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簡(jiǎn)介：第一部分目的建立漢坦病毒體外細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定的方法方法用漢坦病毒76118標(biāo)準(zhǔn)株接種于細(xì)胞貼壁培養(yǎng)法傳代培養(yǎng)的VEROE6細(xì)胞中連續(xù)傳代培養(yǎng)810天后采用免疫熒光法鑒定細(xì)胞中的病毒抗原結(jié)果用漢坦病毒76118標(biāo)準(zhǔn)株感染傳代培養(yǎng)的VEROE6細(xì)胞第4天50％的VEROE6細(xì)胞胞漿中可見(jiàn)針對(duì)漢坦病毒的特異性免疫熒光第7天陽(yáng)性細(xì)胞可達(dá)100％結(jié)論采用細(xì)胞貼壁法培養(yǎng)的VEROE6細(xì)胞接種漢坦病毒后經(jīng)胰酶消化傳代培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好可作為腎綜合征出血熱體外研究的細(xì)胞模型第二部分目的探討利巴韋林等五種藥物對(duì)漢坦病毒的體外抑制作用方法利用漢坦病毒76118株感染傳代培養(yǎng)的VEROE6細(xì)胞采用免疫熒光法分別評(píng)價(jià)五種藥物的抗病毒效果結(jié)果1五種藥物均對(duì)漢坦病毒的入侵無(wú)阻斷作用2免疫熒光檢測(cè)利巴韋林對(duì)漢坦病毒增殖有明顯的抑制作用其最大無(wú)毒濃度TD0為500UGML、最小有效濃度MTC為312UGML賽若金TD0為10萬(wàn)UML、MTC為05萬(wàn)UML膦甲酸鈉TD0為500UGML、MTC為125UGML更昔洛韋TD0為250UGML、MTC為625UGML阿昔洛韋各濃度均未見(jiàn)對(duì)病毒增殖有抑制作用結(jié)論在一定濃度范圍內(nèi)利巴韋林、賽若金、膦甲酸鈉、更昔洛韋對(duì)出血熱病毒均具有抑制作用為臨床抗出血熱病毒治療提供了一定的理論依據(jù)

簡(jiǎn)介：四川大學(xué)碩士學(xué)位論文小鼠乳腺腫瘤病毒相似的基因序列在中國(guó)女性乳腺癌中的表達(dá)研究姓名羅婷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師伍曉汀20040501小鼠乳腺腫瘤病毒相似的基因序列在中國(guó)女性乳腺癌中的表達(dá)研究研究生羅婷病學(xué)存在部分一致性，符合地域差異特點(diǎn)美國(guó)、意大利、阿根廷和澳大利亞與中國(guó)和越南之間序列陽(yáng)性率相比較也存在差異，此差異的存在支持了小鼠的種群不同影響乳腺癌發(fā)病率各地不同的假設(shè)。關(guān)鍵詞乳腺癌與MMTV相似的基因序列中國(guó)專(zhuān)竹

簡(jiǎn)介：目的慢性乙型肝炎慢乙肝，CHB是一個(gè)全球性公共衛(wèi)生問(wèn)題，全世界乙型肝炎病毒表面抗原HBSAG陽(yáng)性者約35億，主要分布于亞洲、非洲和拉丁美洲地區(qū)。我國(guó)是乙型肝炎病毒HBV感染的高發(fā)區(qū)，人群中HBSAG陽(yáng)性率達(dá)975％，約12億人，其中慢性乙型肝炎患者約3000～4000萬(wàn)人。慢性乙型肝炎治療的關(guān)鍵是抗病毒治療。目前批準(zhǔn)用于治療慢乙肝的抗病毒藥物有A干擾素和核苷酸類(lèi)似物兩大類(lèi)。阿德福韋酯ADEFOVIRDIPIVOXIL，ADV是經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)的用于抗HBV的第二個(gè)核苷酸類(lèi)似物，該藥對(duì)HBV野毒株及拉米夫定耐藥變異株均有明顯的抑制作用；但長(zhǎng)期應(yīng)用阿德福韋酯的慢乙肝患者，其HBV也會(huì)發(fā)生阿德福韋酯相關(guān)的耐藥變異。本研究的目的是觀察阿德福韋酯單藥治療慢性乙型肝炎慢乙肝過(guò)程中發(fā)生病毒突破的患者乙型肝炎病毒HBVP基因區(qū)變異發(fā)生情況，為臨床醫(yī)生合理選擇抗病毒藥物提供參考。方法選擇51例單用阿德福韋酯抗病毒治療的慢性乙型肝炎病人，連續(xù)入組。所有病例單用阿德福韋酯10MGD，療程12月，且在治療過(guò)程中發(fā)生病毒突破定義為應(yīng)用阿德福韋酯后血清HBVDNA下降2LOG10COPIESML，繼續(xù)治療過(guò)程中HBVDNA較最低點(diǎn)上升幅度1LOG10COPIESML。分別檢測(cè)隨訪發(fā)現(xiàn)病毒突破時(shí)患者的血清ALT、HBVDNA水平，并采用PCR產(chǎn)物直接測(cè)序法分析HBVP區(qū)基因的變異發(fā)生情況。結(jié)果51例患者中有37例725％在HTBVP基因區(qū)檢測(cè)出阿德福韋酯耐藥相關(guān)變異。分別為，逆轉(zhuǎn)錄酶區(qū)236號(hào)密碼子編碼的門(mén)冬酰胺ASPARAGINE，N被蘇氨酸THREONINE，T取代。33例患者檢測(cè)RT181位點(diǎn)密碼子變異；8例患者檢測(cè)出RT236位點(diǎn)密碼子變異，其中4例患者檢測(cè)出RT181與RT236兩位點(diǎn)聯(lián)合變異。RT181位點(diǎn)變異明顯多于RT236位點(diǎn)變異P0001。聯(lián)合變異患者其血清HBVDNA水平高于單一變異患者分別為653±045LOGLOCOPIESML、537±108LOGLOCOPIESML，P0043而兩組患者發(fā)生病毒突破時(shí)的ALT無(wú)明顯差別中位數(shù)分別為575IUL和70IUL。結(jié)論在應(yīng)用阿德福韋酯單藥治療的慢乙肝患者中可篩選出HBVP基因區(qū)的相關(guān)耐藥變異，且RT181位點(diǎn)變異更多見(jiàn)。不同耐藥位點(diǎn)患者的HBVDNA水平可有差異。

簡(jiǎn)介：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名避怵馴。P諺中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解中國(guó)醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)忘即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名中文論著摘要臨床社會(huì)認(rèn)知功能量表的初步編制及信度和效度檢驗(yàn)?zāi)康木幹七m合中國(guó)社會(huì)文化背景下的評(píng)定精神分裂癥社會(huì)認(rèn)知功能量表，并對(duì)其進(jìn)行因子分析和各種信、效度檢驗(yàn)，試圖在正常人群中找出其因子組成的資料，以便為精神分裂癥的診治、干預(yù)及康復(fù)以及臨床科研提供一個(gè)有效工具。方法結(jié)合中國(guó)精神分裂癥患者的基本特征和臨床觀察為基礎(chǔ)，參考國(guó)內(nèi)外大量同類(lèi)量表及目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于精神分裂癥社會(huì)認(rèn)知功能的最新研究文獻(xiàn)，提出社會(huì)認(rèn)知量表的基本結(jié)構(gòu)模型，并初步建立社會(huì)認(rèn)知量表維度、結(jié)構(gòu)因子和條目庫(kù)。通過(guò)預(yù)測(cè)、預(yù)試驗(yàn)對(duì)條目進(jìn)行粗篩，組成一個(gè)因子、條目適中的量表，并按比例分層整群取樣，在醫(yī)學(xué)院不同年級(jí)組學(xué)生進(jìn)行實(shí)測(cè)，檢驗(yàn)其信度及效度。繼蟹口木根據(jù)實(shí)測(cè)的數(shù)據(jù)資料，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，初步建立了核心體驗(yàn)、精神病性體驗(yàn)、非精神病性體驗(yàn)三個(gè)維度，自我體驗(yàn)、自我表達(dá)、他人體驗(yàn)、情感區(qū)別、被影響性、奇異性、情緒管理、應(yīng)對(duì)方式、幸福感、自我評(píng)價(jià)、自我效能、獨(dú)立性、人際合作11個(gè)因子，共106個(gè)條目。信、效度檢驗(yàn)結(jié)果顯示本研究信、效度檢驗(yàn)均達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。結(jié)論精神分裂癥社會(huì)認(rèn)知量表的條目具有良好的區(qū)分度和相關(guān)性，各因子之間有良好的相關(guān)性，條目及因子數(shù)較適中，條目總體質(zhì)量較高。就總體而言，社會(huì)認(rèn)知量表具有較高的穩(wěn)定性和內(nèi)容上的一致性，測(cè)量誤差較小，達(dá)到了心理測(cè)量學(xué)

簡(jiǎn)介：對(duì)于母親HBEAG是否能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)使嬰兒的CTL細(xì)胞對(duì)HBECAG產(chǎn)生免疫耐受從而形成慢性感染以及S基因變異是否是聯(lián)合免疫失敗的主要原因等問(wèn)題均還存在爭(zhēng)議為進(jìn)一步研究HBEAG是否能通過(guò)胎盤(pán)由母親體內(nèi)進(jìn)入胎兒體內(nèi)以及HBV母嬰感染的發(fā)生與HBVDNA及HBEAG含量的關(guān)系分別用ABBOTTABXYM發(fā)光免疫分析儀、ROCHELIGHTCYCLER定量分析儀檢測(cè)54對(duì)HBSAG陽(yáng)性母親產(chǎn)前血清及配對(duì)嬰兒出生時(shí)、出生后6個(gè)月、12個(gè)月血清中的HBEAG含量和HBVDNA含量結(jié)果顯示HBV母嬰傳播的發(fā)生與母親體內(nèi)HBVNA及HBEAG含量相關(guān)HBEAG能通過(guò)胎盤(pán)感染嬰兒且母嬰間存在選擇性傳播母親針對(duì)優(yōu)勢(shì)株產(chǎn)生的抗體不能中和弱勢(shì)株以致弱勢(shì)株選擇性傳播給嬰兒在嬰兒體內(nèi)成為優(yōu)勢(shì)株另外1例嬰兒體內(nèi)產(chǎn)生A決定簇131位變異也可能是免疫失敗的原因

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多人NT3、BDNF基因真核表達(dá)載體和四環(huán)素可誘導(dǎo)重組腺病毒載體的構(gòu)建及鑒定.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：中山大學(xué)博士學(xué)位論文鼻咽癌中EB病毒編碼的LMP1調(diào)控MT信號(hào)通路及其預(yù)后意義的研究姓名陳靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師邵建永20100528中山大學(xué)博士學(xué)位論文鼻明癌中EB病毒編碼的LMPI調(diào)控MTOR信號(hào)通路及其預(yù)后意義的研究方法應(yīng)用人全基因組表達(dá)譜芯片檢測(cè)鼻咽癌穩(wěn)定轉(zhuǎn)染LMPI細(xì)胞株HONEILMPI／HONELVECTOR，篩選與LMPL基因相關(guān)的差異表達(dá)基因。通過(guò)與KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，得到差異基因相關(guān)的信號(hào)通路。應(yīng)用定量PCR方法驗(yàn)證芯片結(jié)果。運(yùn)用WESTERNBLOT方法檢測(cè)鼻咽癌細(xì)胞株HONEI、610B瞬時(shí)轉(zhuǎn)染或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染LMPI基因后，MTOR信號(hào)通路各信號(hào)分子的蛋白表達(dá)情況；采用RNA干擾方法沉默鼻咽癌細(xì)胞株C6661中LMPI基因后，運(yùn)用免疫熒光方法檢測(cè)該細(xì)胞中LMPI及MTOR信號(hào)通路各信號(hào)分子的蛋白表達(dá)情況。采用免疫組化方法檢測(cè)230例鼻咽癌組織中LMPI、PMTOR、PP70S6K和P4EBPL的表達(dá)情況，并用SPSSL60軟件分析各基因與臨床病理資料的關(guān)系及其預(yù)后意義。結(jié)果1基因表達(dá)譜芯片分析得到鼻咽癌穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株LIONELLMPI中LMPL調(diào)控的差異表達(dá)基因?qū)⒈茄拾┘?xì)胞系HONEL穩(wěn)定轉(zhuǎn)染B958一LMPI真核表達(dá)質(zhì)粒后進(jìn)行人全基因組芯片分析，共得到1533個(gè)LMPI調(diào)控的差異表達(dá)基因上調(diào)基因1034個(gè)，下調(diào)基因499個(gè)。通過(guò)與KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，把這些差異基因按照通路重新聚類(lèi)分析，獲得數(shù)條信號(hào)通路。其中，與MTOR信號(hào)通路相關(guān)的差異表達(dá)基因經(jīng)定量PCR驗(yàn)證，其差異表達(dá)情況與芯片結(jié)果完全一致。2鼻咽癌細(xì)胞系中LMPL調(diào)控ROTOR信號(hào)通路基因經(jīng)免疫印跡證實(shí)，鼻咽癌穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株HONEILMPI中，LMPI能夠上調(diào)MTOR信號(hào)通路上游分子PAKT和PMTOR以及下游信號(hào)分子PP70S6K和P4EBPL。同時(shí)，在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染LMPI質(zhì)粒的鼻咽癌細(xì)胞系610B中，LMPI亦能正向調(diào)控這些信號(hào)分子。反之，在EBV陽(yáng)性表達(dá)的鼻咽癌細(xì)胞系C666一L中沉默LMPI基因后，經(jīng)免疫熒光顯示，MTOR信號(hào)通路分子PMTOR和P4EBPL均表達(dá)下調(diào)。3鼻咽癌組織中LMPL及ROTOR信號(hào)通路基因的表達(dá)與臨床病理資料的相關(guān)性

簡(jiǎn)介：I學(xué)校代碼10571『學(xué)號(hào)20070L0027嬰幼兒腹瀉常見(jiàn)病毒的多重PCR檢測(cè)及輪狀病毒G、P分型研究STUDIESONMULTIPLEPCRASSAYSFORDETECTIONOFCOMMONDIARRHEAVIRUSESANDG、P坶PESOFROTAVIRUSFROMINFANTS學(xué)科門(mén)類(lèi)學(xué)科、專(zhuān)業(yè)研究方向年級(jí)研究生姓名醫(yī)學(xué)病原生物學(xué)病原微生物分子生物學(xué)二零零七級(jí)一令令七教羅小芳導(dǎo)師姓名陸學(xué)東研究員起止日期20079～20106廣東醫(yī)學(xué)院二零一零年五月一奄一苓，牛血月學(xué)位論文知識(shí)產(chǎn)權(quán)聲明本人在就讀研究生期間所完成的學(xué)位論文及其相關(guān)成果，知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬學(xué)校。本人在畢業(yè)離校前會(huì)將有關(guān)的研究資料和結(jié)果全部上交導(dǎo)師，離校后發(fā)表或使用學(xué)位論文或與該論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，署名單位仍然為廣東醫(yī)學(xué)院。學(xué)?？梢詫W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，可以公布包括刊登論文的全部或部分內(nèi)容。導(dǎo)師享有發(fā)表學(xué)位論文、申請(qǐng)成果和專(zhuān)利的權(quán)利。注保密的學(xué)位論文在解密后適用本聲明。作者簽名導(dǎo)師簽名FI期建里竺魚(yú)PTIT明叢坐厶G

簡(jiǎn)介：研究目的1、建立血標(biāo)本DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR篩查SENV的反應(yīng)體系的流程2、調(diào)查SEN病毒SENV在健康人群和慢性肝病患者中的感染情況3、探討SENV與慢性肝病之間的關(guān)系研究方法1、對(duì)象選取25例健康獻(xiàn)血員作為健康人群標(biāo)本60例慢性肝病患者不明原因肝炎、肝硬化、原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌作為病例組2、QIAGEN試劑盒提取樣本血漿中DNA用SENV特異引物PCR擴(kuò)增SEN病毒DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)反應(yīng)結(jié)果3、統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析研究結(jié)論1、相對(duì)其它病毒SENV在健康人群中有較高的感染率并且其在肝硬化患者中的感染率顯著高于健康人群而在其他肝病患者中的感染率沒(méi)有顯著差異2、SENV感染與肝病患者的臨床情況沒(méi)有顯著關(guān)聯(lián)進(jìn)一步的研究需要大樣本、良好對(duì)照的觀察以及對(duì)現(xiàn)有病例進(jìn)行跟蹤調(diào)查

簡(jiǎn)介：目的該實(shí)驗(yàn)以病毒性肝炎患者肝組織和血清的人白細(xì)胞抗原Ⅰ類(lèi)分子HUMANLYMPHOCYTEANTIGENIHLAI為研究對(duì)象觀察病毒性肝炎不同階段HLAI在肝細(xì)胞表達(dá)情況及血清水平探討HLAI與慢性病毒性肝炎的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸的關(guān)系對(duì)探索乙肝慢性化以及免疫耐受的形成提供線索對(duì)目前抗病毒藥物的治療效果進(jìn)行預(yù)測(cè)提供參考結(jié)論通過(guò)肝組織HLAI免疫組化染色觀察到慢性肝炎的不同階段肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞可不同程度產(chǎn)生和表達(dá)HLAI抗原表達(dá)強(qiáng)度隨肝臟炎癥活動(dòng)度的增加而增強(qiáng)1通過(guò)檢測(cè)血清的SHLAI水平發(fā)現(xiàn)SHLAI隨肝炎活動(dòng)程度的增加與肝臟HLAI同步增加表明肝細(xì)胞損傷、細(xì)胞內(nèi)HLAI分子釋放入血是SHLAI的重要來(lái)源血清SHLAI可作為反映肝組織免疫水平及肝細(xì)胞免疫損傷的指標(biāo)2測(cè)定肝臟或血清HLAI能在一定程度上了解慢性肝炎患者的肝臟合成儲(chǔ)備功能3SHLAI對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)呈現(xiàn)抑制作用對(duì)探索慢性肝炎免疫耐受狀態(tài)的形成機(jī)制提供了新的角度4目前認(rèn)為抗HBEHBVDNA患者存在乙肝病毒的前C區(qū)變異該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明變異株病毒較野毒株病毒更能激活機(jī)體較高的免疫反應(yīng)和較強(qiáng)的組織損傷5HLAI是免疫反應(yīng)中最后一個(gè)環(huán)節(jié)中的關(guān)鍵分子檢測(cè)HLAI可作為預(yù)測(cè)肝炎患者預(yù)后的直接指標(biāo)

簡(jiǎn)介：761737中因協(xié)和蟹稈大孝中國(guó)醬孳甜辱豫博士研究生學(xué)位論文中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)研究生院中田醫(yī)掌科掌院中國(guó)惱和醫(yī)科大掌醫(yī)掌生物掌研究所博士研究生性’，IMINTRAMUSCULARLYININTRANASALLYIPIMMUNOPRCCIR’ITATIONIPTGISOPROPYLBDTHIOGALACTOPYRANOSIDEKDKILODALTONMAL04AFRICAGREENMONKEYKIDNEYCELLLINEMEMMINIMUMESSENTIALMEDIUMNSP4NONSTRUCTURALPROTEIN4OPDOPHENYLENEDIAMINEPAGEPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHORESISPBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINEPFUPLAQUEFORMINGUNITPMPROTEINMARKERRADRECOMBINANTADENOVIRUSRNASERIBONUELEASERPMIRPMIMEDIUM1640SDSSODIUMDODECYLSULFATESGSIGNALPEPTIDETCIDSO50PERCENTTISSUECULTUREINFECTIVEDOSETEMEDN，N，N’NTETREMETHYLETHYLENEDIAMINETMTRANSMEMBRANEPEPTIDETRISTDSOWDROXYMETHYLEAMINOMETHANEVP4VIRALPROTEIN4XGAL5BROMO4CHLORO3INDOLYL一13一DGALACTOSIDE14

簡(jiǎn)介：南京卞醫(yī)藥大學(xué)LIIIIILULIIIIIIIIIIIIIIWF2810373碩士學(xué)位論文I00例社區(qū)輕、中度血管性認(rèn)知障礙患者流行病學(xué)特征及中醫(yī)證型分析研究生指導(dǎo)教師所在專(zhuān)業(yè)所在學(xué)科所在學(xué)院畢業(yè)時(shí)間張婧常誠(chéng)中醫(yī)學(xué)本碩連讀中醫(yī)內(nèi)科學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院2013年06月|。㈣3川叭洲2公銣川4∽洲1川4溉娉㈣孔曾萼㈣ⅢY學(xué)號(hào)039006240碩士學(xué)位論文100例社區(qū)輕、中度血管性認(rèn)知障礙患者流行病學(xué)特征及中醫(yī)證型分析作者姓名張婧指導(dǎo)教師姓名常誠(chéng)學(xué)科專(zhuān)業(yè)中醫(yī)學(xué)本碩連讀申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別臨床醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位職稱(chēng)主任醫(yī)師研究方向神經(jīng)系統(tǒng)疾病臨床研究學(xué)習(xí)時(shí)間自2006年09月12目起至2013年06月09日止論文提交日期2013年04月11日論文答辨日期2013年06月09日學(xué)位授予單位南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位類(lèi)型臨床醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位

簡(jiǎn)介：目的通過(guò)檢測(cè)慢性乙型肝炎和乙肝肝硬化患者SEN病毒SENV的感染情況了解重疊感染SENV對(duì)乙肝后肝硬化發(fā)展的影響方法1聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)SEN病毒D和H亞型方法的建立及序列分析參考已發(fā)表的文章及基因序列分別針對(duì)SENVD亞型和SENVH亞型設(shè)計(jì)引物通過(guò)對(duì)已知陽(yáng)性血清的檢測(cè)探索建立了兩套巢式聚合酶鏈反應(yīng)NPCR檢測(cè)方法并將第二次反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行測(cè)序用基于GENBANK的BIASTN程序進(jìn)行同源性分析2慢性乙型肝炎和乙肝肝硬化患者SENVD和H亞型感染情況的檢測(cè)在溫州附屬第一醫(yī)院感染科隨機(jī)選取148例慢性乙型肝炎患者、119例乙肝肝硬化患者其中包括77例有輸血史患者和190例無(wú)輸血史患者在溫州醫(yī)學(xué)院附醫(yī)醫(yī)療保健中心隨機(jī)選取80例健康體檢者采用巢式聚合酶鏈反應(yīng)對(duì)上述患者的血清進(jìn)行SENVDH亞型的檢測(cè)并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析部分陽(yáng)性血清的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序結(jié)果1已知陽(yáng)性血清第二次PCR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果與GENBANK的序列比較其核苷酸同源性分別為97﹪AY264849和91﹪AY2066832SENVH在乙肝肝硬化患者和慢性乙型肝炎患者血清中的檢出率分別為378﹪和264﹪兩者差異有顯著性P0054健康體檢者血清中SENVH和D的檢出率分別為138﹪和163﹪與乙肝肝硬化和慢性乙型肝炎患者相比差異有顯著性P005結(jié)論SENVD和H亞型在乙肝肝硬化和慢性乙型肝炎患者中的檢出率均高于健康體檢者差異有顯著性推測(cè)SENV和HBV可能存在相似的傳播途徑和協(xié)同的相互作用并且SENVH在乙肝肝硬化患者中的檢出率高于慢性乙型肝炎患者兩者差異有顯著性而SENVD在乙肝肝硬化和慢性乙型肝炎患者之間差異無(wú)顯著性提示重疊感染SENVH可能會(huì)對(duì)乙肝后肝硬化發(fā)展具有一定的影響此外有輸血史患者和無(wú)輸血史患者血清中SENV的總檢出率無(wú)顯著性差異提示SENV的主要傳播方式除輸血外還應(yīng)存在其他途徑

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多乙酰肝素酶在呼吸道合胞病毒觸發(fā)微小病變型腎病發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：誘導(dǎo)宿主對(duì)供體特異性的免疫耐受，可以從根本上解決臨床器官移植中的免疫排斥問(wèn)題。雖然應(yīng)用免疫抑制劑可以有效地抑制宿主免疫系統(tǒng)對(duì)移植物的排斥反應(yīng)，但長(zhǎng)期大劑量地使用免疫抑制劑具有明顯副作用，因?yàn)樗谝种泼庖吲懦夥磻?yīng)的同時(shí)，極大地削弱了患者的免疫防御功能，增加了患者發(fā)生腫瘤和機(jī)會(huì)性嚴(yán)重感染的概率。盡管人們從多方面改進(jìn)了誘導(dǎo)免疫耐受的策略，并在一些動(dòng)物試驗(yàn)中取得了成功，但真正具有臨床應(yīng)用價(jià)值的可行方案并不多。通過(guò)共刺激分子抑制T細(xì)胞的活化和增殖來(lái)誘導(dǎo)免疫耐受是近年來(lái)移植免疫的研究熱點(diǎn)。B7H1能夠提供T細(xì)胞活化的負(fù)性共刺激信號(hào)，廣泛表達(dá)于淋巴組織和非淋巴組織，是影響效應(yīng)性和記憶性T細(xì)胞功能的重要共刺激分子。其受體PD1PROGRAMMEDDEATH1與CTLA4結(jié)構(gòu)相似，是CD28家族的第4個(gè)成員，胞外區(qū)氨基酸序列上與CTLA4分子的有24％同源性，主要以單體形式表達(dá)于活化的CD4T和CD8T細(xì)胞及B細(xì)胞表面。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)B7H1結(jié)合PD1后，能抑制已經(jīng)活化的T細(xì)胞增殖及分泌細(xì)胞因子，特別是能夠顯著抑制效應(yīng)性CD8T細(xì)胞的活化。在T細(xì)胞受到抗原刺激時(shí)，B7H1PD1信號(hào)通路能拮抗正性的B7CD28共刺激信號(hào)，提示B7H1PD1信號(hào)通路對(duì)T細(xì)胞應(yīng)答具有負(fù)性調(diào)節(jié)作用。B7H1在非淋巴組織的表達(dá)，提示它們可以下調(diào)自身反應(yīng)性T、B細(xì)胞在外周組織中的應(yīng)答，可能參與自身耐受的形成。研究證實(shí)，增強(qiáng)B7H1的表達(dá)可以下調(diào)已活化的T、B細(xì)胞在外周組織中的應(yīng)答，在維持外周T、B細(xì)胞耐受中發(fā)揮重要的作用。本研究構(gòu)建了表達(dá)小鼠B7H1基因的慢病毒載體，試圖通過(guò)B7H1基因的表達(dá)在不同的小鼠品系間誘導(dǎo)同種異體皮膚移植耐受。為了探討B(tài)7H1在誘導(dǎo)皮膚移植耐受中的作用及其生物學(xué)功能，我們完成了如下四部分工作1構(gòu)建表達(dá)小鼠B7H1基因的慢病毒穿梭載體PLENTI6V5DTOPOMB7H1重組子用RTPCR方法從C57BL6小鼠肝臟組織中克隆獲得B7H1CDNA全長(zhǎng)F，并定向克隆到PLENTI6V5DTOPO載體，經(jīng)測(cè)序證實(shí)無(wú)突變。2表達(dá)小鼠B7H1基因的慢病毒的包裝在293FT包裝細(xì)胞完成了表達(dá)B7H1基因的慢病毒包裝。測(cè)定B7H1重組慢病毒和空病毒的滴度分別為3410TUML和8510TUML。病毒感染B16F10細(xì)胞后，免疫組織化學(xué)法證實(shí)B16F10細(xì)胞表面有B7H1和V5蛋白的表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)慢病毒感染B16F10細(xì)胞后B7H1融合蛋白的陽(yáng)性率為36％。3B7H1重組腺病毒的制備和鑒定。B7H1重組腺病毒為段文元博士制備成功，鑒定正確的重組腺病毒大量擴(kuò)增，通過(guò)GFP熒光計(jì)數(shù)法測(cè)定B7H1重組腺病毒和對(duì)照空病毒的滴度分別為110TUML和310TUML。4B7H1在延長(zhǎng)同種異體皮膚移植存活時(shí)間中的作用以C57BL6小鼠為供皮鼠，BALBC小鼠為受皮鼠行同種異體皮膚移植。將70只BALBC小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組A組、環(huán)孢霉素ACSA處理組B組、B7H1重組慢病毒處理組C組，LVB7H1、慢病毒空病毒載體處理組D組，LNB7HO、B7H1重組腺病毒處理組E組，ADB7H1，腺病毒空病毒載體處理組F組，ADB7HO，B7H1重組慢病毒和B7H1重組腺病毒共處理組G組，LVB7HOADB7H1，每組10只。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，從A組到G組移植皮片平均存活時(shí)間MEANSURVIVALTIME，MST分別為1080±187；1480±343；205±430；111±242；156±232；107±206和161±273天。A、D、F皮膚移植物的MST無(wú)顯著性差異P005，說(shuō)明單純使用慢病毒、腺病毒載體對(duì)移植皮片的存活無(wú)明顯影響；而B(niǎo)、C、E、G組MST與A組比較均明顯延長(zhǎng)，有顯著性差異P005，顯示B7H1慢病毒抑制同種異體皮膚移植排斥反應(yīng)的能力較B7H1腺病毒為高，但慢病毒和腺病毒共轉(zhuǎn)染并無(wú)相加作用。