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簡(jiǎn)介：分類號(hào)R493密級(jí)不保密UDC610學(xué)校代碼11065碩士學(xué)位論文計(jì)算機(jī)輔助認(rèn)知訓(xùn)練對(duì)非癡呆型血管性認(rèn)知障礙患者認(rèn)知功能及P300的影響計(jì)算機(jī)輔助認(rèn)知訓(xùn)練對(duì)非癡呆型血管性認(rèn)知障礙患者認(rèn)知功能及P300的影響林延敏林延敏指導(dǎo)教師朱其秀教授學(xué)科專業(yè)名稱康復(fù)醫(yī)學(xué)與理療學(xué)論文答辯日期2015525關(guān)電位P300關(guān)電位P300ABSTRACTOBJECTIVEDISCUSSTHEEFFECTOFCOMPUTERAIDEDCOGNITIVETRAININGONCOGNITIVEFUNCTIONINPATIENTSWITHVULARCOGNITIVEIMPAIRMENTNODEMENTIAVCINDAUDITYEVENTRELATEDPOTENTIALP300METHODS60PATIENTSWITHVULARCOGNITIVEIMPAIRMENTNODEMENTIAWEREROMLYDIVIDEDINTOTWOGROUPSTRAININGGROUPCONTROLGROUPEACHGROUPHAVE30PATIENTSTWOGROUPSWEREGIVENROUTINEDRUGTREATMENTTHETRADITIONALREHABILITATIONTRAININGATTHESAMETIMETHETRAININGGROUPWEREGIVENCOMPUTERAIDEDCOGNITIVETRAINING40MINTIME1DAY6WEEK4WEEKSOFTREATMENTRESPECTIVELYBEFEAFTERFOURWEEKSOFTREATMENTUSEINGMINIMENTALSTATEEXAMINATIONMMSE、THEMONTREALCOGNITIVEASSESSMENTMOCA、BARTHELINDEXBI、MOTEVOKEDPOTENTIALINSTRUMENTASSESSEDTHECOGNITIVEFUNCTIONOFTHETWOGROUPS、THEABILITYOFDAILYLIFE（ADL）、P300RESULTSBEFETREATMENTTHECOMPARISONOFMOCA、MMSEBISCESOFTWOGROUPSWERENOSTATISTICALLYSIGNIFICANTDIFFERENCEP＞005）COMPAREDWITHBEFETREATMENT，THETOTALMOCASCES、VISUALSPACEEXECUTIVEFUNCTION、ATTENTION、LANGUAGE、DELAYEDMEMY、MMSEBARTHELINDEXSCESOFTWOGROUPSWEREINCREASEDAFTERTREATMENT（P＜005）AFTERTREATMENTCOMPAREDWITHCONTROLGROUPTHETOTALMOCASCES、VISUALSPACEEXECUTIVEFUNCTION、ATTENTION、LANGUAGE、DELAYEDMEMY、MMSEBISCESOFTHETRAININGGROUPWEREIMPROVEDOBVIOUSLY（P＜005）BEFETREATMENTTHECOMPARISONOFP300LATENCYAMPLITUDEOFTWOGROUPSWERENOSTATISTICALLYSIGNIFICANTDIFFERENCEP＞005）COMPAREDWITHBEFETREATMENT，P300LATENCYOFTWOGROUPSWASSHTENOBVIOUSLY（P＜005）AMPLITUDEWASHEIGHTEN（P＜005）AFTERTREATMENTCOMPAREDWITHCONTROLGROUPP300LATENCYOFTHETRAININGGROUPWASSHTENAMPLITUDEWASHEIGHTENDIFFERENCEARESTATISTICALLY（P＜005）CONCLUSIONCOMPUTERAIDEDCOGNITIVETRAININGCANEFFECTIVELYIMPROVETHECOGNITIVEFUNCTIONOFPATIENTSWITHVCINDIMPROVINGDAILYLIFEABILITYOFPATIENTSPOSTGRADUATEYANMINLINREHABILITATIONMEDICINEDIRECTEDBYPROFQIXIUZHUKEYWDSCOMPUTERAIDEDCOGNITIVETRAINING；VULARCOGNITIVEIMPAIRMENTNODEMENTIA；MOCA；AUDITYEVENTRELATEPOTENTIAL，P300

簡(jiǎn)介：在目前的學(xué)校教育中，如何提高學(xué)生的學(xué)習(xí)能力，以及促進(jìn)其認(rèn)知能力發(fā)展已經(jīng)成為了一個(gè)亟待解決的問題。認(rèn)知靈活性不僅是一種重要的認(rèn)知能力，而且也是重要的學(xué)習(xí)能力之一。認(rèn)知靈活性理論認(rèn)為認(rèn)知靈活性是指學(xué)習(xí)者通過多種方式建構(gòu)自己的知識(shí)，以便在情景發(fā)生根本變化的時(shí)候能夠做出適宜的反應(yīng)。認(rèn)知靈活性應(yīng)用于學(xué)校教育中將有助于學(xué)生舉一反三，活學(xué)活用，提高學(xué)生的學(xué)習(xí)效率。本研究分為二個(gè)部分，第一部分采用EPRIME編制實(shí)驗(yàn)程序，在情緒圖片喚起的不同情緒狀態(tài)下，探討不同數(shù)學(xué)成績(jī)類型小學(xué)生在積極、中性和消極情緒狀態(tài)下的認(rèn)知靈活性特點(diǎn)，以及數(shù)學(xué)成績(jī)類型和情緒狀態(tài)是否存在交互作用。第二部分為認(rèn)知靈活性的促進(jìn)研究，通過傳授實(shí)驗(yàn)組被試學(xué)習(xí)策略，檢驗(yàn)學(xué)習(xí)策略對(duì)提高認(rèn)知靈活性能力的有效性。研究結(jié)果表明1不同情緒狀態(tài)下的任務(wù)轉(zhuǎn)換的反應(yīng)時(shí)和錯(cuò)誤率都存在顯著差異，積極情緒狀態(tài)下學(xué)生的認(rèn)知靈活性顯著高于消極情緒狀態(tài)下，積極情緒對(duì)認(rèn)知靈活性有促進(jìn)作用；不同數(shù)學(xué)成績(jī)學(xué)生在任務(wù)轉(zhuǎn)換的反應(yīng)時(shí)和錯(cuò)誤率上都存在差異，數(shù)學(xué)成績(jī)好的學(xué)生認(rèn)知靈活性要顯著高于數(shù)學(xué)成績(jī)差的學(xué)生。2數(shù)學(xué)成績(jī)和情緒在任務(wù)轉(zhuǎn)換的錯(cuò)誤率上有交互作用，對(duì)交互作用的簡(jiǎn)單效應(yīng)檢驗(yàn)表明不同情緒在數(shù)學(xué)成績(jī)類型為A的學(xué)生間差異顯著，不同情緒在數(shù)學(xué)成績(jī)類型為C的學(xué)生間差異極其顯著，數(shù)學(xué)成績(jī)類型在積極情緒下不顯著，但是在消極情緒狀態(tài)下顯著，也就是在消極情緒狀態(tài)下數(shù)學(xué)成績(jī)類型為C學(xué)生的認(rèn)知靈活性顯著低于數(shù)學(xué)成績(jī)類型為A的學(xué)生。3實(shí)驗(yàn)組學(xué)習(xí)策略使用人數(shù)前測(cè)和后測(cè)差異極其顯著，后測(cè)中各種策略使用的人數(shù)有明顯的增加，表明策略的干預(yù)是有效的。4實(shí)驗(yàn)組和控制組的認(rèn)知靈活性前測(cè)差異不顯著，后測(cè)差異極其顯著，后測(cè)中實(shí)驗(yàn)組任務(wù)轉(zhuǎn)換反應(yīng)時(shí)顯著低于控制組，實(shí)驗(yàn)組認(rèn)知靈活性前測(cè)和后測(cè)差異顯著，后測(cè)中任務(wù)轉(zhuǎn)換反應(yīng)時(shí)顯著低于前測(cè)，表明經(jīng)過實(shí)驗(yàn)干預(yù)后，實(shí)驗(yàn)組被試認(rèn)知靈活性能力有顯著提高。

簡(jiǎn)介：目的人巨細(xì)胞病毒HCMV是人皰疹病毒科屬DNA病毒，在發(fā)達(dá)國家感染率可達(dá)30～70％。在正常人體內(nèi)通常呈潛伏感染，而在免疫功能低下時(shí)則可能出現(xiàn)HCMV活躍復(fù)制，進(jìn)而發(fā)展為HCMV疾病如間質(zhì)性肺炎、腸炎、視網(wǎng)膜炎等，是異基因造血干細(xì)胞移植ALLOHSCT患者發(fā)病和死亡的重要原因。目前的常規(guī)預(yù)防方案是預(yù)防性治療UNIVERSALPROPHYLAXIS，即對(duì)移植前HCMV血清學(xué)陽性的所有患者都進(jìn)行抗病毒治療，這能夠有效減少HCMV疾病的發(fā)生，但長(zhǎng)期用藥可造成骨髓抑制，并且增加治療費(fèi)用。搶先治療PREEMPTIVETHERAPY是指對(duì)發(fā)現(xiàn)有活動(dòng)性HCMV感染的患者在HCMV疾病出現(xiàn)之前開始的抗病毒治療，可以避免不必要的治療，減輕抗病毒藥物的副作用，降低費(fèi)用。這需要依賴快速、敏感、可靠的活動(dòng)性HCMV感染的監(jiān)測(cè)手段。本研究采用熒光定量PCR法FQPCR監(jiān)測(cè)ALLOHSCT患者HCMVDNA拷貝數(shù)，了解ALLOHSCT患者移植后HCMV感染狀況，并根據(jù)HCMVDNA拷貝數(shù)判斷患者是否存在HCMV的活躍復(fù)制，從而決定是否需要搶先治療。探討搶先治療和預(yù)防性治療相比較的優(yōu)越性，同時(shí)比較血漿熒光定量PCR和白細(xì)胞熒光定量PCR檢測(cè)有無差別。方法2004年9月～2006年4月在華西醫(yī)院血液科層流病房住院行異基因造血干細(xì)胞移植的23例患者，移植前采用FQPCR法和血清學(xué)法同時(shí)進(jìn)行血漿HCMVDNA、白細(xì)胞HCMVDNA、血清HCMVIGG和HCMVIGM檢測(cè)。移植后兩周開始采用血漿和白細(xì)胞FQPCR法對(duì)患者進(jìn)行定點(diǎn)連續(xù)監(jiān)測(cè)，每?jī)芍懿裳淮?，至移植后半年。如患者血漿HCMVDNA10拷貝ML則開始搶先治療，方案為更昔洛韋5MGKG，Q12H，至HCMVDNA拷貝ML。并采用配對(duì)X法對(duì)血漿和白細(xì)胞FQPCR檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。結(jié)果23例ALLOHSCT患者移植前22例血清學(xué)HCMVIGG陽性，1例HCNVIGM陽性，血漿和白細(xì)胞FQPCR均為陰性。移植后14例患者出現(xiàn)血漿FQPCR陽性，16例出現(xiàn)白細(xì)胞FQPCR陽性，13例血漿和白細(xì)胞FQPCR均陽性。14例血漿FQPCR陽性患者中11例接受了搶先治療，2例發(fā)生HCMV疾病間質(zhì)性肺炎，9例血漿FQPCR陰性患者均未發(fā)生HCMV疾病。結(jié)論本研究提示HCMY活躍感染是ALLOHSCT患者移植后常見并發(fā)癥，容易出現(xiàn)的時(shí)間是移植后30～60天；熒光定量PCR是早期檢測(cè)ALLOHSCT患者HCMV活躍感染的有效方法，根據(jù)HCMVDNA拷貝數(shù)而開始的搶先治療與傳統(tǒng)的預(yù)防性治療相比，HCMV疾病的發(fā)病率無差異，減少了常規(guī)預(yù)防性應(yīng)用抗病毒藥物的副作用，避免了不必要的治療，降低了治療費(fèi)用。和血漿FQPCR相比，白細(xì)胞FQPCR的檢出率更高，但血漿FQPCR檢測(cè)更簡(jiǎn)便、易行。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多去勢(shì)對(duì)運(yùn)動(dòng)改善大鼠認(rèn)知功能的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)密級(jí)國際十進(jìn)分類號(hào)（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病小鼠腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的誘發(fā)轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病小鼠腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的誘發(fā)因素及其與因素及其與認(rèn)知認(rèn)知功能障礙關(guān)系的研究功能障礙關(guān)系的研究（題名和副題名）毛妮（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名苗建亭教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)名稱神經(jīng)病學(xué)論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時(shí)間2009年08月至2011年03月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要3英文摘要6前言10文獻(xiàn)回顧11一、AΒ在AD發(fā)生和發(fā)展中的作用11二、炎癥反應(yīng)與AD13三、AD認(rèn)知功能障礙的發(fā)生機(jī)制16四、轉(zhuǎn)基因AD小鼠模型的特點(diǎn)及應(yīng)用18正文19轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病小鼠腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的誘發(fā)因素及其與認(rèn)知功能障礙關(guān)系的研究191材料192實(shí)驗(yàn)方法203結(jié)果234討論30小結(jié)34參考文獻(xiàn)35個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果44致謝45

簡(jiǎn)介：第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文改善不同程度頸動(dòng)脈狹窄導(dǎo)致的認(rèn)知功能障礙的實(shí)驗(yàn)研究姓名段煒申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師陳康寧20060501第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文縮寫詞CEACASVCINE5HTDACALDGAIUVDERPACHCHATNBMACHEIRCMRGLCRCBFSMS英文縮寫一覽表英文名稱CAROTIDENDARTERECTOMYCAROTIDARTERYSTENTINGVASCULARCOGNITIVEIMPAIRMENTNOREPINEPHRINE5HYDROXYTRYPTAMINEDOPAMINECOMUAMMONIS1REGIONDENTATEGYRUSAUTOREGULATORYINDEXVASCULARDEMENTIAEVENTRELATEDPOTENTIALSACETYLCHOLINECHOLINEACETYLTRANSFERASENUCLEUSBASALISOFMEYNERTACETYLCHOLINESTERASEINHIBITORSREGIONALCEREBRALMETABOLICRATESFORGLUCOSEREGIONALCEREBRALBLOODFLOWSECONDMILLISECOND，中文名稱頸動(dòng)脈內(nèi)膜剝離術(shù)頸動(dòng)脈血管成形術(shù)血管性認(rèn)知功能障礙去甲腎上腺素5羥色胺多巴胺海馬角L區(qū)齒狀回自動(dòng)調(diào)節(jié)指數(shù)血管性癡呆事件相關(guān)電位乙酰膽堿膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶邁內(nèi)特基底核膽堿酯酶抑制劑局部葡萄糖代謝率局部腦血流量秒毫秒

簡(jiǎn)介：乙型肝炎病毒HBV感染是引起急性肝炎及慢性肝病的主要原因，其長(zhǎng)期慢性感染還與肝硬化、肝細(xì)胞癌的發(fā)生密切相關(guān)。在全世界，約有35億的慢性HBV感染者，而我國就約有12億，每年與乙型肝炎相關(guān)的死亡人數(shù)達(dá)30萬例左右，占傳染病死亡第一位。HBV作為嗜肝脫氧核糖核酸病毒科中的一員，其復(fù)制為逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制，缺乏校對(duì)功能，并在人體免疫、外界藥物等因素的共同影響下，常易發(fā)生變異。其中，PRECBCP的突變最為突出，并在慢性肝病患者中常見。PREC常見突變熱點(diǎn)有G1896A、G1899A，BCP常見突變位點(diǎn)有A1762T、G1764A、C1766T。這些突變不僅可以導(dǎo)致血清中病毒標(biāo)志物的改變，改變機(jī)體對(duì)感染細(xì)胞的免疫反應(yīng)，還可改變HBV復(fù)制能力，如增加HBV病毒的毒力，導(dǎo)致較嚴(yán)重的肝病活動(dòng)，促進(jìn)慢性肝病向肝硬化及肝癌發(fā)展的進(jìn)程，與暴發(fā)性肝炎、重型肝病及肝癌的發(fā)生密切相關(guān)。因此，如何準(zhǔn)確可靠地診斷相應(yīng)位點(diǎn)的基因突變，是HBV相關(guān)疾病準(zhǔn)確診斷和科學(xué)治療的基礎(chǔ)，亦是預(yù)后最重要的參考依據(jù)，故急需建立其相應(yīng)的準(zhǔn)確可靠的臨床診斷方法。而目前對(duì)于HBVPRECBCP基因突變的檢測(cè)的常用檢測(cè)方法有DNA測(cè)序法、PCRRFLPPCR及限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析法、熒光實(shí)時(shí)PCRLIGHTCYCLER法及基因芯片檢測(cè)技術(shù)。這些方法雖都能較好地檢測(cè)相應(yīng)的突變，但各有其顯著的不足之處，如PCRRFLP，PCRLIGHTCYCLER每次只能檢測(cè)一個(gè)突變位點(diǎn)，不能同時(shí)對(duì)多位點(diǎn)突變進(jìn)行檢測(cè)；DNA測(cè)序法和基因芯片檢測(cè)技術(shù)花費(fèi)昂貴、步驟煩瑣，距臨床檢測(cè)要求都存在著明顯的距離，不能作為常規(guī)臨床檢測(cè)技術(shù)而廣泛應(yīng)用于臨床。故急需尋找新的檢測(cè)方法和技術(shù)，以滿足臨床工作的需要。焦磷酸測(cè)序作為一種新型DNA測(cè)序技術(shù)，可通過檢測(cè)DNA合成過程中所釋放的焦磷酸而獲得待測(cè)核苷酸序列，具有高準(zhǔn)確性、高通量、高自動(dòng)化、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，費(fèi)用低廉，適合臨床批量檢驗(yàn)的特點(diǎn)，有望適用于HBVPRECBCP多位點(diǎn)基因突變的檢測(cè)。但由于該技術(shù)起步較晚，迄今國內(nèi)外尚未見運(yùn)用焦磷酸測(cè)序技術(shù)對(duì)PRECBCP突變位點(diǎn)的檢測(cè)的報(bào)道。為此，我們?cè)谇捌谘芯縔MDD焦磷酸測(cè)序技術(shù)的基礎(chǔ)上，開展此研究，以期探索一種新的自動(dòng)化和高通量檢測(cè)HBVPRECBCP熱點(diǎn)突變的方法。研究目的在我們前期研究YMDD焦磷酸測(cè)序技術(shù)的基礎(chǔ)上，以焦磷酸測(cè)序技術(shù)為平臺(tái)，建立一種檢測(cè)PRECBCP突變熱點(diǎn)的檢測(cè)方法，并驗(yàn)證該方法的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、可靠性及進(jìn)行初步臨床檢測(cè)，以期建立一種高效、高通量、自動(dòng)化、低成本的PRECBCP突變位點(diǎn)的臨床檢測(cè)方法。材料與方法1、材料11參考標(biāo)準(zhǔn)品血清參考標(biāo)準(zhǔn)品1為6份慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA定量均大于110，具有SANGER測(cè)序法檢測(cè)結(jié)果；參考標(biāo)準(zhǔn)品2為12份慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA定量均大于110，具有基因芯片檢測(cè)法的結(jié)果。12PCR擴(kuò)增及電泳相關(guān)材料核酸提取液，PCR擴(kuò)增引物，10MMDNTP，10XPCRBUFFER，瓊脂糖等。13焦磷酸測(cè)序相關(guān)材料70﹪乙醇、2洗滌結(jié)合緩沖液、超級(jí)順磁性磁珠、復(fù)性緩沖液、SQAREAGENTKIT、PSQ96孔板、PSQ96SAMPLEVACUUMPREPTOOL、PSQ96SAMPLEVACUUMPREPWKTABLE、PSQ96MA測(cè)序儀等BIOTAGE公司。14臨床待檢血清標(biāo)本60份慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA定量均大于110，HBEAG陰性。2、方法及觀察項(xiàng)目21焦磷酸測(cè)序片斷的PCR擴(kuò)增方法的建立及其PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)先進(jìn)行梯度PCR擴(kuò)增，并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物是否為本實(shí)驗(yàn)的目標(biāo)擴(kuò)增片段及確定最佳退火溫度后，在此基礎(chǔ)上對(duì)參考標(biāo)準(zhǔn)品及臨床待檢血清標(biāo)本的PRECBCP突變區(qū)進(jìn)行批量化的焦磷酸測(cè)序片斷的擴(kuò)增。22PRECBCP焦磷酸測(cè)序檢測(cè)方法的建立對(duì)參考標(biāo)準(zhǔn)品1的PCR產(chǎn)物的PRECBCP突變區(qū)進(jìn)行焦磷酸測(cè)序。先將參考標(biāo)準(zhǔn)品1的PCR產(chǎn)物磁珠固定，通過PSQ96SAMPLEVACUUMPREPTOOL、WKTABLE及相關(guān)試劑進(jìn)行堿變性，洗滌，將DNA雙鏈轉(zhuǎn)變?yōu)閱捂?，再加入測(cè)序引物與單鏈退火雜交，最后在PSQ96MA測(cè)序儀中進(jìn)行測(cè)序。23焦磷酸測(cè)序法的精確性、可靠性、重復(fù)性的驗(yàn)證231參考標(biāo)準(zhǔn)品的焦磷酸測(cè)序結(jié)果分別與SANGER測(cè)序法、基因芯片檢測(cè)法的結(jié)果進(jìn)行對(duì)照。232參考標(biāo)準(zhǔn)品1的90次重復(fù)焦磷酸測(cè)序結(jié)果進(jìn)行對(duì)照。24臨床待檢血清標(biāo)本的焦磷酸測(cè)序檢測(cè)運(yùn)用焦磷酸測(cè)序技術(shù)，一次性對(duì)60份臨床待檢血清標(biāo)本的PCR產(chǎn)物同時(shí)進(jìn)行PRECBCP多個(gè)突變位點(diǎn)的檢測(cè)。結(jié)果1、焦磷酸測(cè)序片斷的擴(kuò)增方法的建立通過梯度PCR實(shí)驗(yàn)及系列實(shí)驗(yàn)，確定了本研究的最適PCR條件為最佳退火溫度為54℃后，獲得了約260BP的目標(biāo)片斷，并在此基礎(chǔ)上對(duì)參考標(biāo)準(zhǔn)品及臨床待檢血清進(jìn)行批量化的焦磷酸測(cè)序片斷的擴(kuò)增，結(jié)果顯示10滴度水平以上的78例HBV血清標(biāo)本均獲得了有效擴(kuò)增，陽性率達(dá)100﹪。2、PRECBCP焦磷酸測(cè)序檢測(cè)方法的建立首先應(yīng)用焦磷酸測(cè)序?qū)⒖紭?biāo)準(zhǔn)品1的PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，成功建立了PRECBCP焦磷酸測(cè)序檢測(cè)方法，其結(jié)果與SANGER。法測(cè)序結(jié)果的符合率為100﹪，提示焦磷酸測(cè)序技術(shù)是一種高精確性的檢測(cè)技術(shù)。3、參考標(biāo)準(zhǔn)品2的焦磷酸測(cè)序檢測(cè)結(jié)果及相符性分析參考標(biāo)準(zhǔn)品2的焦磷酸測(cè)序結(jié)果與其既往3個(gè)月內(nèi)的基因芯片檢測(cè)結(jié)果的符合率達(dá)1112，僅有1例不符合，不排除該例存在繼發(fā)突變可能。由此可見，焦磷酸測(cè)序技術(shù)是一種可與基因芯片檢測(cè)技術(shù)相媲美的，準(zhǔn)確率高的臨床檢測(cè)方法。4、焦磷酸測(cè)序技術(shù)的可靠性、重復(fù)性驗(yàn)證本實(shí)驗(yàn)對(duì)參考標(biāo)準(zhǔn)品1進(jìn)行90次重復(fù)焦磷酸測(cè)序，其測(cè)序結(jié)果符合率為100﹪，表明了焦磷酸測(cè)序技術(shù)是一種檢出率高，重復(fù)性好的可靠的檢測(cè)技術(shù)。5、臨床待檢血清標(biāo)本的焦磷酸測(cè)序檢測(cè)在前述研究的基礎(chǔ)上，我們一次性對(duì)60份標(biāo)本的多位點(diǎn)突變進(jìn)行測(cè)序檢測(cè)，結(jié)果顯示共檢出60例，26例有位點(diǎn)突變，其中一例還發(fā)現(xiàn)了T1758C突變。結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)建立的基于焦磷酸測(cè)序技術(shù)的PRECBCP突變檢測(cè)技術(shù)，在臨床標(biāo)本檢測(cè)中，亦達(dá)到了高通量、多位點(diǎn)及自動(dòng)化的檢測(cè)目的，有望成為一種新的臨床檢測(cè)方法。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)針對(duì)臨床急需的PRECBCP基因突變的檢測(cè)所建立的焦磷酸測(cè)序技術(shù)是一種準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好、可靠性強(qiáng)、可一次性檢測(cè)HBVPRECBCP多位點(diǎn)突變的高通量的檢測(cè)方法，其高度自動(dòng)化、低成本、可多位點(diǎn)和批量化檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)，使之有望成為一種極好的的臨床檢測(cè)技術(shù)。

簡(jiǎn)介：廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范試行。另外，該學(xué)位論文為課題組的研究成果，獲得課題組經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在實(shí)驗(yàn)室完成。請(qǐng)?jiān)谝陨侠ㄌ?hào)內(nèi)填寫課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。聲明人簽名7B摘要宮頸癌是全世界繼乳腺癌之后的女性第二大癌癥，據(jù)WHO／ICO2010年統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，全球234億女性處于被高危型的HPV感染的威脅中，每年約有53萬女性被確診為宮頸癌，約有27萬人死亡。而人乳頭瘤病毒HUMANPAPIUOMAVIMS，HPV的持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸癌的主要病因。HPV病毒顆粒的衣殼由主要衣殼蛋白LL和次要衣殼蛋白L2組成。LL能夠單獨(dú)組裝成外觀形態(tài)和表位均與天然病毒相似的病毒樣顆粒VIRUSLIKEPARTICLES，VLPS，能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的中和抗體。L2在病毒感染初期的免疫逃逸、入侵宿主細(xì)胞、病毒DNA的核定位及病毒顆粒的高效組裝等過程中均具有重要作用。隨著研究的深入，人們逐漸對(duì)HPV的入胞和致癌機(jī)制等均有一定的認(rèn)識(shí)，但天然HPV顆粒的組裝機(jī)制及其成熟釋放的過程尚未清楚。因此，研究HPV的衣殼組裝和感染機(jī)制對(duì)有效預(yù)防和治療宮頸癌具有重要指導(dǎo)意義。本研究初步建立了兩類大腸桿菌HPVL6L1L2共表達(dá)系統(tǒng)一類是雙質(zhì)粒表達(dá)系統(tǒng)在雙重抗生素選擇壓力下，使得2種質(zhì)粒共存于大腸桿菌中穩(wěn)定表達(dá)；另一類是多順反子表達(dá)系統(tǒng)在同一載體上表達(dá)L1和L2基因。其又劃分為單啟動(dòng)子和雙啟動(dòng)子表達(dá)系統(tǒng)。這幾種共表達(dá)系統(tǒng)均能同時(shí)可溶性的表達(dá)L1和L2，其中多順反子表達(dá)產(chǎn)生的包涵體較少，推測(cè)LL和L2的相互作用有利于它們構(gòu)象的正確折疊，因此該方法可能更有利于研究L1和L2相互作用。在前期研究中，我們構(gòu)建了L1、L2和GFP共轉(zhuǎn)染制備HPV假病毒的檢測(cè)系統(tǒng)，并發(fā)現(xiàn)L1無法單獨(dú)有效的包裹報(bào)告基因形成能感染細(xì)胞的假病毒，需要L2的參與輔助。利用該結(jié)果，本研究通過分析HPVL6L1五聚體的結(jié)構(gòu)，獲得23個(gè)可能與L2相互作用的氨基酸位點(diǎn)。分別構(gòu)建了這23個(gè)位點(diǎn)單獨(dú)突變的L1基因的表達(dá)質(zhì)粒，在真核293FT細(xì)胞中制備了能夠包裹報(bào)告基因的L1／L2假病毒。利用蛋白質(zhì)免疫印跡法和LL雙抗夾心定量系統(tǒng)監(jiān)控突變假病毒的生產(chǎn)情況；通過對(duì)突變假病毒感染能力的測(cè)定發(fā)現(xiàn)PHC256、AR9315、GLN317和THR340位點(diǎn)突變會(huì)導(dǎo)致假病毒的感染能力顯著降低。同時(shí)利用免疫共沉淀的方法正反面證明了該四個(gè)位點(diǎn)是L1與L2相互作用的關(guān)鍵位點(diǎn)進(jìn)一步的，本研究在原核表達(dá)系統(tǒng)上驗(yàn)證PHD56、AR9315、GLN317和TLLR340四個(gè)位點(diǎn)單點(diǎn)突變對(duì)L1VLPS組裝和表位的影響。在大腸桿菌系統(tǒng)中克隆表達(dá)可

簡(jiǎn)介：研究背景人星狀病毒HUMANASTROVIRUSHASTV首次于1975年由APPLETON和HIGGINS用電鏡檢測(cè)胃腸炎患兒糞便標(biāo)本時(shí)發(fā)現(xiàn)。星狀病毒屬單獨(dú)的星狀病毒科星狀病毒屬無衣殼單股正鏈RNA病毒。病毒顆粒直徑約28NM由于電鏡下病毒顆粒呈星形因此被MADELEY和COSGROVE命名為星狀病毒。病毒基因全長(zhǎng)618KB包含有三個(gè)開放閱讀框架OPENREADINGFRAMESF1A、F1B、F2。F1A、F1B在5端為高度保守區(qū)域主要編碼蛋白酶及RNA多聚糖；F2在3端基因長(zhǎng)度為2388KB為多變區(qū)該區(qū)域主要編碼衣殼蛋白；此外基因組還包括一個(gè)5非編碼區(qū)與一個(gè)3端非編碼區(qū)及一個(gè)約30個(gè)核苷酸的多聚核苷酸尾。HASTV是引起嬰幼兒腹瀉的最主要的病原之一對(duì)志愿者和自然感染者的研究均證實(shí)它與腹瀉密切相關(guān)。世界各地均已有HASTV感染的報(bào)道既可散發(fā)也可以引起暴發(fā)流行亦可引起醫(yī)源性感染。與輪狀病毒相似HASTV感染多發(fā)生在2歲以內(nèi)尤其是1歲以內(nèi)的嬰幼兒。住院腹瀉患兒中HASTV檢出率為25％～90％目前被認(rèn)為是嬰幼兒病毒性胃腸炎的第二位病因僅次于輪狀病毒。此外老年人和免疫缺陷患者也是HASTV感染的高危人群人類免疫缺陷病毒感染者、接受骨髓移植及聯(lián)合免疫缺陷患者發(fā)生該病毒感染均已有報(bào)道。HASTV亦是健康成年人發(fā)生胃腸炎的病因之一。應(yīng)用多克隆抗體和單克隆抗體可將HASTV劃分為8個(gè)血清型。HASTV廣泛分布于世界各地各血清型流行情況因地區(qū)和流行年不同而有所不同其中多以血清型1型為主。HASTV感染具有較明顯的季節(jié)性一般在溫帶地區(qū)的流行季節(jié)為冬季而在熱帶地區(qū)的流行季節(jié)則為雨季。HASTV血清流行病學(xué)的研究顯示5歲兒童抗1型HASTV的IGG抗體陽性率達(dá)90％說明兒童5歲以前對(duì)HASTV已有廣泛的接觸。人們先后從貓、羊、豬等動(dòng)物糞便中及淤泥、湖水中分離出了星狀病毒MIOSSEE報(bào)道曾從甲殼類水生物中分離出該病毒提示星狀病毒有可能像甲型肝炎病毒一樣通過甲殼類水生物傳播。簡(jiǎn)便、快速地檢測(cè)HASTV一直是人們研究的課題。目前檢測(cè)HASTV常用的方法有1電鏡法ELECTRONICMICROSCOPEAPPLETON等于1975年首次用電鏡發(fā)現(xiàn)了HASTV此后十多年時(shí)間里電鏡是檢測(cè)該病毒的主要方法。此方法形象、直觀但僅有10％的星狀病毒具有典型的星形外觀故敏感性較低。若在標(biāo)本中加入熒光標(biāo)記的抗體可提高檢出率稱為免疫電鏡法。當(dāng)病毒滴度低時(shí)免疫電鏡法仍有較高的假陰性且由于價(jià)格昂貴技術(shù)條件要求高不適合大規(guī)模的流行病學(xué)調(diào)查。2細(xì)胞培養(yǎng)CELLCULTURE和病毒分離VIRUSSEPARATE1977年LEE和KURTZ采用人胚腎細(xì)胞成功分離了HASTV。1990年WILLCOCKS等采用傳代細(xì)胞系人類結(jié)腸癌細(xì)胞CACO2直接從腹瀉標(biāo)本中分離出HASTV且HASTV于CACO2細(xì)胞內(nèi)增殖良好這使HASTV的檢測(cè)方法發(fā)生了里程碑的進(jìn)步。人們可利用增殖的病毒制備不同血清型的單克隆抗體這為以后應(yīng)用酶免疫法進(jìn)行大量流行病學(xué)調(diào)查奠定了基礎(chǔ)正因?yàn)槿绱诵菭畈《靖篂a才逐漸為大家所認(rèn)識(shí)和重視。3酶免疫法ENZYMEIMMUNOASSAYEIA及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAYELISAHERRM等在成功制備HASTV單克隆抗體的基礎(chǔ)上建立了EIA和ELISA該法操作更簡(jiǎn)單具有更好的敏感性及特異性并能進(jìn)行分型。但用于檢測(cè)的單克隆抗體在商業(yè)上往往很難獲得且價(jià)格昂貴故作為常規(guī)檢測(cè)方法在目前有較大的困難。4逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RTPCR隨著對(duì)星狀病毒培養(yǎng)、分離及測(cè)序的成功星狀病毒的RTPCR檢測(cè)法也就應(yīng)運(yùn)而生。從1993年開始RTPCR就應(yīng)用于檢測(cè)星狀病毒并與EIA進(jìn)行了對(duì)比發(fā)現(xiàn)RTPCR法比EIA有更高的敏感性及特異性不受難以獲得的血清抗體的限制故目前大多數(shù)星狀病毒的報(bào)道均是用該法進(jìn)行研究。5血清學(xué)檢測(cè)HASTV血清學(xué)檢測(cè)方法包括免疫電鏡IEM、放射免疫法RIA、免疫熒光法IFA、酶免疫法EIA等。血清學(xué)檢測(cè)方法可幫助了解HASTV感染狀況目前認(rèn)為其特異性抗體僅具有部分保護(hù)作用故現(xiàn)在開展得較少。LAMP法利用酶反應(yīng)系統(tǒng)直接擴(kuò)增靶核酸序列能使靶核酸序列呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)增在45～60MIN的時(shí)間里可達(dá)到109～1010數(shù)量級(jí)反應(yīng)過程不需控制溫度的變化在恒溫水浴加熱即可進(jìn)行省去了昂貴的熱循環(huán)儀的費(fèi)用。由于兩對(duì)引物在靶基因上的6個(gè)不同部位完全匹配才能進(jìn)行擴(kuò)增所以LAMP法具有很高的特異性。在DNA合成時(shí)從脫氧核酸三磷酸基質(zhì)DNTP中析出的焦磷酸根離子與反應(yīng)溶液中的鎂離子反應(yīng)產(chǎn)生大量焦磷酸鎂白色沉淀因此可以把渾濁度作為反應(yīng)的指標(biāo)僅用肉眼觀察白色渾濁沉淀就能鑒定擴(kuò)增與否而不需要繁瑣的電泳和紫外觀察。有時(shí)通過肉眼觀察白色沉淀來判斷會(huì)存在一定的誤差日本榮研株式會(huì)社利用LAMP反應(yīng)過程中產(chǎn)生焦磷酸鎂白色沉淀研制出專門用于LAMP檢測(cè)的實(shí)時(shí)濁度儀以實(shí)現(xiàn)對(duì)LAMP擴(kuò)增過程的實(shí)時(shí)監(jiān)控使擴(kuò)增和檢測(cè)同時(shí)完成。此外還可通過添加熒光染料如溴化乙錠EB、SYBRGREENⅠ等進(jìn)行染色來檢測(cè)擴(kuò)增是否發(fā)生。LAMP反應(yīng)的最終擴(kuò)增產(chǎn)物是分子量大小不等的莖環(huán)DNA組成的混合物在2％的瓊脂糖凝膠上電泳呈現(xiàn)的是典型的梯狀條帶。LAMP法由于具有操作簡(jiǎn)便易行、特異性高、結(jié)果判斷簡(jiǎn)單等多方面的優(yōu)點(diǎn)故本法一經(jīng)面世就被應(yīng)用到很多方面包括人類、動(dòng)物和植物致病微生物的檢測(cè)、動(dòng)物胚胎性別的鑒別和轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)等。研究目的建立一種快速檢測(cè)人星狀病毒Ⅰ型的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法。研究方法1標(biāo)本的收集1份HASTV1型和1份札幌病毒GⅡ型陽性糞便標(biāo)本來源于中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所2份諾如病毒GⅡ型、3份輪狀病毒A組陽性糞便標(biāo)本由本實(shí)驗(yàn)室保存80份腹瀉患者糞便標(biāo)本于2006年8月至2007年1月期間收集于江門市婦幼保健醫(yī)院兒科門診以及江門市人民醫(yī)院急診科和腹瀉門診。收集的糞便標(biāo)本用PH72的PBS配制成懸液保存于40℃。2引物設(shè)計(jì)針對(duì)編碼非結(jié)構(gòu)蛋白的基因組保守區(qū)域F1A通過CLUSTALW2在線軟件比對(duì)GENEBANK上已公布的F1A序列確定LAMP目標(biāo)序列輸入在線軟件PRIMEREXPLERV4設(shè)計(jì)出特異的RTLAMP引物其序列53為F3GCATTATCTTCTTGTGCTTCA；B3TCACGGATCTCGAACCTG；FIPCCACCAGCAATTAATACTGCTGTAGGAAGACTCCAACTATGTGAGCBIPGCACGACCACGTCATTGTTTCAATGAAAACAGTTGCCATAC。3RNA的提取用TRIZOL法從收集的糞便標(biāo)本提取RNA并溶于DEPC處理水測(cè)定其230NM、260NM、280NM和310NM的OD值保存于80℃。4RTLAMP條件優(yōu)化、產(chǎn)物的檢測(cè)和酶切鑒定反應(yīng)體系置60℃恒溫反應(yīng)45MIN、60MIN、75MIN、90MIN最后80℃孵育5MIN以滅活酶終止反應(yīng)。產(chǎn)物通過凝膠電泳后溴化乙錠染色紫外線下觀察以及熒光染料SYBRGREENⅠ染色后肉眼觀察。對(duì)RTLAMP產(chǎn)物進(jìn)行切膠、稱重經(jīng)凝膠回收試劑盒純化回收后用限制性內(nèi)切酶TAAI進(jìn)行切割凝膠電泳觀察酶切片段。5RTPCR和RTLAMP檢測(cè)HASTV1型的特異性、敏感性分析51以RTLAMP的外引物F3、B3作為RTPCR的上、下游引物進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增對(duì)其產(chǎn)物進(jìn)行切膠、稱重經(jīng)凝膠回收試劑盒純化回收后與PMD18T載體連接轉(zhuǎn)化至感受態(tài)大腸桿菌DH5Α。通過藍(lán)白斑篩選試驗(yàn)挑出白色菌落接種到含AMP的LB液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)再提取質(zhì)粒DNA作模板用引物F3、B3進(jìn)行PCR擴(kuò)增來鑒定篩選正確的克隆。測(cè)定質(zhì)粒溶液230NM、260NM、280NM和310NM的OD值將濃度為23X108COPIESΜL質(zhì)粒DNA溶液保存于20℃?zhèn)溆谩?21份HASTV1型、1份札幌病毒GⅡ型、2份諾如病毒GⅡ型、3份輪狀病毒A組陽性糞便標(biāo)本作為檢測(cè)對(duì)象提取RNA同時(shí)進(jìn)行RTLAMP和RTPCR檢測(cè)。53HASTV1型陽性標(biāo)本所提取RNA的一系列稀釋度為L(zhǎng)NGΜL100PGΜL10PGΜLLPGΜL100FGΜL10FGΜL分別作模板用RTLAMP和RTPCR檢測(cè)。54質(zhì)粒DNA濃度按10梯度稀釋其濃度為23X107COPIESΜL到23COPIESΜL并作模板用LAMP和PCR檢測(cè)。6檢測(cè)臨床腹瀉患者糞便標(biāo)本80份非細(xì)菌性腹瀉患者糞便標(biāo)本提取RNA后同時(shí)用RTLAMP和RTPCR檢測(cè)。結(jié)論本研究建立的RTLAMP方法檢測(cè)HASTV1型的特異性和敏感性較好且反應(yīng)耗時(shí)較短實(shí)用性強(qiáng)適合于基層實(shí)驗(yàn)室和現(xiàn)場(chǎng)的應(yīng)用。

簡(jiǎn)介：目的在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，在導(dǎo)師以往臨床及實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上，觀察解毒復(fù)肝湯聯(lián)合苦參素序貫給藥對(duì)不同基因型慢性乙型肝炎的血清病毒學(xué)指標(biāo)的影響，并從基因型的分析，探討其作用機(jī)理，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法選取符合納入標(biāo)準(zhǔn)的慢性乙型肝炎患者98例，按照隨機(jī)對(duì)照的原則隨機(jī)分成2組，對(duì)照組32例在苦參素序貫給藥的基礎(chǔ)上加用甘利欣、門冬氨酸鉀鎂注射液，每日1次，應(yīng)用1個(gè)月，改為隔日靜脈滴注，再應(yīng)用7次后停藥。治療組66例在以上治療的基礎(chǔ)上加用解毒復(fù)肝湯。兩組療程均為3個(gè)月。觀察兩組患者之間及治療組中基因B型、C型患者治療前后臨床癥狀、體征，血清肝功能指標(biāo)ALT、AST、TBIL，血清病毒學(xué)標(biāo)志HBSAG、HBEAG和抗HBE及HBVDNA水平的變化，比較兩組之間及治療組中基因B型和C型患者之間的療效。結(jié)果①兩組總體療效比較治療組66例中，顯效22例，有效35例，無效7例，脫落2例，總有效率為8906％。對(duì)照組32例中，顯效6例、有效17例、無效8例，脫落1例，總有效率為7419％。治療組的總體療效與對(duì)照組比較差異有顯著性P005。③兩組臨床癥狀、體征比較治療后兩組患者的主癥、次癥及體征積分值均明顯下降，與治療前相比，差異有顯著性P005。④兩組肝功能指標(biāo)的比較與治療前比較，兩組肝功能均有明顯改善，差異有顯著性P005。⑤兩組在觀察期間均未見不良反應(yīng)。結(jié)論解毒復(fù)肝湯聯(lián)合苦參素序貫給藥對(duì)不同基因型慢性乙型肝炎患者具有良好療效，可明顯改善患者的臨床癥狀、體征，療效確切，其作用機(jī)制可能與解毒復(fù)肝湯恢復(fù)肝臟功能、增強(qiáng)苦參素抗HBV活性等作用有關(guān)，其中對(duì)基因B型患者的療效優(yōu)于C型患者。

簡(jiǎn)介：泰山醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文抗癲癇藥物和促智藥物對(duì)癲癇大鼠認(rèn)知功能的影響及海馬組織中NCAM和ERK2的表達(dá)變化姓名孫冉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師牛敬忠201203卡馬西平奧卡西平致癇組對(duì)照組；致癇組茴拉西坦鹽酸多奈哌齊組對(duì)照組?？臻g探索實(shí)驗(yàn)中大鼠的原平臺(tái)象限游泳時(shí)間百分比從長(zhǎng)到短依次為對(duì)照組致癇組奧卡西平組卡馬西平組；對(duì)照組鹽酸多奈哌齊組茴拉西坦組致癇組。3REALTIMEPCR結(jié)果NCAM的表達(dá)致癇組奧卡西平組卡馬西平組對(duì)照組P茴拉西坦組致癇組對(duì)照組P致癇組奧卡西平組卡馬西平組西005；對(duì)照組鹽酸多奈哌齊組茴拉西坦組致癇組口奧卡西平組卡馬西平組對(duì)照組矽茴拉西坦組致癇組對(duì)照組矽致癇組奧卡西平組卡馬西平組矽鹽酸多奈哌齊組茴拉西坦組致癇組矽005。結(jié)論1氯化鋰匹羅卡品誘導(dǎo)的癲癇模型，是比較經(jīng)典的而且比較理想的研究顳葉癲癇的模型。2卒申經(jīng)元的壞死、膠質(zhì)的增生、突觸可塑性的調(diào)節(jié)、苔蘚纖維出芽等與癲癇發(fā)作密切相關(guān)。3癲癇發(fā)作后可導(dǎo)致不同程度的認(rèn)知功能損害。4MO玎IS水迷宮試驗(yàn)可以較準(zhǔn)確地反映動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)和記憶能力。5卡馬西平和奧卡西平通過抑制NCAM的表達(dá)，來有效地保護(hù)癲癇發(fā)作后引起的腦損傷。6對(duì)照組通過MO玎IS水迷宮試驗(yàn)加強(qiáng)了大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力，因而E砌Q的表達(dá)增多，同時(shí)癲癇發(fā)作后大鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力受損，E砌Q的表達(dá)下降，卡馬西平通過抑制E砌Q的表達(dá)，加重了癲癇大鼠的認(rèn)知功能損害。7新型抗癲癇藥奧卡西平對(duì)癲癇大鼠的認(rèn)知功能幾乎沒有影響。8鹽酸多奈哌齊可明顯改善癲癇大鼠的認(rèn)知功能。關(guān)鍵詞癲癇神經(jīng)細(xì)胞粘附分子；星形膠質(zhì)細(xì)胞；突觸重建

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多高三尖杉酯堿等四種藥物的體外抑制乙肝病毒的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文新型溶瘤腺病毒M1體內(nèi)應(yīng)用的效應(yīng)和安全性研究及靶向性輸送的探索姓名黃曉園申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)婦科腫瘤指導(dǎo)教師馬丁20070501華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文模型鼠的生存時(shí)間；在指定時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物，分離原發(fā)瘤及轉(zhuǎn)移瘤進(jìn)行病毒滴度測(cè)定；采用免疫組化和原位雜交來檢測(cè)病毒的分布和活性復(fù)制；采用WESTERNBLOT檢測(cè)M1的靶點(diǎn)封閉效應(yīng)?！窘Y(jié)果】結(jié)果】在人胃癌裸鼠原位模型上，M1經(jīng)靜脈輸注后不僅分布于胃原發(fā)瘤，而且存在于轉(zhuǎn)移灶；M1在腫瘤細(xì)胞中活性復(fù)制導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞壞死和靶基因PLK1表達(dá)降低；于成瘤早期（2W）靜脈內(nèi)給藥可以延長(zhǎng)荷瘤鼠的生存時(shí)間（P005）。【結(jié)論】【結(jié)論】溶瘤腺病毒M1的靜脈內(nèi)輸注可以發(fā)揮溶瘤和靶向滅活PLK1的雙重效應(yīng)，因此其單獨(dú)應(yīng)用時(shí)能夠在原發(fā)瘤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶有效感染復(fù)制，最終清除腫瘤病灶?！娟P(guān)鍵詞】【關(guān)鍵詞】溶瘤腺病毒；靜脈輸注；分布；動(dòng)力學(xué)第三部分第三部分人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)及條件復(fù)制性腺病毒人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)及條件復(fù)制性腺病毒對(duì)此細(xì)胞的作用研究對(duì)此細(xì)胞的作用研究【目的】【目的】本研究于體外分離培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，并以此為模型，探討條件復(fù)制性腺病毒對(duì)增生期和靜止期的血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)影響。【方法】【方法】臍靜脈內(nèi)灌注消化液分離內(nèi)皮細(xì)胞，所獲內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)，經(jīng)免疫熒光染色及掃描電鏡檢查，鑒定所獲內(nèi)皮細(xì)胞及其純度；細(xì)胞病變實(shí)驗(yàn)CPE檢測(cè)條件復(fù)制性腺病毒ADV5/DE1AASCHK1的細(xì)胞裂解效應(yīng)；四甲基偶氮唑鹽MTT法檢測(cè)不同滴度腺病毒對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用；流式細(xì)胞儀分析腺病毒單用或聯(lián)合放射線的細(xì)胞凋亡。【結(jié)果】結(jié)果】血管內(nèi)灌注消化液法可獲取高純度的內(nèi)皮細(xì)胞；血管內(nèi)皮細(xì)胞與宮頸癌細(xì)胞HELA相比，對(duì)條件復(fù)制性腺病毒ADV5/DE1AASCHK1較耐受，500MOI的病毒滴度感染靜止態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞未出現(xiàn)明顯的裂解效應(yīng)；ADV5/DE1AASCHK1對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)隨病毒滴度的增加而增強(qiáng)，100MOI的病毒作用96小時(shí)，增殖態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)受抑（220±25）％，而靜止態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞為（130±23）％；ADV5/DE1AASCHK1轉(zhuǎn)染聯(lián)合放射線處理下，增殖態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡細(xì)胞達(dá)357％±30％較靜止態(tài)231％±25％更為敏感。4

簡(jiǎn)介：該研究分三個(gè)部分一、HBV基因YMDD基序直接測(cè)序法的建立及其臨床應(yīng)用目的提高乙型肝炎病毒（HBV）DNAP基因區(qū)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)的陽性率探討HBVYMDD基序變異的臨床意義結(jié)論應(yīng)綜合采用多種方法以提高基因高突變區(qū)PCR檢測(cè)陽性率患者在使用拉米夫定前無HBVYMDD基序變異患者使用拉米夫定過程中可發(fā)生YMDD變異并可引起肝功能惡化和IBVDNA水平反跳二、一種新的基于PRESS區(qū)的乙型肝炎病毒限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性基因型分型方法的建立和應(yīng)用目的建立一種新的乙型肝炎病毒基因型分型方法結(jié)論這一新的病毒基因型分型方法操作簡(jiǎn)便結(jié)果可靠費(fèi)用低廉適用于基層單位開展和大范圍的流行病學(xué)調(diào)查上海地區(qū)的慢性乙型肝炎患者中以C基因型感染最為常見三、膦甲酸鈉治療慢性乙型肝炎47例臨床療效觀察目的觀察膦甲酸鈉治療慢性乙型肝炎的療效及毒副反應(yīng)并觀察膦甲酸鈉對(duì)不同基因型慢性乙肝患者的療效結(jié)論膦甲酸鈉能快速抑制乙肝病毒復(fù)制、降低病毒量并能調(diào)節(jié)患者細(xì)胞免疫功能可以改善肝功能阻斷肝炎發(fā)病進(jìn)程可作為序貫抗乙肝病毒療法的首程用藥并可應(yīng)用于重型或重度慢性乙肝的治療膦甲酸鈉對(duì)HBVYMDD變異株有治療作用對(duì)不同基因型慢性乙肝患者也有治療作用尤以B型作用明顯但因病例數(shù)少無法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行臨床試驗(yàn)

簡(jiǎn)介：第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文AD5F35APE1SIRNA重組腺病毒聯(lián)合光動(dòng)力療法對(duì)非小細(xì)胞肺癌治療作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名張?jiān)漆陨暾?qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)外科學(xué)（胸心外）指導(dǎo)教師范士志20080501第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文AD5／F35一APELSIRNA重組腺病毒對(duì)A549細(xì)胞AP內(nèi)切酶活性的抑制作用；通過MTT來檢測(cè)PDT及AD5／F35一APELSIRNA重組腺病毒聯(lián)合PDT對(duì)A549細(xì)胞增殖抑制作用；流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞凋亡；彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DNA損傷；WESTERNBLOT檢測(cè)APEL蛋白及VEGF蛋白的表達(dá)。3AD5／F35一APELSIRNA重組腺病毒聯(lián)合PDT對(duì)A549細(xì)胞裸鼠移植瘤抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究建立肺腺癌A549細(xì)胞裸鼠移植瘤動(dòng)物模型，觀察AD5／F35一APELSIRNA重組腺病毒聯(lián)合PDT對(duì)肺癌生長(zhǎng)抑制的協(xié)同作用，TUNEL法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞細(xì)胞凋亡。研究結(jié)果1APEL在NSCLC組織表達(dá)及其臨床意義正常肺組織及NSCLC組織均有APEL表達(dá)，但其表達(dá)的定位有所區(qū)別，正常肺組織以胞核表達(dá)為主，NSCLC組織以胞漿表達(dá)為主，兩者之間差異性顯著PO01；通過KAPLANMEIER生存分析提示APEL高低表達(dá)組之間生存時(shí)間有顯著性差異，APEL低表達(dá)組中位生存時(shí)間為35_5196個(gè)月，APEL高表達(dá)組中位生存期為26_0761個(gè)月。2AD5／F35APELSIRNA重組腺病毒對(duì)A549細(xì)胞生物效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究10MOI的AD5／F35APELSIRNA腺病毒對(duì)A549細(xì)胞的感染效率可達(dá)98％；AD5／F35APELSIRNA呈劑量依賴性地抑制A549細(xì)胞APEL蛋白表達(dá)，且能顯著抑制A549細(xì)胞的AP內(nèi)切酶活性。3AD5／F35APELSIRNA重組腺病毒增強(qiáng)A549細(xì)胞PDT治療敏感性及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究AD5／F35一APELSIRNA聯(lián)合PDT能顯著增強(qiáng)A549細(xì)胞的增殖抑制作用；AD5／F35APELSIRNA增加PDT誘導(dǎo)的A549細(xì)胞凋亡；堿性彗星分析結(jié)果顯示AD5／F35APELSIRNA抑制PDT后A549癌細(xì)胞DNA修復(fù)能力；PDT可誘導(dǎo)A549細(xì)胞APEL及VEGF蛋白表達(dá)增強(qiáng)，但通過AD5／F35。APELSIRNA可抑制A549細(xì)胞PDT誘導(dǎo)的APEL及VEGF蛋白的表達(dá)。4AD5／F35一APELSIRNA重組腺病毒聯(lián)合PDT對(duì)A549細(xì)胞裸鼠移植瘤抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示AD5／F35一APELSIRNAPDT組腫瘤生長(zhǎng)較單純PDT組明顯被抑制，單純AD5／F35一APELSIRNA組腫瘤抑制率為3485％，單純PDT組腫瘤抑制率為5219％，AD5／F35一APELSIRNAPDT組腫瘤抑制率為9397％。TUNEL檢測(cè)腫瘤細(xì)胞凋亡情況，顯示AD5／F35一APELSIRNAPDT組腫瘤細(xì)胞凋亡率為2468_247％，顯著高于AD5／F35APELSIRNA感染組624_132％、單獨(dú)PDT組1212_176％以及對(duì)照組337_128％PO01。8