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簡介：點(diǎn)擊查看更多上海地區(qū)兒童病毒性腹瀉分子流行病學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的慢性心力衰竭是各種心臟疾病的嚴(yán)重階段，其發(fā)病率高，5年生存率與腫瘤相仿。研究表明認(rèn)知功能障礙是心衰患者死亡率的影響因素。認(rèn)知功能障礙導(dǎo)致住院心衰患者在院及出院后1年死亡率增加大約5倍49，95％CI29TO83，出院后5年全因死亡率增加約2倍219，95％CI141TO339。伴有認(rèn)知功能障礙的心衰患者出現(xiàn)語言表達(dá)障礙、即刻記憶受損、回憶缺失、反應(yīng)速度緩慢、執(zhí)行能力下降，直接導(dǎo)致患者服藥、限鹽飲食依從性降低，自理能力受損，最終使心衰患者死亡率增加。因此，對于心衰患者認(rèn)知功能的研究意義重大。本課題通過收集慢性心力衰竭患者的相關(guān)臨床資料并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，探討影響慢性心力衰竭患者認(rèn)知功能的因素；以期進(jìn)一步改善慢性心力衰竭患者認(rèn)知功能，提高心衰患者預(yù)后。方法對222例紐約心衰分級NEWYKHEARTASSOCIATIONFUNCTIONALCLASSIFICATION，NYHA分級ⅡⅣ級的住院慢性心衰CHRONICHEARTFAILURE，CHF患者使用簡易智能量表MINIMENTALSTATEEXAMINATION，MMSE評估認(rèn)知功能。收集可能影響認(rèn)知功能的臨床資料。結(jié)果44例CHF患者M(jìn)MSE評分結(jié)論慢性心衰患者認(rèn)知功能的影響因素包括年齡、NYHA分級、左室射血分?jǐn)?shù)、受教育年限、糖尿病病史。年齡、NYHA分級與認(rèn)知功能評分負(fù)相關(guān)，左室射血分?jǐn)?shù)、受教育年限與認(rèn)知功能評分正相關(guān)。其中，年齡、左心室射血分?jǐn)?shù)、受教育水平、糖尿病病史是慢性心衰患者認(rèn)知功能獨(dú)立影響因素。

簡介：華中師范大學(xué)碩士學(xué)位論文人乳頭瘤病毒18型基因工程預(yù)防性疫苗研究姓名謝飛申請學(xué)位級別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師楊紅劉紅巖20070501⑥MASTERSTHE8培的病毒樣顆粒。篩選出畢赤酵母高表達(dá)株后，進(jìn)行了5L發(fā)酵罐的發(fā)酵工藝，菌體破碎工藝和純化工藝摸索。實(shí)驗(yàn)中構(gòu)建的畢赤酵母表達(dá)菌株，可經(jīng)甲醇誘導(dǎo)表達(dá)HPVL8L1晚期蛋白，表達(dá)的L1能在細(xì)胞內(nèi)自主組裝成病毒樣顆粒，而且能在廉價(jià)的培養(yǎng)基上快速生長至Q高細(xì)胞密度，有利于在工業(yè)上進(jìn)行高密度發(fā)酵。本研究為HPVL8基因工程疫苗的后續(xù)研發(fā)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞人乳頭瘤病毒18L1；畢赤酵母發(fā)酵；抗血清N

簡介：分類號R373密級不保密UDC610學(xué)校代碼11065碩士學(xué)位論文EBEB病毒對病毒對WIF1WIF1基因甲基化和表達(dá)影響的研究基因甲基化和表達(dá)影響的研究趙真真趙真真指導(dǎo)教師羅兵教授學(xué)科專業(yè)名稱病原生物學(xué)論文答辯日期2015年6月2日EB病毒對病毒對WIF1基因甲基化和表達(dá)影響的研究基因甲基化和表達(dá)影響的研究中文摘要EB病毒EPSTEINBARRVIRUSEBV為嗜淋巴細(xì)胞病毒屬的DNA腫瘤病毒，EBV感染與部分胃癌發(fā)生的關(guān)系已經(jīng)確認(rèn)，EBV相關(guān)胃癌EBVASSOCIATEDGASTRICCARCINOMAEBVAGC約占胃癌總數(shù)的10。EBVAGC發(fā)生的表觀遺傳學(xué)機(jī)制的研究主要涉及EBV感染對抑癌基因啟動子區(qū)甲基化的影響，以及EBV非編碼RNA對宿主基因表達(dá)調(diào)控作用兩個(gè)方面。目的目的明確EBV感染對WNT抑制因子1WNTINHIBITYFACT1WIF1編碼基因啟動子區(qū)甲基化以及EBV編碼MIRNABART193P對WIF1表達(dá)的影響，為進(jìn)一步探討EBV抑制WIF1表達(dá)，進(jìn)而異常激活WNT原癌基因通路參與EBVAGC發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法方法選取2種EBV陽性胃癌細(xì)胞系GT38、GT39和3種EBV陰性胃癌細(xì)胞系HGC27、MKN45、SGC7901作為研究對象，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCRREALTIMEQUANTITATIVEPCRREALTIMEQPCR檢測上述細(xì)胞系WIF1表達(dá)水平，亞硫酸氫鹽基因組測序法BISUFITEGENOMICSEQUENCINGBGS檢測WIF1基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)。并分別采用5AZACDR、BART193P模擬物以及抑制物作用EBV陽性胃癌細(xì)胞系GT38和EBV陰性胃癌細(xì)胞系HGC27，檢測藥物作用前后2種細(xì)胞系WIF1和ΒCATENTIN表達(dá)水平的變化以及細(xì)胞增殖情況。結(jié)果結(jié)果①BGS檢測結(jié)果結(jié)果顯示，5種胃癌細(xì)胞系WIF1啟動子區(qū)均呈高甲基化狀態(tài)，甲基化率均在85以上。②REALTIMEQPCR結(jié)果顯示，胃癌細(xì)胞系中WIF1表達(dá)普遍下調(diào)，以EBV陽性細(xì)胞系GT38和GT39下降更為明顯；5AZACDR作用后GT38和HGC27兩種細(xì)胞系WIF1表達(dá)均上調(diào)，其中HGC27上調(diào)更為顯著；同時(shí)，WESTERNBLOT顯示兩種細(xì)胞系ΒCATENIN水平均下調(diào)。③EBV陰性細(xì)胞系HGC27轉(zhuǎn)染外源性BART193P模擬物后，WIF1表達(dá)進(jìn)一步下調(diào)，ΒCATENIN水平升高，細(xì)胞增殖率增加。④EBV陽性細(xì)胞GT38轉(zhuǎn)染外源性BART193P抑制物后，WIF1表達(dá)水平升高，ΒCATENIN表達(dá)水平下調(diào)，細(xì)胞生長抑制率增加。結(jié)論結(jié)論①EBV陰性和陽性細(xì)胞系中WIF1表達(dá)水平均較低，EBV陽性細(xì)胞系中表達(dá)缺失或下調(diào)情況更為明顯，去甲基化試劑5AZACDR處理可不同程度上調(diào)GT38及HGC27細(xì)胞系WIF1表達(dá)，EBV陰性細(xì)胞系HGC27上調(diào)更為明顯。②外源性BART193P模擬物轉(zhuǎn)染EBV陰性細(xì)胞系HGC27可進(jìn)一步抑制WIF1表達(dá)，抑制ΒCATENIN降解，促進(jìn)其積聚。提示BART193P可拮抗WIF1對WNTΒCATENIN信號通路的抑制作用，進(jìn)而在EBV相關(guān)腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用。③外源性BART193P抑制物轉(zhuǎn)染EBV陽性細(xì)胞系GT38可抑制EBV編碼的BART193P的作

簡介：目的觀察吸入異氟烷對老齡大鼠認(rèn)知功能的近期影響。探討老齡大鼠麻醉后認(rèn)知功能障礙發(fā)生的可能機(jī)制。方法八臂迷宮訓(xùn)練成功的1822月齡雄性WISTAR大鼠24只，隨機(jī)分為2組對照組和麻醉組，每組12只。對照組吸入空氣，麻醉組吸入15％異氟烷2H。吸入異氟烷結(jié)束24小時(shí)后，八臂迷宮測試?yán)淆g大鼠的認(rèn)知功能，測試一周，連續(xù)觀察每天工作記憶錯(cuò)誤WKINGMEMYERR，參考記憶錯(cuò)誤REFERENCEMEMYRR和總錯(cuò)誤TOTALERR。八臂迷宮測試認(rèn)知功能結(jié)束后立即處死老齡大鼠，取出大腦海馬，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測兩組老齡大鼠腦內(nèi)海馬區(qū)域磷酸化的環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白PCREB在海馬表達(dá)的差異。結(jié)果1麻醉過程中相關(guān)指標(biāo)兩組大鼠的鼻唇，趾端膚色保持紅潤，平均動脈血壓和血?dú)夥治鲋笜?biāo)均在正常范圍，呼吸頻率＞50次MIN。自吸入異氟烷開始至翻正反射消失的時(shí)間為23±07MIN，自停用異氟烷至翻正反射恢復(fù)時(shí)間為25±08，兩組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＞0052認(rèn)知功能測試結(jié)果顯示與對照組比較，麻醉組的工作記憶錯(cuò)誤次數(shù)在第3，4，5，6，7天增多，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005；麻醉組的參考記憶錯(cuò)誤次數(shù)在第2，3，4，5，6，7天增多，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005麻醉組的總錯(cuò)誤次數(shù)在第2，3，4，5，6，7天增多，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。3免疫組織化學(xué)觀察結(jié)果免疫組織化學(xué)染色檢測兩組老齡大鼠海馬PCREB蛋白表達(dá)在光鏡下，PCREB陽性表達(dá)呈棕黃色，位于細(xì)胞核內(nèi)。在海馬DG區(qū)、CA1區(qū)和CA3區(qū)的細(xì)胞內(nèi)，對照組老齡大鼠PCREB陽性表達(dá)呈密集的帶狀分布，麻醉組老齡大鼠PCREB陽性表達(dá)明顯減少。結(jié)論吸入15％異氟烷2H可引起老齡大鼠認(rèn)知功能的近期下降，與CREB表達(dá)下降有關(guān)，與CREB有關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可能參與了異氟烷所致老齡大鼠認(rèn)知功能的障礙。

簡介：輪狀病毒是引起小兒腹瀉的主因。全球每年有超過125億嬰幼兒腹瀉是由輪狀病毒引起的并造成超過60萬嬰幼兒的死亡且大部分死亡病例都發(fā)生在不發(fā)達(dá)的亞非國家。針對輪狀病毒的治療目前還沒有特別有效的治療藥物因此預(yù)防輪狀病毒就顯得至關(guān)重要而預(yù)防輪狀病毒最有效的方法就是研制輪狀病毒疫苗因此研制安全、廣譜、高效的輪狀病毒疫苗就成為當(dāng)今各國政府及世界衛(wèi)生組織WHO極為重要的任務(wù)。目前TCID50法是常用的檢測輪狀病毒感染力和輪狀病毒中和抗體的方法但由于TCID50法耗時(shí)長、主觀誤差大、工作量大等原因限制其在大規(guī)模的篩選和試驗(yàn)中應(yīng)用。因此建立一種快速、高效、準(zhǔn)確的輪狀病毒和輪狀病毒中和抗體的檢測方法對輪狀病毒的病毒學(xué)研究和輪狀病毒疫苗的開發(fā)都具有重要的作用和意義。本論文建立了輪狀病毒的分離鑒定和擴(kuò)大培養(yǎng)的方式通過收集和分離培養(yǎng)不同的輪狀病毒為以后的輪狀病毒病毒學(xué)研究做準(zhǔn)備。同時(shí)建立了一種新型的快速、高效輪狀病毒及輪狀病毒中和抗體的檢測法酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法該方法是以酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法和ELISPOT自動化掃描儀為基礎(chǔ)借助針對針對輪狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP6的特異性酶標(biāo)抗體7H11和VP6的特異性反應(yīng)通過TMB顯色反應(yīng)以區(qū)別感染和未感染細(xì)胞來實(shí)現(xiàn)檢測的在本論文中還從可靠性穩(wěn)定性等方面對建立的輪狀病毒酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法進(jìn)行驗(yàn)證通過對比發(fā)現(xiàn)新建立的輪狀病毒酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法不僅具有快速、可靠、準(zhǔn)確等特點(diǎn)而且還和傳統(tǒng)的TCID50檢測法具有很好的相關(guān)性。新建立的輪狀病毒酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法不僅可以用于輪狀病毒中和抗體的檢測還可以用于輪狀病毒感染力的檢測同時(shí)在該論文中我們還以新建立的輪狀病毒酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法建立了輪狀病毒中和抗體的篩選方法同時(shí)還利用該方法對普通人群血清中中和抗體進(jìn)行分析和輪狀病毒中和抗體的篩選。

簡介：答辯委員會主席王鋼教授答辯委員會成員王勤美教授俞阿勇教授徐丹教授周激波教授角膜接觸鏡配戴者的戴鏡行為及認(rèn)知的調(diào)查研究中文摘要目的通過對角膜接觸鏡經(jīng)驗(yàn)配戴者進(jìn)行問卷調(diào)查，了解配戴者的戴鏡行為、護(hù)理習(xí)慣以及對其醫(yī)療屬性的認(rèn)知評估，并對結(jié)果進(jìn)行分析，探討提高配戴者戴鏡的舒適度和安全性的可行性對策。方法在上海、北京、廣州、深圳、成都和杭州6個(gè)城市大型眼鏡店對角膜接觸鏡經(jīng)驗(yàn)配戴者進(jìn)行調(diào)查研究。對受訪者采用調(diào)查問卷方式，調(diào)查問卷有6部分共有28題，包括1配戴者基本資料和戴鏡史；2當(dāng)前戴鏡行為；3日常護(hù)理習(xí)慣；4眼睛檢查和隨訪復(fù)查；5對角膜接觸鏡的認(rèn)知評估；6鏡片驗(yàn)配和影響因素。對相關(guān)調(diào)查數(shù)據(jù)采用X2檢驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)。結(jié)果本調(diào)查研究共收到504份角膜接觸鏡鏡配戴者的有效問卷。1受訪者中女性439名871％，男性65名129％，年齡為19～42歲，平均27873歲；戴鏡經(jīng)驗(yàn)為6個(gè)月～12年，平均為6352年。262％31／504受訪者戴日戴型鏡片過夜，2周和1個(gè)月更換型配戴組比目拋組、36個(gè)月和6個(gè)月組更遵循更換周期，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X21232，5752，4591，PO011。373O％368／504受訪者在操作鏡片前洗手，540％272／504受訪者有揉搓清潔鏡片，381％192／504受訪者使用護(hù)理液沖洗鏡片。4671％338／504受訪者從未主動隨訪復(fù)查，501％207／413和378％68／180受訪者對戴鏡期間出現(xiàn)的不舒適和眼病曾采用不恰當(dāng)?shù)奶幚矸椒ā?171％86／504受訪者知曉角膜接觸鏡為醫(yī)療用品，超過6成受訪者對角膜接觸鏡有不同程度的認(rèn)知錯(cuò)誤。6631％318／504受訪者將接觸鏡的價(jià)格作為選擇鏡片的首要影響因素。結(jié)論

簡介：過氧化氫酶HYDROGENPEROXIDEHYDROGENPEROXIDEOXIDEDUCTASE，EC11116是機(jī)體抗氧化體系的一種關(guān)鍵酶，可高效分解生理和病理?xiàng)l件下生命體產(chǎn)生的過氧化氫，減輕活性氧簇REACTIVEOXIDATIVESPECIES，ROS對組織造成的氧化損傷。本研究結(jié)果表明，過氧化氫酶以及機(jī)體ROS的含量與病毒性疾病的發(fā)展過程密切相關(guān)。病毒入侵導(dǎo)致機(jī)體過氧化氫酶活力的耗竭以及ROS含量的升高，而外源性過氧化氫酶的補(bǔ)充能在一定程度上緩解病毒性疾病的進(jìn)程。本實(shí)驗(yàn)室從人胚胎肝細(xì)胞提取總RNA，通過分子生物學(xué)手段獲取了完整的人源過氧化氫酶基因，并在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了一株重組酵母菌株S4。然而在進(jìn)行表達(dá)時(shí)發(fā)現(xiàn)，該菌株的穩(wěn)定性較差，傳代后重組的人源過氧化氫酶基因出現(xiàn)了丟失和沉默，對人源過氧化氫酶的大量獲取造成了限制。因此，本研究選用PPICZΑA作為穿梭載體，選用GS115作為表達(dá)宿主菌，對重組人源過氧化氫酶酵母菌株進(jìn)行了重新構(gòu)建，并對其遺傳穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，所獲得的重組菌株G13遺傳穩(wěn)定性更強(qiáng)，表達(dá)量也得到了大幅度的提升，由原有菌株的600UML提高到1500UML。在此基礎(chǔ)上，對重組菌株G13進(jìn)行了10L發(fā)酵罐發(fā)酵，并利用QSEPHAROSE陰離子交換樹脂對發(fā)酵上清進(jìn)行分離純化，獲得了純化倍數(shù)超過了十倍，達(dá)到電泳純的酶，且酶活回收率達(dá)77％，產(chǎn)物經(jīng)過WESTERNBLOT驗(yàn)證確定為人源過氧化氫酶。所獲得的重組人源過氧化氫酶比活力達(dá)到2657KUMG，與商品化的酶活力相當(dāng)。該研究結(jié)果為人源過氧化氫酶的穩(wěn)定和高效表達(dá)以及產(chǎn)物積累提供了一條可行的途徑。人源過氧化氫酶由于在血液循環(huán)中迅速被代謝失活，血漿半衰期極短。此外，人源過氧化氫酶對存儲環(huán)境變化比較敏感，容易變性或降解而失去活性。這些性質(zhì)使人源過氧化氫酶在在藥理學(xué)研究和臨床開發(fā)應(yīng)用上受到了極大的限制。本研究選用PEG5000作為修飾劑對重組表達(dá)所獲得的人源過氧化氫酶進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，并優(yōu)化了修飾條件。最終通過凝膠過濾對主要修飾產(chǎn)物實(shí)現(xiàn)了分離。通過對修飾前后的重組人源過氧化氫酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究和比較，證明所得到的PEG修飾產(chǎn)物與未修飾的酶相比，比活力上升了20％，且在熱穩(wěn)定性、PH穩(wěn)定性上都有所提高。PEG修飾雖然使人源過氧化氫酶的親和力有所下降，但其最大反應(yīng)速度由修飾前的7247MMOLMINL上升到15384MMOLMINL。此外，PEG修飾使人源過氧化氫酶在ICR小鼠體內(nèi)的血漿半衰期由少于15MIN延長至約75MIN。PEG修飾在一定程度上改善了人源過氧化氫酶的穩(wěn)定性，為人源過氧化氫酶的研究和應(yīng)用提示了一條可能的途徑。通過鼻腔給藥方式，本研究對不同劑量的PEG修飾的重組人源過氧化氫酶對流感病毒H1N1鼠肺適應(yīng)株FM1引起的急性肺炎的治療作用進(jìn)行了研究并推測其作用機(jī)制。結(jié)果表明，流感病毒入侵使肺部的抗氧化防御能力明顯下降，而且抑制了吞噬細(xì)胞的功能，從而在肺組織中大量復(fù)制。病毒同時(shí)激活機(jī)體的免疫反應(yīng)，使細(xì)胞因子水平顯著升高，在肺部形成炎癥細(xì)胞浸潤和肺水腫，在肺表面出現(xiàn)大面積的病灶區(qū)域，使實(shí)驗(yàn)小鼠體重急速下降，最終導(dǎo)致小鼠死亡。PEG修飾的人源過氧化氫酶在不同程度緩解了上述病理癥狀，且作用效果隨著劑量的上升而增強(qiáng)。PEG修飾的人源過氧化氫酶通過鼻腔直接作用于肺部，使肺部病變區(qū)域的抗氧化狀態(tài)得到較好的改善。100，000UKGPEG修飾的人源過氧化氫酶將病毒入侵后肺部的過氧化氫酶活力由72UMGPROT提高至209UMGPROT，對超氧陰離子的清除能力由67UMGPROT提高至161UMGPROT，而脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)物MDA的含量則由病毒組的16NMOLMGPROT降低至10NMOLMGPROT。PEG修飾的人源過氧化氫酶主要通過直接減輕病毒引起的肺部氧化損傷而起到緩解急性肺炎的作用。與此同時(shí)，PEG修飾的人源過氧化氫酶對病毒性肺炎小鼠免疫系統(tǒng)狀態(tài)也產(chǎn)生了影響，這種作用存在兩面性。一方面，PEG修飾的過氧化氫酶可降低甚至解除流感病毒所導(dǎo)致的對小鼠脾臟和胸腺功能的抑制，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞對病毒的吞噬和清除，增強(qiáng)非特異性免疫而另一方面，PEG修飾的人源過氧化氫酶表現(xiàn)出對TH1型類細(xì)胞因子的抑制傾向，而對TH2型細(xì)胞因子無明顯影響，借此調(diào)節(jié)組織中的TH1TH2，使免疫應(yīng)答向體液免疫方向偏移，從而降低過度免疫引起的組織損傷。對病毒入侵后肺組織信號傳導(dǎo)通路的分析結(jié)果顯示，PEG修飾的人源過氧化氫酶表現(xiàn)出下調(diào)肺組織的TLR2和NFΚB基因表達(dá)的趨勢。其中100，000UKGPEG修飾的人源過氧化氫酶對TLR2和NFΚB表達(dá)的下調(diào)效果具有顯著性。根據(jù)以上結(jié)果，推測人源過氧化氫酶可能通過如下機(jī)途徑對流感病毒急性肺炎進(jìn)行作用第一，外源給予人源過氧化氫酶直接消除了病毒感染所引起的病理狀態(tài)下過量的過氧化氫并同時(shí)使其他抗氧化酶能力上升，直接減輕ROS造成的氧化應(yīng)激損傷。第二，肺組織ROS含量的降低減弱了NFΚB的活化程度，使其表達(dá)下降，繼而下調(diào)與免疫相關(guān)的細(xì)胞因子的表達(dá)并使免疫從細(xì)胞免疫向體液免疫便宜，從而降低炎癥反應(yīng)造成的損傷。第三，PEG修飾的人源過氧化氫酶有效提高了吞噬細(xì)胞的吞噬功能，增強(qiáng)機(jī)體對病毒的清除能力，降低病毒含量。通過以上三條途徑，PEG修飾的人源過氧化氫酶有效對抗流感病毒株FM1導(dǎo)致的急性肺炎，減少肺部病毒滴度，減緩急性肺炎的病理進(jìn)程，從而減少肺組織損傷，最終降低小鼠的死亡率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，PEG修飾的人源過氧化氫酶具備被進(jìn)一步研究開發(fā)為治療感染引發(fā)的氧化應(yīng)激損傷的藥物的潛力。

簡介：目的利用2型重組腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo)FASL基因轉(zhuǎn)導(dǎo)大鼠骨髓來源DC和活體腎臟，觀察轉(zhuǎn)導(dǎo)后FASL基因的表達(dá)，為進(jìn)一步研究FASL轉(zhuǎn)基因在同種異體器官移植中的作用奠定基礎(chǔ)。方法1構(gòu)建穿梭質(zhì)粒PSNAV20FASLIRESEGFP，通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染BHK21細(xì)胞，經(jīng)G418篩選，獲得載體細(xì)胞株BHKFASLIRESEGFP；2利用重組1型單純皰疹病毒HSV1RC△UL2感染載體細(xì)胞，獲得重組腺相關(guān)病毒；3通過氯仿抽提、冰乙醇沉淀法純化、濃縮重組腺相關(guān)病毒，SDSPAGE檢測其純度，地高辛標(biāo)記探針點(diǎn)雜交測定其滴度；4重組腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo)FASL基因轉(zhuǎn)導(dǎo)原代培養(yǎng)的大鼠骨髓來源DC，RTPCR、流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡檢測其表達(dá)；5用生理鹽水或重組腺相關(guān)病毒經(jīng)腎動脈灌注大鼠左腎，并使之于左。腎內(nèi)滯留45分鐘，3周、5周、7周后處死大鼠取腎臟標(biāo)本，通過RTPCR、HE染色和ICH，檢測FASL表達(dá)以及評價(jià)腎臟的組織形態(tài)變化。結(jié)果1成功構(gòu)建了穿梭質(zhì)粒PSNAV20FASLIRESEGFP；2獲得了重組腺相關(guān)病毒，經(jīng)純化、濃縮后，SDSPAGE檢測其純度達(dá)98％以上，地高辛標(biāo)記點(diǎn)雜交測定其滴度為110VGML；3RAAV2FASLIRESEGFP轉(zhuǎn)導(dǎo)大鼠骨髓來源的DC，48小時(shí)后才可以觀察到綠色熒光蛋白的表達(dá)，隨著時(shí)間的延長逐漸增多，至第7天左右，到達(dá)高峰，以后維持這一水平；通過流式細(xì)胞儀檢測最高峰時(shí)DC表面GFP的表達(dá)效率為18％左右；同時(shí)通過RTPCR也證實(shí)了FASL基因的表達(dá)；4RAAV2FASLIRESEGFP轉(zhuǎn)導(dǎo)活體腎臟后，HE染色證實(shí)其未引起腎臟組織的異常形態(tài)學(xué)改變；RTPCR和ICH證實(shí)了FASL基因表達(dá)但局限于腎小管上皮細(xì)胞。結(jié)論1成功制備了FASL基因重組2型腺相關(guān)病毒；2RAAV介導(dǎo)的FASL基因成功轉(zhuǎn)導(dǎo)大鼠骨髓來源的DC，效率較低，但基因的表達(dá)較長期穩(wěn)定；3RAAV介導(dǎo)的FASL基因腎臟活體轉(zhuǎn)導(dǎo)對腎臟無害，目的基因可以在大鼠腎臟內(nèi)較長期穩(wěn)定表達(dá)，但局限于腎小管上皮細(xì)胞。

簡介：青島大學(xué)碩士學(xué)位論文先天性無癥狀性巨細(xì)胞病毒感染的預(yù)后觀察姓名王曉亮申請學(xué)位級別碩士專業(yè)兒科學(xué)（新生兒）指導(dǎo)教師單若冰20050521青島大學(xué)碩士研究生論文ABSTRACTIHEFOLLOWUPOFCONGENITFALASYMPTOMATICCYTOMEGALOVIRUSINFETIONABSTRACTOBJECTIVETHEPURPOSEOFTHISSTUDYISTOFINDOUTTHEOUTCOMEOFTHECHILDRENWITHCONGENITALASYMTOMATICHCMVINFECTIONMETHODS20CHILDRENWHOCAMEFROMNEONATALDEPARTMENTFROMAPRIL，2003TODECEMBER，2004WEREDETERMINEDASCONGEMTNASYMTOMATICHCMVINFECTIONBYDETECTINGSERAHCMVDNAWITHFQPCRATTHEFIRST2WEEKSAFTERBIRTHTHEYTOOKSHORTTERMFOLLOWUPBYOTOACOUSTICEMISSIONOAEANDAUDITORYBRAINSTEMRESPONSESABRTODETERMINETHEHEARINGLOSSANDBAYLEYSCALEOFINFANTDEVELOPMENTTODETERMINEINTELLECTUALDEVELOPMENTDEFICITSAT6MONTHTO3YEARS16CHILDRENWHOCAMEFROMNEONATALDEPARTMENTFROMDECEMBER1999TODECEMBER2000WEREDETERMINEDASCONGENITALASYMTOMATICHCMVINFECTIONBYTHESAMEMETHODATTHEFIRST2WEEKSAFTERBIRTHAT45YEARSOLDAFTERTHEYWEREDETERMINEDASNORMALHEARINGBYABRTHEYTOOKLONGTERMFOLLOWUPWITHPEABODYPICTUREVOCABULARYTESTPPVT，WECHSLESPRESCHOOLANDPRIMARYSCALESOFINTELLIGENCEWPPSLTODETERMINETHEINTELLIGENCEDEFICITS，CHILDBEHAVIORCHECKLISTCBCLTODETERMINEABNORMALBEHAVIORANDPH3，SICALEXAMINETODETERMINEPHYSIQUEDEVOLOPMENTRESULT1AMONG20ASYMPTOMATICCHILDRENWITHSHORTTERMFOLLOWUP，7EARSHADINCREASEDTHRESHOLDOFABRVWAVEITISSIGNIFICANTDIFFERENTWITHTHECONTROLGROUP；COMPARINGTHEBAYLEYSCALEOFASYMPTOMATIEGROUPM1I110891121PDLLL2441926WITHTHECONTROLGROUPMDLL08501705；PDLL07001084，THEREISNODIFFERENCE2AMONG16ASYMPTOMATICCHILDRENWITHNORMALHEARINGWHOTOOKLONGTERMFOLLOWUPTHESCOREOFPPVTANDVOCABULARYOFWPPSI84673677；1114269RESPECTIVELYOFASYMPTOMATICGROUPISLOWERTHANTHATOFTHECONTROLGROUP1023116413220RESPECTIVELYTHEDIFFERENCEISSIGNIFICANTNODIFFERENCEWASFOUNDBETWEENTHETWOGROUPSCOMPARINGTHESCOREOFWPPSISUBSCALESASINFORMATION，COMPREHENSION，ARITHMETIC，SIMILARITIES，DIGITSPANDIGIFYMBOL，PICTURECOMPLETION，BLOCKDESIGN，PICTUREARRANGEMENTOROBJECTASSEMBLYNODIFFERENCEWASFOUNDBETWEENTHETWOGROUPSCOMPARINGTHESCOREOFFULLSCALEINTELLIGENCEQUOTIENTFSIQ，VERBALINTELLIGENCEQUOTIENTVIQNORPERFORMANCEINTELLIGENCEQUOTIENTPIQCOMPARINGTHEBEHAVIOROFTHETWOGROUPSBYTHEROUGHSCOREOFCBCL，NOSIGNIFICANTDIFFERENCEWASFOUNDTHOUGHTHEMEANSCOREOFTHEASYMPTOMATICGROUPISHIGHERTHANTHATOFTHECONTROLGROUPCOMPARINGTHEPHYSIQUEDEVOLOPMENTBYTHEWEIGHT，HEIGHTANDHEADCIRCUMFERENCE，NOSIGNIFICANT

簡介：本研究探討了輕度認(rèn)知功能障礙MCI心脾兩虛型與心理健康之間是否存在以下的相關(guān)性1、心理健康水平下降是MCI的相關(guān)因素；2、MCI心脾兩虛證與心理健康顯著相關(guān)。根據(jù)國內(nèi)外有關(guān)MCI的研究報(bào)道、中醫(yī)理論，制定中醫(yī)證候觀察表及確定相關(guān)神經(jīng)心理學(xué)量表，用之調(diào)查廣東省中醫(yī)院門診就診、住院及社區(qū)中50～80歲人群共89人MCI組44名，認(rèn)知功能正常者45名。現(xiàn)場調(diào)查收集包括一般人口學(xué)資料、中醫(yī)證候及紐芬蘭紀(jì)念大學(xué)幸福度量表、MMSE、ADL等，并用SPSS110軟件建立數(shù)據(jù)庫。研究結(jié)論MCI的中醫(yī)證候以虛實(shí)夾雜為多見，虛證多表現(xiàn)為腎虛、心血虛、脾氣虛，實(shí)證則以血瘀證、痰濁證多見。心脾兩虛證與心理健康狀況可能存在相關(guān)。不良的心理社會因素可以造成正常中老年人認(rèn)知功能的衰退，對相關(guān)因素積極進(jìn)行社會心理學(xué)干預(yù)，對于減少或減緩癡呆的發(fā)生有重要的社會和實(shí)踐意義。

簡介：詩歌是人們生活中不可或缺的一部分，可以說生活中處處有詩歌。在詩詞盛行的宋代更是如此。古人用“凡有井水處，既能歌柳詞”來贊美宋代詞人柳永詞作的風(fēng)行，而如今來看這恰恰也力證了詩詞反映了人們對世界的感知，是人們的認(rèn)知方式。本文以李清照的詩詞為語料，歸納其中轉(zhuǎn)喻的概況，發(fā)掘李清照詩歌中轉(zhuǎn)喻的意義、認(rèn)知機(jī)制及其作用，試圖證明轉(zhuǎn)喻是詩人的創(chuàng)作、認(rèn)知和思考方式，是詩歌的重要表征手段，也是了解周圍世界和文化的基本工具。過去學(xué)術(shù)界長期將轉(zhuǎn)喻當(dāng)做一種修辭方式。20世紀(jì)80年代后，轉(zhuǎn)喻才被看做一種普遍存在的思維方式。隨著現(xiàn)代語言學(xué)發(fā)展，語言學(xué)家逐漸意識到將語言學(xué)和文學(xué)相結(jié)合的重要性，學(xué)者們開始從認(rèn)知角度來分析和解讀各類文學(xué)作品。李清照是我國文學(xué)史上杰出的女詞人，是宋代詞人中的佼佼者，在詩、文、賦等方面不乏名篇，在文學(xué)史上占有重要地位。南宋以來，她和她的“易安體”一直是歷代詩人關(guān)注的焦點(diǎn)之一。她的作品為后人提供了取之不竭、用之不盡的語言資料。以李清照的詩詞為語料來分析宋詞中的轉(zhuǎn)喻現(xiàn)象，能夠了解轉(zhuǎn)喻在詩歌中的作用和機(jī)制，為理解欣賞詩歌打開新的思路，也是對這類研究的進(jìn)一步推進(jìn)。本文首先回顧了解前人對轉(zhuǎn)喻現(xiàn)象和李清照詩詞的傳統(tǒng)研究和認(rèn)知研究，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步認(rèn)識轉(zhuǎn)喻理論及將在本文中突出運(yùn)用的部分，然后結(jié)合分析李清照詩詞中的各類轉(zhuǎn)喻現(xiàn)象及其機(jī)制，論證轉(zhuǎn)喻是詩歌的重要表征手段，也是了解周圍世界和文化的基本工具。最后介紹了轉(zhuǎn)喻對詩歌建構(gòu)的作用。

簡介：戊型肝炎病毒（HEV）為無包膜的單股正鏈RNA病毒，基因組全長約7200BP，有3個(gè)開放讀碼框架（FS）F1、F2和F3。感染哺乳動物的HEV主要有4個(gè)基因型，只有一個(gè)血清型。昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)具備許多真核系統(tǒng)翻譯后加工功能，如二硫鍵的形成、糖基化、磷酸化、信號肽切除等。應(yīng)用其不但能表達(dá)大分子蛋白還可以同時(shí)表達(dá)多個(gè)外源基因，形成多聚體蛋白。表達(dá)出的重組蛋白具有天然蛋白的生物學(xué)功能，最高表達(dá)量可達(dá)細(xì)胞總蛋白量的50％。利用昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的HEVF2蛋白能自主組裝成病毒樣顆粒（VLPS），這些VLPS不僅在形態(tài)大小上與天然的病毒顆粒非常相似，而且免疫原性與完整的HEV類似，為戊型肝炎疫苗及診斷試劑的研究奠定了基礎(chǔ)。本課題針對戊型肝炎病毒（HEV）4型F2編碼第126621位氨基酸的基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增，構(gòu)建克隆，并應(yīng)用昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行表達(dá)。對所表達(dá)的蛋白進(jìn)行純化分析，電鏡觀察確定是否形成病毒樣顆粒。一重組桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建與鑒定為了提高病毒樣顆粒的產(chǎn)量，對HEVF2基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)引入KOZAK序列。以本室構(gòu)建的質(zhì)粒為模板，PCR擴(kuò)增得到優(yōu)化后的目的基因，經(jīng)過酶切連接最終得到PFASTBAC1重組載體，經(jīng)過DNA測序驗(yàn)證序列及讀碼框正確。二病毒樣顆粒的表達(dá)與純化利用BACTOBAC表達(dá)系統(tǒng)，在SF9昆蟲細(xì)胞內(nèi)表達(dá)目的基因。ELISA與WESTERNBLOT檢測顯示目的蛋白表達(dá)量較高，具有抗原性；免疫熒光檢測顯示目的蛋白為胞內(nèi)表達(dá)；利用多種純化方法純化目的蛋白，純度在90以上；電鏡觀察顯示HEV病毒樣顆粒為球形顆粒，直徑約為3040NM，比天然病毒顆粒略大。

簡介：分類號UDC密級學(xué)號2141020014碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文認(rèn)知翻譯觀視閾下呼蘭河傳英譯本中民俗詞匯翻譯研究認(rèn)知翻譯觀視閾下呼蘭河傳英譯本中民俗詞匯翻譯研究張妙妍張妙妍學(xué)科門類類文學(xué)學(xué)科名稱稱外國語言學(xué)及應(yīng)用語言學(xué)外國語言學(xué)及應(yīng)用語言學(xué)指導(dǎo)教師師李慶明李慶明教授教授申請日期期20172017年6月認(rèn)知翻譯觀視閾下的呼蘭河傳英譯本中民俗詞匯的翻譯研究張妙妍西安理工大學(xué)

簡介：目的觀察黃芪甲甙對病毒性心肌炎的保護(hù)作用，并探討其抗氧化作用機(jī)制。方法BALBC小鼠50只隨機(jī)分5組（每組10只），空白對照組A組，腹腔無菌注射不含病毒的EAGLE’S培養(yǎng)液01ML，在腹腔注射病毒培養(yǎng)液30MIN后，以生理鹽水01ML灌胃，共7D；病毒性心肌炎對照組（B組），小鼠每只腹腔注射01ML內(nèi)含1102TCID50CVB3的EAGLE’S培養(yǎng)，在腹腔注射含病毒的EAGLE’S培養(yǎng)液30MIN后，以生理鹽水01ML灌胃，共7D；黃芪甲甙低、中、高劑量干預(yù)組（分別為C、D、E組），在腹腔注射病毒30MIN后，用黃芪甲甙（具體劑量分別為007、02、06GKGD）01ML灌胃，共7D。觀察小鼠生存率；心肌病變積分；肝、肺干濕重比；血漿腦鈉肽（BNP）濃度；心肌谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPX）、過氧化氫酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）活力及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測CUZNSODMRNA水平表達(dá)。結(jié)果1與A組比較，B組小鼠的生存率明顯下降，心肌病變積分明顯升高（323±083），血漿BNP濃度較A組明顯增高（1413±68VS766±41）；與B組比較，E組可明顯提高小鼠的生存率，心肌病變積分明顯下降（186±059VS323±083），血漿BNP濃度明顯下降（868±181VS1413±68），B組肝、肺淤血明顯，E組則無明顯淤血。（2）與B組比較，E組心肌組織GSHPX、CAT、SOD活力呈增高趨勢，心肌組織GSHPX3973±802VS999±271、CAT635±233VS136±087、SOD6571±493VS4015±603活力明顯增強(qiáng)CUZNSODMRNA水平表達(dá)明顯增高043±011VS032±001。但C、D組，雖然也在一定程度使心肌組織GSHPX、CAT、SOD活力及CUZNSODMRNA表達(dá)水平增加，但與B組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，有一定的量效關(guān)系。結(jié)論黃芪甲甙通過增加心肌抗氧化酶活力，對病毒性心肌炎具有明顯的保護(hù)作用。