞型流感病毒引起的疫情見多，其次為B型流感病毒；共采集一般人群血清596份，流感病毒H1、H3、B1、B2型抗體陽性率分別為5772％，6930％、4077％、2768％共采集職業(yè)暴露人群血清366份，流感病毒H5N1和H9N2抗體陽性率分別是027％和3308％。2韶關(guān)市H3亞型流感病毒HA1基因的氨基酸變異與代表株APANAMA200799相比，所測毒株同源性從913％938％，在5個抗原決定蔟共14個氨基酸發(fā)生變異，RBS上有6個位點發(fā)生變異，各毒株均在不同的位點上增加了一個糖基化位點與代表株AFUJIAN41102比較，所測毒株同源性從902％977％，18個氨基酸變異發(fā)生在5個抗原決定蔟，10個氨基酸變異發(fā)生在RBS，SG19999，SGY00908分別增加了一個糖基化位點；與代表株AWISCONSIN6705比較，同源性從883％984％，共有14個氨基酸變異發(fā)生在5個抗原決定蔟，RBS上有9個氨基酸發(fā)生變異，各毒株均在不同的位點上增加了一個糖基化位點本次研究的毒株變異率逐漸下降，變異最活躍的兩個氨基酸位點第158和173位氨基酸分別位于B和D抗原決定蔟。3韶關(guān)市B型流感病毒HA1基因的氨基酸變異本次測得的B型Y系毒株與B型代表株BSICHUAN37999比較，同源性是950％和953％，共有6個氨基酸變異分別位于A，B和E抗原決定蔟，其中194位氨基酸位于RBS，均在167增加了一個糖基化位點。與代表株BFLIDA42006相比，同源性為976％和985％，有3個氨基酸變異位于抗原決定蔟A，B，E區(qū)，其中194位氨基酸位于RBS，SGY01008在196位增加了1個糖基化位點。SG17399與SGY01008之間有9個氨基酸發(fā)生了變異，其中6個氨基酸位于A，B，E抗原決定蔟。本次測得的B型V系毒株與B型代表株BHONGKON3302001相比，同源性是938％和977％，其中有4個氨基酸變異分別位于A，C，E抗原決定蔟，兩毒株均在第212位增加了一個糖基化位點。與代表株BMALAYSIA25062004相比，同源性是956％和994％，其中1個氨基酸變異位于C抗原決定蔟。SG53805與SGY13906之間有13個氨基酸發(fā)生了變異，其中第53位氨基酸在C區(qū)抗原決定蔟。研究結(jié)論1韶關(guān)市流感流行的高峰與報道基本一致，多年的流行優(yōu)勢株為為甲型流感病毒H3亞型。2首次發(fā)現(xiàn)H9亞型流感病毒自然感染人，為人禽流感感染主要是禽類傳染給人提供了參考。3韶關(guān)地區(qū)H3亞型流感病毒在十年間發(fā)生了三次抗原性漂移，分別是1999年、2002或2003年、2007年。從2008年的氨基酸變異情況得知，H3亞型流感病毒的抗原性漂移有增強的趨勢。4不同年份的B型Y系流感毒株抗原性發(fā)生了變異，2008年分離株SGY01008相對于代表株BFLIDA42006的改變還沒導(dǎo)致抗原性漂移，但是BFLIDA42006作為疫苗株的保護性還沒達到最好效果；2006年分離的毒株與疫苗株MALAYSIA250604相比變異沒有達到抗原性漂移，但是氨基酸變異的數(shù)量和范圍比較大，同源性不高，疫苗株對人群產(chǎn)生的抗體保護水平還不夠高。5本次研究的毒株HA1變異形式多種，在一般的抗原性漂移理論基礎(chǔ)上，非抗原位點在范圍，數(shù)量上的變異或許會助長HA1抗原性的漂移。流行毒株

簡介：後旦大學(xué)碩士研究生論文帕金森病、輕微認知功能損害患者的認知與腦漲落圖研究STUDYOFCOGNITIVEFUNCTIONANDENCEPHALOFLUCTUOGRAPHTECHNOLOGYINPARKINSONIANPATIENTSANDMILDCOGNITIVEIMPAIRMENTPATIENTS培養(yǎng)單位復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院專業(yè)姓名學(xué)號學(xué)位導(dǎo)師導(dǎo)師組成員教授主治醫(yī)生講師矗|J0扛N病麗∞士震馳玎經(jīng)張夠碩洪孫丁一嗣一恥燃一兩復(fù)黽大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文帕金森病、輕微認知功能損害患者的認知與腦漲落圖研究摘要目的研究早期PD患者、遺忘型MCI患者的認知功能與腦漲落圖ET特點，探討ET對PD、MCI的診斷以及對具體認知功能的評估價值。對象與方法對80例受試者進行認知評定和腦漲落圖檢測，其中早期PD患者20例，遺忘型MCI患者20例，以及性別、年齡、文化程度匹配的正常對照者40例。認知評定工具邏輯記憶測驗、言語流暢性測驗、連線測驗。腦漲落圖檢測分別檢測受試者在靜息、記憶及執(zhí)行狀態(tài)下的腦漲落圖。結(jié)果1PD組患者在邏輯記憶測驗中即刻回憶的正確數(shù)、言語流暢性測驗中的家中用品數(shù)及超市商品數(shù)的各項得分均低于正常對照組，在連線測驗A和B的耗時數(shù)及TMTBTMTA均長于正常對照組，這些差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；遺忘型MCI組患者僅在邏輯記憶測驗中延遲回憶的正確數(shù)得分低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其余認知檢查結(jié)果與正常對照組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2在腦漲落圖S譜系的變化方面，PD組的S1譜、S4系、S11系較正常對照組減低，遺忘型MCI組的S3系較正常對照組升高，這些差異有統(tǒng)計學(xué)意義；在優(yōu)勢漲落的平均功率空間分布方面，額低枕高的前后梯度均有逆轉(zhuǎn)，但PD組的前后梯度逆轉(zhuǎn)更明顯，逆轉(zhuǎn)程度大，而遺忘型MCI組逆轉(zhuǎn)程度與正常對照組接近。3正常受試者在記憶狀態(tài)下，S2譜、S3系、S5系及S2S1的值升高，而S4／3系的值下降，與靜息狀態(tài)下的差異有統(tǒng)計學(xué)意義；邏輯記憶的延遲回憶正確數(shù)得分LMT2與S譜系簡單相關(guān)分析，可見S3系、S5系與LMT2呈正相關(guān)，S4／3系與LMT2呈負相關(guān)，有統(tǒng)計學(xué)意義，進一步進行多因素相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，S2譜、S3系、S5系越大，S13系越小，LMT2的值就越大。正常受試者在執(zhí)行狀態(tài)下，S11系升高，與靜息狀態(tài)下的差異有統(tǒng)計學(xué)意義；言語流暢性得分VFT2與S譜系簡單相關(guān)分析，可見S4系、S11系與VFV2呈正相關(guān)，S2譜、S3系與VFT2呈負相關(guān)，有統(tǒng)計學(xué)意義，進一步進行多因素相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，S11系越大，S2譜越小，VFL2的值就越大。PD組在記憶、執(zhí)行狀態(tài)下，均出現(xiàn)S4系升高，與靜息狀態(tài)下的差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其余譜系的變化沒有統(tǒng)計學(xué)意義。遺忘型MCI患者在記憶、執(zhí)行狀態(tài)下，各譜系的變化均沒有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論1非癡呆、非抑郁的早期PD患者在語言工作記憶、執(zhí)行功能、注意力、抗干擾能力方面損害明顯，即額葉認知功能障礙；遺忘型MCI患者主要存在延遲回憶減退，其他認知功能相對正常。2根據(jù)PD的譜系變化分析，早期PD患者可能存在多種神經(jīng)遞質(zhì)的變化，PD患者的大腦老化程度要明顯超過同齡正常

簡介：分類號＆22曼LUDC魚密級一一坌玨一編號10299S0813001江蒜大擎碩士學(xué)位論文MASTER，SDISSERTATION低分王壓塞控魚』塹生鼠壓細胞左云陛壁鎏厶巨細胞痘壹笪塞驗巫究EXPERIMENTSOFLOWMOLECULARWEIGHTHEPARININHIBITNEWBOMMICELIVERCELLCONGENITALINFECTIONHUMANCYTOMEGALOVIRUS學(xué)科專業(yè)』B型堂作者姓名奎絲塞指導(dǎo)教師題紐麼答辯日期星Q曼生Q魚旦Q旦學(xué)術(shù)誠信說明刪㈣㈣㈣唧Y18“11I9RLWIIL5BIILJJ3LNIIIL4RNLL’1IR”本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的內(nèi)容以外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到違反本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名套F考爺簽字日期≯”年廠月TP日

簡介：第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文腺病毒介導(dǎo)的內(nèi)皮抑素基因?qū)π∈驦EWIS肺癌的抑制及其與化療協(xié)同作用的實驗研究姓名馬凌云申請學(xué)位級別博士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（呼吸系?。┲笇?dǎo)教師劉忠令20040301，軍醫(yī)夫掌博士掌T論文腺病毒介導(dǎo)的內(nèi)皮抑素基因?qū)π∈驦EWIS肺癌的抑制及其與化療協(xié)同作用的實驗研究中文摘要血管抑制療法是目前腫瘤治療研究的一個熱點。1997年發(fā)現(xiàn)的內(nèi)皮抑素因其抑制血管生成作用強而備受關(guān)注，內(nèi)皮抑素重組蛋白在動物實驗及臨床試驗中已顯示出明顯的抑瘤作用。但內(nèi)皮抑素蛋白制劑存在時效短、需反復(fù)追加，并且可引起全身性副作用等不足，使其在臨床的應(yīng)用受到限制。為解決這一矛盾，本實驗構(gòu)建攜帶小鼠內(nèi)皮抑素MOUSEENDOSTATIN，MES基因的復(fù)制缺陷型腺病毒載體ADMES，在體外證明其轉(zhuǎn)染效率、安全性及其血管抑制活性的基礎(chǔ)上，研究ADRUES對小鼠LE硒S肺癌生長、轉(zhuǎn)移的抑制及其與化療的協(xié)同作用。目前國內(nèi)尚無文獻報道，本實驗從以下三部分進行研究第一部分攜帶內(nèi)皮抑素基因的增殖缺陷型重組腺病毒載體ADMES的構(gòu)建及其制備目的構(gòu)建攜帶小鼠內(nèi)皮抑素基因的復(fù)制缺陷型腺病毒載體ADMES，并進行體外安全性檢測。方法選擇MES基因為治療基因，以腺病毒作為基因轉(zhuǎn)移工具，將其亞克隆至穿梭質(zhì)粒中構(gòu)建成轉(zhuǎn)移質(zhì)粒PCAL3RUES，再通過陽離子脂質(zhì)體法，與腺病毒基因組骨架質(zhì)粒PBGHE3共轉(zhuǎn)染293細胞，在293細胞內(nèi)進行兩質(zhì)粒同源重組，構(gòu)建成具有感染活力的復(fù)制缺陷型腺病毒ADMES。將酶切鑒定正確的病毒在293細胞內(nèi)進一步擴增，通過氯化銫密度梯度離心法純化和50％組織培養(yǎng)感染劑量法TCID50進行滴度測定，并通過感染HELA細胞對其安全性進行評價。結(jié)果成功將MES基因插入腺病毒載體，擴增純化后的重組腺病毒滴度高達10MPFU／ML；將該載體轉(zhuǎn)染HETA宮頸癌細胞后，觀察7天，細胞的形態(tài)及增殖均表現(xiàn)正常，未見細胞病理效應(yīng)CPE。結(jié)論我們所制備的重組腺病毒ADMES滴度高、純度好、毒性低。第二部分ADRUES體外轉(zhuǎn)染小鼠LEWIS肺癌LLC細胞及其轉(zhuǎn)染上清對血管內(nèi)皮細胞增殖的抑制作用目的體外證明腺病毒載體的轉(zhuǎn)染效率、安全性及其對血管內(nèi)皮細胞的抑制活性，為下一步的體內(nèi)研究奠定基礎(chǔ)。方法以攜帶綠色熒光蛋白GFP報告基因的重組腺病毒ADGFP轉(zhuǎn)染LLC細胞，熒光顯微鏡下觀察呈現(xiàn)綠色熒光細胞比例即轉(zhuǎn)染效

簡介：南京師范大學(xué)碩士學(xué)位論文PAI2基因重組腺病毒的構(gòu)建及抗腫瘤研究姓名孫麗君申請學(xué)位級別碩士專業(yè)細胞生物學(xué)指導(dǎo)教師曹祥榮2009PAI2基因重組腺病毒的構(gòu)建及抗腫瘤研究南京師范大學(xué)碩士學(xué)位論文IIABSTRACTCANCERISONEOFTHEMAJTHREATSTOPUBLICHEALTHINMODERNSOCIETYASTRADITIONALTHERAPIESSUCHASSURGERYRADIOTHERAPYCHEMOTHERAPYSHOWLITTLEEFFECTIVENESSINMANYCASESGENETHERAPYISAGOODWAYADENOVIRUSVECTFGENETHERAPYISCURRENTLYTHEMOSTPROMISINGWERECONSTRUCTEDANADENOVIRUSCARRYINGTHERAPEUTICGENESTHATPLAYADUALROLEINTHETREATMENTOFTUMS，WHICHCANSPECIFICICALLYREPLICATEINTUMCELLSLYSISTUMCELLSWHILELEAVINGNMALCELLSINTACTITISCALLEDTARGETEDGENEVIRUSTREATMENTITISREPTEDTHATTELOMERASEISTHEMOSTEXTENSIVETUMMOLECULARMARKERINTHISSTUDYANOVELCANCERSPECIFICREPLICATIONCOMPETENTVECTPADSUWASCONSTRUCTEDBYEMPLOYINGTHEHUMANTELOMERASEREVERSETRANASEHTERTPPROMOTERTODRIVETHEEXPRESSIONOFADENOVIRUSE1AGENETHENPADSUPAI2WASCONSTRUCTEDBYINGTHEPAI2GENEINTOTHEADENOVIRUSVECTPADSUTHERECOMBINANTADENOVIRUSWASPACKEDINHEK293NAMEDADSUPAI2THEVIRUSWASIDENTIFIEDBYPCRTHENINFECTEDDIFFERENTCELLLINESTHEGENEEXPRESSIONOFADSUPAI2WASINVESTIGATEDBYWESTERNBLOTTHERESULTSSHOWEDTHATADENOVIRUSE1AGENEEXPRESSEDINTELOMERASEPOSITIVECELLSWHEREASNOTINTELOMERASENEGATIVECELLSPAI2GENEEXPRESSIONLEVELSWERESIGNIFICANTLYENHANCEDITCONFIRMEDTHATADSUPAI2COULDTARGETTOTUMCELLSREPLICATEEXPRESSTHERAPEUTICGENEOFPAI2BYCOMPARINGTHEKILLINGEFFECTOFVIRUSONLIVERCANCERCELLLINEBEL7402FIBROBLASTCELLLINEBJWEFOUNDTHATTHEVIRUSHADIVEKILLINGEFFECTWHICHWASSTRONGERINTUMCELLSWOUNDHEALINGTESTSHOWEDTHATCELLMIGRATIONWASMUCHSLOWERTHANBLANKCONTROLWHENWEINFECTEDCELLSWITHADSUPAI2ITINDICATEDTHATADSUPAI2CANINHIBITCELLMIGRATIONITWASALSOCONFIRMEDBYSOFTAGARCOLONYFMINGEXPERIMENTSWHICHSHOWEDTHATTHERATEOFCOLONYFMATIONWASSIGNIFICANTLYREDUCEDAFTERBEINGINFECTEDCELLSWITHADSUPAI2THESERESULTSINDICATEDTHATTHEADENOVIRUSVECTWHICHCOULDIVEREPLICATEEXPRESSTHERAPEUTICGENESINCANCERCELLS，WASSUCCESSFULLYCONSTRUCTEDITWASAPROMISINGSYSTEMFTARGETEDCANCERGENETHERAPYKEYWDSADENOVIRUSTUMTELOMERASEPAI2

簡介：中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院博士學(xué)位論文SARS冠狀病毒的臨床檢測和基因變異分析研究姓名徐東平申請學(xué)位級別博士專業(yè)內(nèi)科學(xué)傳染病學(xué)指導(dǎo)教師張玲霞20060524軍醫(yī)進修學(xué)院博士學(xué)位論文SA憋冠狀病毒的臨床檢測和基因變異分析研究中文摘要本研究旨在研究嚴重急性呼吸綜合誣SAJ遲患者臨床標本中SARS冠狀病毒SAI峪COVRNA和特異性抗體的檢出特點、SARSCOV的體外培養(yǎng)分離特點和病毒棘突蛋白編碼基因S基因和核表殼蛋白編碼基因N基因的序列變異特點，以期為SARS的早期診斷，合理預(yù)防，以及對深入了解SARSCOV的病毒學(xué)特點和S√～I塔的發(fā)病機制研究提供幫助。L，SARS患者臨床標本中SARSCOVRNA及特異性抗體的檢測檢測了54例SARS患者486份臨床標本血漿，全血痰，尿，糞便中的SARSCOVRNA，根據(jù)丑LJOL株SARSCOV序列GENB觚K序列號AY278488設(shè)計了N基因片段擴增引物，結(jié)合世界衛(wèi)生組織WH0推薦的R基因片段擴增引物，顯著提高了用巢式反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)NC刪RTPCR對SARS七OVRNA的檢出率，在519％28／54的患者中檢測到病毒RNA同時對病毒鼢M和抗S舢峪COV特異性抗體的動態(tài)檢測表明，SARS發(fā)病前2周S舢娼COVRNA陽性率高于抗體陽性率，對SARS早期確診有一定意義2、SARS患者糞便，尿液中SA姻OV的培養(yǎng)鑒定用Ⅵ∞E6細胞對12例患者的2L份糞便和尿液標本進行了培養(yǎng)分離，用盲傳法在16份S燦峪COVRNA陽性標本中，有10份標本培養(yǎng)分離到了活病毒，其中L份尿液和2份糞便分別采自3例發(fā)病時間28D2弘36D的恢復(fù)期患者，提示SARS恢復(fù)期患者排泄物仍可能具有傳染性3、最早傳入北京地區(qū)的SA髓COVS基因全序列克隆用從北京地區(qū)首批發(fā)現(xiàn)的L例SARS患者咽拭子接種細胞培養(yǎng)上清的RNA為模板，通過巢式RTPCR分6個片段擴增出了SARSC0VS基因全序列。用分步重疊PCR連接克隆了S基因全片段，序列分析表明克隆基因與BJ01株SARSCOVS基因序列一致，為S基因功能和疫苗研究提供了基礎(chǔ)。●●，●T，

簡介：點擊查看更多SARS患者臨床標本中脊髓灰質(zhì)炎病毒及呼腸病毒的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：研究背景基因治療作為一種新的治療方法，被認為是醫(yī)學(xué)科學(xué)中最新、最有潛力和最可能發(fā)生革命性變化的領(lǐng)域。目前，基因治療亟待解決的問題是在如何在活體實時、無創(chuàng)傷地檢測目的基因的表達、分布和治療的療效。分子影像學(xué)通過反映機體內(nèi)細胞和分子水平的改變，能夠在活體上對基因治療效果進行評價，而不影響其生理活動，具有遠大的前景。目前基因表達顯像應(yīng)用的主要技術(shù)手段包括核醫(yī)學(xué)、MRI、光學(xué)成像。由于MRI空間分辨率高已達ΜM級，設(shè)備比較普及，同時可獲得解剖及生理信息，MRI分子影像學(xué)成為近年來的研究熱點。MRI分子影像學(xué)以報告基因為基礎(chǔ)，報告基因即基因的表達產(chǎn)物能與攜帶影像學(xué)標記物的分子探針特異性結(jié)合，從而可為影像學(xué)設(shè)備所檢測到的基因。其中一個熱點研究的報告基因是酪氨酸酶基因，酪氨酸酶是催化合成黑色素的關(guān)鍵酶。黑色素是一種陰離子，能與鐵等金屬高效結(jié)合，降低了金屬回旋的相關(guān)性時間，使MR的T1弛豫時間變短，表現(xiàn)為特征性的T1加權(quán)像高信號?；蛑委煹年P(guān)鍵技術(shù)是轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染需要合適的載體。目前研究用的是非病毒載體，雖然非病毒載體具有簡便、安全、容量高的優(yōu)點，但轉(zhuǎn)染效率低且缺乏細胞特異性，應(yīng)用受到限制。為了進一步研究酪氨酸酶黑色素報告基因系統(tǒng)，我們需要尋找一種高效的載體。由于腺病毒具有許多優(yōu)點，如使用安全，制備容易，能獲得高純度、高滴度的腺病毒載體；以游離型存在，不整合進入宿主DNA中，無遺傳毒性；表達時間短暫，一般1520天，適合過性表達的需要；載導(dǎo)容量相對較大，理論上可攜帶37KB的DNA；感染宿主范圍較廣，處于靜止期的細胞也能感染。本研究以酪氨酸酶基因腺病毒重組體轉(zhuǎn)染HEPG2細胞，觀察腺病毒載體運送酪氨酸酶基因轉(zhuǎn)染體外細胞的效果。研究目的觀察酪氨酸酶基因腺病毒重組體轉(zhuǎn)染HEPG2細胞的效果及黑色素的表達情況。1、構(gòu)建酪氨酸酶基因腺病毒重組體。2、利用酪氨酸酶基因腺病毒重組體轉(zhuǎn)染HEPG2細胞。3、檢測轉(zhuǎn)染細胞DNA內(nèi)報告基因?qū)肭闆r及轉(zhuǎn)染細胞內(nèi)黑色素表達情況。4、利用磁共振成像MRI對轉(zhuǎn)染細胞進行掃描，觀察轉(zhuǎn)染細胞的信號特征。材料和方法一、酪氨酸酶基因轉(zhuǎn)染1、構(gòu)建酪氨酸酶基因腺病毒重組體，委托東方肝膽外科醫(yī)院病毒基因治療室代為合成，PCDNA3TYR質(zhì)粒由美國哈佛分子影像中心SIMONOVA博士惠贈。2、HEPG2細胞的培養(yǎng)用含10％胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液，每23天換液一次。采用100MM直徑的一次性培養(yǎng)皿，待細胞匯合50％約106個細胞且處于對數(shù)生長期時使用。3、轉(zhuǎn)染細胞生長達到106個時以無血清高糖DMEM培養(yǎng)液換液，在1～4號培養(yǎng)皿中分別加入空白腺病毒載體及MOI為50、150、300的ADTYR，作為對照組及實驗組。轉(zhuǎn)染6小時后吸去含病毒培養(yǎng)液，PBS輕柔沖洗24ML后換以含10％胎牛血清培養(yǎng)液，培養(yǎng)72小時后以胰酶消化，行后續(xù)檢測。5號培養(yǎng)皿加入綠色熒光蛋白基因重組腺病毒。二、MRI成像胰酶消化后獲取細胞懸液經(jīng)計數(shù)為106個細胞，1200RPM離心5分鐘使之沉淀于EP管底，仔細吸除上清后將1～4號離心管平行放置，分別代表空白對照及MOI為50、150、300轉(zhuǎn)染病毒的細胞團。行T1WITRTE50015MS、T2WITRTE2600100MS、STIRTRTE43260MS序列檢查，掃描線圈采用C3線圈，內(nèi)徑11CM，矩陣400432，F(xiàn)OV15CM15CM，層厚15MM，層距07MM。三、轉(zhuǎn)染細胞的驗證結(jié)果1MRI檢查結(jié)果對轉(zhuǎn)染細胞團進行T1WI、T2WI、STIR檢查，轉(zhuǎn)染細胞團均出現(xiàn)高信號，空白對照細胞團未見高信號或僅出現(xiàn)微弱高信號，并呈現(xiàn)一種趨勢，轉(zhuǎn)染病毒量越大，信號越高。至MOI150以后，其信號增高不再明顯。2黑色素染色轉(zhuǎn)染細胞染色較深，呈深褐色，胞漿內(nèi)可見大量黑褐色顆粒?？瞻讓φ占毎麅?nèi)缺乏上述深褐色染色。3REALTIMEPCR1～4號樣品中酪氨酸酶基因TYR的表達量差異倍數(shù)分別為1、6255、61734、61225。實驗組的酪氨酸酶基因TYR的表達量相對空白對照組顯著提高。4綠色熒光成像在熒光顯微鏡檢測中，絕大部分經(jīng)綠色熒光蛋白基因腺病毒重組體轉(zhuǎn)染的HEPG2細胞內(nèi)都可見綠色熒光。結(jié)論1、腺病毒作為運送載體可以高效地運送酪氨酸酶基因進入HEPG2細胞并成功表達。2、酪氨酸酶基因作為報告基因，利用其合成的黑色素來反映體外細胞基因轉(zhuǎn)染情況的技術(shù)方法是可行的。3、MRI能夠檢測到HEPG2細胞內(nèi)由外源基因表達合成的黑色素，說明分子影像學(xué)技術(shù)可以初步評價體外細胞基因轉(zhuǎn)染的效果，影像學(xué)在基因治療中可以發(fā)揮重要的作用。

簡介：人巨細胞病毒HCMV為常見人體感染病毒由于其感染的普遍性致病的復(fù)雜性體內(nèi)不同尋常的潛伏及再激活方式與多種疾病的相關(guān)性日益受到人們的重視人巨細胞病毒屬于皰疹病毒科Β屬雙鏈DNA病毒是人類皰疹病毒中基因組最大的一種病毒其感染可損害許多器官包括肺、視網(wǎng)膜、肝、腎、心臟、消化道和神經(jīng)系統(tǒng)較多文獻認為HCMV神經(jīng)系統(tǒng)感染多發(fā)生于先天性感染、器官移植受者、AIDS等偶見于正常人王得新等曾用ELISA、IFA法檢測92例病毒性腦炎病人的CSF標本中的HCMV特異性抗體其中陽性者19例占206％提示陽性病例為中樞神經(jīng)系統(tǒng)HCMV感染故他們認為HCMV為散發(fā)性病毒性腦炎的病原之一肖波等用IFA、PCR檢測64例皰疹病毒性腦炎患者的腦脊液發(fā)現(xiàn)12例HCMVIGM陽性其中11例臨床經(jīng)過平和預(yù)后良好且無腎移植應(yīng)用免疫抑制劑治療或有免疫缺陷病史因此他們認為HCMV導(dǎo)致的皰疹病毒性腦炎是肯定存在的應(yīng)引起注意和重視由于抗病毒藥物治療可以降低HCMV腦炎出現(xiàn)的頻率和嚴重性因此如何在發(fā)病早期迅速的診斷HCMV活動性感染十分關(guān)鍵研究發(fā)現(xiàn)在HCMV復(fù)期周期中晚期結(jié)構(gòu)抗原PP65是活動性HCMV感染時外周血白細胞中的主要抗原多形核白細胞是HCMV活動感染時表達病毒抗原的主要細胞多形核白細胞中的HCMVPP65抗原血癥已被公認為活動性感染的重要標志我們研究急性脫髓鞘腦病患者外周血HCMVPP65抗原血癥及HCMVIGM表達旨在探討HCMV在急性脫髓鞘腦病中所起的病原學(xué)作用并評估HCMVPP65抗原血癥在急性脫髓鞘腦病HCMV活動性感染早期診斷指導(dǎo)抗病毒治療及抗病毒療效判斷中的價值

簡介：點擊查看更多IP-10對流感病毒致肺細胞病變作用的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號UDC學(xué)位申請人姓名張酷申請學(xué)位學(xué)生類別全里劌塑申請學(xué)位學(xué)科專業(yè)絲壘塹堂指導(dǎo)教師姓名楊繼紅撇一尹●十上中士事碩⑨碩士學(xué)位論文MASTER’STHESIS華中師范大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明和使周授權(quán)說明原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)標明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。作者簽名熬備喪日期弘F|年占月F日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解華中師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬華中師范大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以允許采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后遵守此規(guī)定保密論文注釋本學(xué)位論文屬于保密，在年解密后適用本授權(quán)書。非保密論文注釋本學(xué)位論文不屬于保密范圍，適用本授權(quán)書。作者簽名濃專占日期加JJ年占月F日導(dǎo)師簽名日期2OZJ本人已經(jīng)認真閱讀“CALIS高校學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫發(fā)布章程”，同意將本人的學(xué)位論文提交“CALIS高校學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫“中全文發(fā)布，并可按“章程“中的規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。回童途塞堡變蜃瀅后旦圭生；旦二生；旦三生筮查作者簽名蘇阮日期沙年二月F日抑娩如磐沁日期沙I／年‘月／日

簡介：點擊查看更多慢性乙型肝炎抗病毒治療前后CD4~+T細胞穩(wěn)態(tài)的改變及對HSCs功能的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：【目的】探討文拉法辛緩釋劑與鹽酸氟西汀對首發(fā)抑郁癥患者療效、認知功能及P的影響研究首發(fā)抑郁癥患者的認知功能損害特點以及影響認知功能的相關(guān)因素【方法】研究對象為符合ICD10關(guān)于抑郁發(fā)作診斷標準的首次發(fā)病的門診患者HAMD評分≥17分一周內(nèi)未服用精神科藥物者均獲得書面知情同意將研究對象按對照研究方法分為文拉法辛緩釋劑組與鹽酸氟西汀組共治療12周研究期內(nèi)禁止使用除苯二氮卓類以外的精神科藥物文拉法辛緩釋劑的劑量范圍為75225MGD鹽酸氟西汀劑量范圍為2040MGD治療前、治療第2、4、8、12周進行HAMD量表評定治療前與治療12周后進行全式中國修訂韋氏成人智力量表WAISRC、全式中國修訂韋氏記憶量表WMSRC、威斯康星卡片分類測驗WCST、認知電位P檢查P檢查使用NICOLETSPIRITCA1000型腦誘發(fā)電位儀采用SPSS110統(tǒng)計軟件包進行卡方檢驗、T檢驗、配對T檢驗、秩和檢驗、相關(guān)分析和多元逐步回歸分析【結(jié)論】1文拉法辛緩釋劑治療首發(fā)抑郁癥的總體療效優(yōu)于鹽酸氟西汀2首發(fā)抑郁癥患者存在認知功能損害記憶與執(zhí)行功能的損害比智力損害明顯操作智商低于語言智商阻滯癥狀的嚴重程度影響記憶商數(shù)、語言智商和總智商抑郁癥病情改善程度和阻滯癥狀改善程度明顯影響記憶商數(shù)和操作智商的變化文拉法辛緩釋劑對抑郁癥患者操作智商和執(zhí)行功能的改善作用明顯優(yōu)于鹽酸氟西汀3首發(fā)抑郁癥患者認知功能的損害伴有認知電位P的改變表現(xiàn)為P3波幅降低P3潛伏期延長抑郁癥病情的改善影響P3波幅的提高幅度文拉法辛緩釋劑對抑郁癥患者P3波幅的改善優(yōu)于鹽酸氟西汀