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      • 簡(jiǎn)介:目的采用差異熒光雙向凝膠電泳DIGE技術(shù)及質(zhì)譜技術(shù)篩選并鑒定乙型肝炎病毒HBV相關(guān)肝纖維化組織差異表達(dá)蛋白質(zhì),以期獲得肝纖維化早期診斷的分子標(biāo)志物以及潛在的藥物靶標(biāo),并為肝纖維化的病理發(fā)生機(jī)制研究提供思路。方法采用DIGE技術(shù)篩選CY3、CY5及CY2熒光素標(biāo)記的肝纖維化及正常肝組織差異表達(dá)蛋白質(zhì),并用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜MALDITOFMS或串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行鑒定并分析,對(duì)部分有潛在價(jià)值的差異表達(dá)蛋白質(zhì)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)從蛋白質(zhì)水平進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果共篩選出26個(gè)差異表達(dá)蛋白質(zhì)點(diǎn),其中在肝纖維化組織中15個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)上調(diào),11個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)下調(diào);上述26個(gè)蛋白差異點(diǎn)采用質(zhì)譜技術(shù)成功鑒定出19種蛋白質(zhì)。根據(jù)蛋白質(zhì)功能的不同,這些差異蛋白質(zhì)主要參與氧化應(yīng)激、分子伴侶、細(xì)胞骨架、能量代謝及信號(hào)傳導(dǎo)等過(guò)程;細(xì)胞角蛋白8、高遷移組蛋白B1、熱休克蛋白70等在HBV相關(guān)肝纖維化組織中高表達(dá);硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶、三磷酸腺苷合成酶、神經(jīng)多肽H3等在HBV相關(guān)肝纖維化組織中低表達(dá)。免疫組化驗(yàn)證結(jié)果表明肝纖維化組織熱休克蛋白70、細(xì)胞角蛋白8、高遷移組蛋白B1表達(dá)水平均高于正常肝組織,且表達(dá)水平隨纖維化程度進(jìn)展而上調(diào),與蛋白質(zhì)組分析的結(jié)果基本一致。結(jié)論蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)是篩選HBV相關(guān)肝纖維化組織差異表達(dá)蛋白質(zhì)有效方法。發(fā)現(xiàn)和鑒定出相關(guān)的蛋白質(zhì),可能成為潛在藥物靶標(biāo)以及早期診斷、治療的分子標(biāo)志物,同時(shí)也為HBV相關(guān)肝纖維化的病理機(jī)制研究提供了一個(gè)新的研究方法系統(tǒng)。
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      • 簡(jiǎn)介:四川大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)學(xué)位論文重組人P53腺病毒注射液聯(lián)合肝動(dòng)脈題目灌逵絲盟拴塞漁痘廈蕉絲旺堡作者地壟學(xué)科專(zhuān)業(yè)立厶藍(lán)魁掌指導(dǎo)教師宜逮控副茲攫鯽∞糾∞∞碼號(hào)代枝學(xué)學(xué)6NU3397甲四川大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文重組人P53腺病毒注射液聯(lián)合肝動(dòng)脈灌注化療栓塞治療原發(fā)性肝癌研究生孫龍導(dǎo)師官泳松副教授摘要目的評(píng)估重組人P53腺病毒基因RADP53瘤內(nèi)注射聯(lián)合經(jīng)皮肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)TACE治療中、晚期肝細(xì)胞肝癌的臨床療效。方法單用TACE、TACE聯(lián)合經(jīng)皮肝瘤體內(nèi)注入重組人P53腺病毒注射液RADP532種方法治療中晚期肝細(xì)胞肝癌共150例,其中采用經(jīng)皮肝瘤體內(nèi)注入RADP53后聯(lián)合TACE治療中晚期肝細(xì)胞肝癌68例P53組,并與同期病情相當(dāng)?shù)闹型砥诟渭?xì)胞肝癌單用TACE治療82例對(duì)照組相比較。結(jié)果P53組和對(duì)照組的有效率分別為676%和512%。P53組瘤體明顯縮小,兩組間有顯著性差異PO042005。P53組比對(duì)照組的癌性疼痛減輕程度明顯,差異顯著儼0017005。P53組與對(duì)照組治療后的KAMOFSKY評(píng)分有顯著性差異PO029O05。P53組的3月及半年生存率顯著高于對(duì)照組CPO01。結(jié)論重組人P53腺病毒注射液RADP53聯(lián)合TACE治療HCC,增強(qiáng)了抗癌效果,改善了患者的生存質(zhì)量。【關(guān)鍵詞】RADP53,肝動(dòng)脈灌注化療栓塞,原發(fā)性肝癌
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      • 簡(jiǎn)介:目的提取人低氧誘導(dǎo)因子1?。℉YPOXIAINDUCIBLEFACT1ALPHA,HIF1?。┑幕蚱危瑯?gòu)建攜帶HIF1Α的慢病毒,感染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS,BMSCS),通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)BMSCS中成骨因子表達(dá)情況。方法從HELA細(xì)胞中提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄生成CDNA。設(shè)計(jì)引物,以CDNA為模板,PCR擴(kuò)增HIF1Α基因,PCR產(chǎn)物純化后,經(jīng)雙酶切(BAMHI、PSPXI)后克隆至LVEGFP慢病毒質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞DH5Α,PCR方法篩選出基因重組陽(yáng)性菌,抽提質(zhì)粒獲得LVHIF1ΑEGFP對(duì)HIF1Α基因進(jìn)行測(cè)序鑒定。用構(gòu)建成功的HIF1Α慢病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293TA細(xì)胞,轉(zhuǎn)染48H后收集富含慢病毒的細(xì)胞上清液。將病毒原液梯度稀釋?zhuān)尤氲綔?zhǔn)備好的293TA細(xì)胞中,培養(yǎng)48H后倒置熒光顯微鏡下觀察帶熒光的細(xì)胞數(shù),計(jì)算出病毒滴度。取SD大鼠股骨及脛骨的骨髓,使用直接貼壁法分離培養(yǎng)大鼠BMSCS,通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察及流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)記物CD90、CD105對(duì)第3代BMSCS進(jìn)行鑒定。將病毒原液感染生長(zhǎng)狀態(tài)良好的BMSCS,72H后倒置熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分為3組用攜帶HIF1Α的慢病毒感染BMSCS作為實(shí)驗(yàn)組(簡(jiǎn)稱(chēng)HIF1ΑEGFPBMSCS組)、用不攜帶HIF1Α的慢病毒感染BMSCS作為空載體組(簡(jiǎn)稱(chēng)EGFPBMSCS組)、不進(jìn)行處理的BMSCS作為空白對(duì)照組(簡(jiǎn)稱(chēng)BMSCSWILDTYPE組)。各組分別于感染后1D、4D、7D、14D提取細(xì)胞總RNA,后反轉(zhuǎn)錄生成CDNA,設(shè)計(jì)引物,使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)BMSCS中成骨基因BMP2、OCN、OPN、ALP的表達(dá)水平。結(jié)果HIF1Α基因片段測(cè)序及載體質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物電泳結(jié)果表明LVHIF1ΑEGFP慢病毒載體質(zhì)粒構(gòu)建成功。HIF1Α慢病毒液轉(zhuǎn)染293TA細(xì)胞48H后,用孔稀釋計(jì)數(shù)法計(jì)算出病毒滴度為50107TUML。用流式細(xì)胞儀對(duì)大鼠BMSCS細(xì)胞表面標(biāo)記物CD90及CD105進(jìn)行檢測(cè),其陽(yáng)性率分別為998%、973。實(shí)時(shí)熒光定量PCR法結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組BMSCS中成骨基因BMP2、OCN、OPN、ALP表達(dá)水平較空載體組顯著提高(P<005)(1)實(shí)驗(yàn)組大鼠BMSCS中BMP2的表達(dá)水平在轉(zhuǎn)染后1D、4D、7D、14D分別為空載體組的296倍、685倍、648倍、617倍;(2)實(shí)驗(yàn)組大鼠BMSCS中OCN的表達(dá)水平在轉(zhuǎn)染后1D、4D、7D、14D分別為空載體組的250倍、533倍、713倍、707倍;(3)實(shí)驗(yàn)組大鼠BMSCS中OPN的表達(dá)水平在轉(zhuǎn)染后1D、4D、7D、14D分別為空載體組的244倍、498倍、627倍、732倍;(4)實(shí)驗(yàn)組大鼠BMSCS中ALP的表達(dá)水平在轉(zhuǎn)染后1D、4D、7D、14D分別為空載體組的227倍、443倍、581倍、538倍。結(jié)論成功構(gòu)建了攜帶HIF1Α基因的慢病毒載體,大鼠BMSCS培養(yǎng)成功。攜帶HIF1Α的慢病毒感染BMSCS后,能明顯提高成骨基因BMP2、OCN、OPN、ALP的表達(dá)水平,表明HIF1Α可以提高BMSCS的成骨活性。
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      • 簡(jiǎn)介:目的評(píng)估阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征OSAHS患者抑郁情緒、認(rèn)知功能和生活質(zhì)量狀況,探討其與多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)圖PSG主要指標(biāo)的關(guān)系。方法選擇2006年7月至2007年4月在蘭州大學(xué)第一醫(yī)院就診經(jīng)PSG確診的62例OSAHS患者和32例非OSAHS患者對(duì)照組采用抑郁自評(píng)量表SDS評(píng)估其抑郁情緒,采用生活質(zhì)量自評(píng)量表SF36評(píng)估其生活質(zhì)量狀況,應(yīng)用簡(jiǎn)易精神狀態(tài)法MMSE測(cè)定其認(rèn)知功能,利用愛(ài)潑沃斯思睡量表ESS評(píng)估患者白天嗜睡狀況。線形相關(guān)和多元逐步回歸分析PSG相關(guān)參數(shù)與抑郁評(píng)分、認(rèn)知功能評(píng)分及生活質(zhì)量評(píng)分的相關(guān)性及其相關(guān)程度。結(jié)果OSAHS組抑郁評(píng)分明顯高于對(duì)照組526±82、396±79,P001,與呼吸紊亂指數(shù)AHI和ESS評(píng)分正相關(guān)R值分別為0433、0347,P均005,與平均血氧飽和度MSAO2和最低血氧飽和度LSAO2負(fù)相關(guān)R分別為0368、0408,P均005;OSAHS組認(rèn)知功能評(píng)分低于對(duì)照組246±20、271±13,P0001,與AHI和ESS呈負(fù)相關(guān)R值分別為0855、0508,P0001,與MSAO2和LSAO2正相關(guān)R值為0355、0597,P值均001;OSAHS組生活質(zhì)量評(píng)分明顯低于對(duì)照組639±147、788±45,P0001,與AHI和ESS呈負(fù)相關(guān)R值分別為0522、0386,P001,與平均血氧飽和度MSAO2和最低血氧飽和度LSAO2呈正相關(guān)R值為0276、0262,P005。生活質(zhì)量與認(rèn)知功能評(píng)分呈正相關(guān)R0541P001,與SDS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)R0461,P005;OSAHS患者認(rèn)知功能評(píng)分與SDS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)R0505,P005。OSAHS患者的AHI、SDS評(píng)分及MMSE總評(píng)分與生活質(zhì)量總評(píng)分呈多重線性回歸關(guān)系。結(jié)論OSAHS患者存在著抑郁情緒障礙,同時(shí)存在著生活質(zhì)量和認(rèn)知功能明顯下降,夜間反復(fù)發(fā)作的低氧血癥是導(dǎo)致三者發(fā)生的主要原因。
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      • 簡(jiǎn)介:目的臨床上約5%~10%慢性肝病患者依據(jù)臨床表現(xiàn)、生化及血清學(xué)檢查仍不能明確病因,其中一部分忠者通過(guò)肝穿刺活檢和或血清HBVDAN檢測(cè),確診為隱匿性HBV感染OCCULTHEPATITISBVIRUSINFECTION。我國(guó)是乙型肝炎的高發(fā)區(qū),對(duì)隱匿性乙型肝炎應(yīng)引起重視。為此,本課題研究一組不明原因性肝炎患者隱匿性HBV感染情況并從基因變異角度研究HBV隱匿性感染的分子機(jī)制。方法1病歷選擇和血清收集不明原因性肝炎患者104例,收集臨床資料并清晨空腹靜脈采血。2模板制備分別用直接煮沸法、辛酸鈉法、蛋白酶K消化酚氯仿法、PEG8000法、辛酸鈉酚氯仿法、堿裂解法、柱抽提法,抽提血清中HBVDNA,比較各抽提方法的目的基因得率、靈敏度及重復(fù)性。尋找適合于HBV隱匿性感染模板制備方法。3引物設(shè)計(jì)HBV基因組不同區(qū)段分別設(shè)計(jì)2套巢式引物,比較擴(kuò)增效率,選擇擴(kuò)增效率高的引物。4巢式PCR擴(kuò)增,查出隱匿性HBV感染者。5HBVS、X區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序和變異位點(diǎn)分析,發(fā)現(xiàn)可能和HBV隱匿性感染有關(guān)的變異位點(diǎn)。結(jié)果1在7種不同的抽提方法中,辛酸鈉酚氯仿法在目的基因得率、靈敏度、重復(fù)性方面均優(yōu)于其它方法。2104例不明原因性肝炎患者中查出隱匿性HBV感染13例。3S基因區(qū)未發(fā)現(xiàn)有義突變,X基因區(qū)及重疊核心啟動(dòng)子區(qū)、增強(qiáng)子Ⅱ區(qū)發(fā)現(xiàn)多位點(diǎn)變異,可能與HBV隱匿性感染有關(guān)。結(jié)論辛酸鈉酚氯仿法在隱匿性HBV感染DNA檢測(cè)中有較好的效果。本組不明原因性肝炎病人中約有125%為隱匿性HBV感染。X基因區(qū)及重疊核心啟動(dòng)子區(qū)、增強(qiáng)子Ⅱ區(qū)多位點(diǎn)變異可能是HBV隱匿性感染的分子基礎(chǔ)。
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      • 簡(jiǎn)介:目的本實(shí)驗(yàn)旨在觀察中藥復(fù)方劑肝康顆粒體外抗乙型肝炎病毒和免疫調(diào)節(jié)作用為后續(xù)深入研究診斷剖心作用機(jī)制包括制劑工藝的優(yōu)化奠定基礎(chǔ)。要領(lǐng)方法制備肝康顆粒利用HEPG2215細(xì)胞模型采用MTT法和細(xì)胞凋亡染色實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)肝康顆粒的細(xì)胞毒性并觀察其量效關(guān)系通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法ELISA檢測(cè)乙肝病毒HBV中HBSAG和HBEAG的表達(dá)并用熒光定量PCR技術(shù)定量分析HBVDNA的復(fù)制濃度通過(guò)測(cè)定巨噬細(xì)胞吞噬功能和血清溶血素水平進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)功能研究。結(jié)果MTT法檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著濃度和時(shí)間的增加對(duì)HEPG2215細(xì)胞生長(zhǎng)活性影響增強(qiáng)。ELISA法測(cè)定IBV分泌到上清液中HBSAG和HBEAG的含量濃度越大抑制作用越強(qiáng)并且隨著作用時(shí)間的累加抑制效果相應(yīng)增強(qiáng)。在第3、6、9天GKGL降低HBSAG和HBEAG的治療指數(shù)TI均大于2顯示藥物低毒高效具有很好的安全性。實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比較肝康顆粒作用3、6、9、12天后均可使細(xì)胞上清液中HBVDNA的拷貝數(shù)降低P<005、P<001且呈現(xiàn)明顯的量效和時(shí)效關(guān)系。小鼠尾靜脈注射BCG和LPS后小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶顯著升高臟器指數(shù)增大表明造模成功。不同劑量的GKGL給藥組小鼠血清AST、ALT水平降低臟器損傷不同程度減輕對(duì)免疫性肝損傷有一定的保護(hù)作用。巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定結(jié)果顯示高、中劑量肝康顆粒對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能在一定程度上有明顯增強(qiáng)作用P<001促進(jìn)免疫性肝損傷小鼠的非特異性免疫功能。血清溶血素的測(cè)定結(jié)果顯示GKGL高、中劑量可以提高免疫性肝損傷小鼠的血清溶血素水平P<005P<001促進(jìn)小鼠的特異性體液免疫功能。結(jié)論肝康顆粒具有降低HBSAG和HBEAG抑制HBVDNA復(fù)制增強(qiáng)小鼠免疫功能的作用為后續(xù)的深入研究奠定基礎(chǔ)。
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      • 簡(jiǎn)介:目的人呼吸道合胞病毒HUMANRESPIRATYSYNCYTIALVIRUS,RSV廣泛分布于世界各地,是導(dǎo)致嬰幼兒嚴(yán)重下呼吸道感染最重要的病毒病原。目前尚無(wú)特異性防治方法,世界衛(wèi)生組織將發(fā)展RSV疫苗列為最優(yōu)先發(fā)展的疫苗項(xiàng)目之一。在RSV所編碼的11種蛋白中,融合蛋白FUSIONPROTEIN,F(xiàn)為跨膜糖蛋白,直接介導(dǎo)病毒與細(xì)胞的融合、病毒的穿入、合胞體的形成,而且F蛋白在RSV不同亞型間具有高度的抗原同源性,是主要的交叉保護(hù)性抗原,同時(shí)還有細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞CTL識(shí)別的抗原表位。本研究嘗試采用重組真核表達(dá)載體,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染COS7細(xì)胞表達(dá)RSVF蛋白,利用操作簡(jiǎn)易、純化效率高的NI柱親和層析法完成制備和純化,獲得高純度、G級(jí)的F蛋白,為進(jìn)一步的診斷試劑及疫苗等研究奠定基礎(chǔ)。方法根據(jù)編碼F蛋白的基因序列設(shè)計(jì)并合成引物,以本實(shí)驗(yàn)室保存的含有F基因的質(zhì)粒PGEM3ZFF為模板,利用PCR方法,擴(kuò)增出3端帶HIS標(biāo)簽和凝血酶裂解位點(diǎn)的F基因序列,克隆入PGEMTEASY載體,經(jīng)核酸序列分析后,進(jìn)一步克隆到真核表達(dá)載體PCDNA31,限制性?xún)?nèi)切酶鑒定,用脂質(zhì)體LIPOFECTAMINE2000轉(zhuǎn)染COS7細(xì)胞,48H后用RTPCR鑒定基因轉(zhuǎn)錄,72H后再用WESTERNBLOT和間接免疫熒光檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)和分布。NI柱親和層析法純化COS7細(xì)胞表達(dá)的F蛋白,高效毛細(xì)管電泳分析純化后蛋白純度。結(jié)果核酸序列分析證實(shí)獲得帶HIS標(biāo)簽的RSVF基因序列,沒(méi)有發(fā)生無(wú)義突變。真核表達(dá)載體PCDNA31FHIS的限制性?xún)?nèi)切酶分析結(jié)果與預(yù)期一致。轉(zhuǎn)染COS7細(xì)胞后,RTPCR檢測(cè)到F基因有轉(zhuǎn)錄,WESTERNBLOT分析觀察到F蛋白特異性的表達(dá)條帶,間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)觀察到F蛋白主要呈膜及胞漿分布。NI柱法FHIS蛋白純化回收率約為141%,高效毛細(xì)管電泳分析顯示純化后的F蛋白純度達(dá)99%以上。結(jié)論初步建立了RSVF蛋白真核表達(dá)及純化方法,為進(jìn)一步優(yōu)化RSVF蛋白制備條件及單克隆抗體及診斷試劑等研究奠定了基礎(chǔ)。
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      • 簡(jiǎn)介:第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文肝癌靶向調(diào)控SEACD80基因共表達(dá)腺病毒載體的構(gòu)建及抗癌免疫效應(yīng)的研究姓名司少艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師隋延仿20060401第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)德論文縮略語(yǔ)轟縮略詞AAAFPAPCABBPCDCEAC,TCT己DABDCD巨PC£乙LSAELISPOTEDTAFABFCSFLTCG4180MCSFHCE縮略語(yǔ)表莢文全稱(chēng)AMINOACIDALDH舢FOTALPMTEINANTI∽NPRCSENTINGC奄“ANTI釃DYBASE鶼I鼯CLUSTEROFDI蕊RENTIATIONCARCINOEMBLYONJCANTJGENCANCER仃ESTISE弦輛XICT酶M嬸OCY埒DIAMINOBEZIDINEDENDRITICCELIDIETHYLPYROCARBONATEENZYM靜LINKEDLMM雌。磚∞搬ONTASSAYEN搿MEWLINKEDIMMUNOSPOTETHYLENEDI踟INETETRAACETICACIDF豫GMENTANTIGENBINDINGFETALE8LFSENLMFLOU艙SCE遺LSO氌IOEYANA毛EGENITICINGRANULOCYTE,MACROPHAGECOLONYSIMULATNGFACTOFEPA鰳EE玨UL幫EA托IN諾鞋AI~中文全稱(chēng)氨基酸甲胎蛋白抗原遞呈細(xì)臌獲落堿基對(duì)分化抗原熊癌胚抗原腫瘤/睪丸摭原綴藏毒縫羊漤巴纓燕二氨摹聯(lián)苯氯樹(shù)突狀細(xì)胞焦碳酸己酯酶聯(lián)免疫吸囂章實(shí)驗(yàn)酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法乙二胺四Z酸抗原結(jié)合片斷穗牛盤(pán)渣霧硫氰酸熒必素氨基糖甙抗嫩紊粒一巨噬細(xì)J16L驤落刺激因子蒡手緩蕤瞧黔癌
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      • 簡(jiǎn)介:研究目的背景輪狀病毒感染是5歲以下兒童發(fā)生嚴(yán)重胃腸炎的主要原因,每年導(dǎo)致全球611000454000~705000兒童死亡主要分布在發(fā)展中國(guó)家,占5歲以下兒童死亡總數(shù)的5%。世界衛(wèi)生組織WHO將輪狀病毒疫苗的研發(fā)及人群應(yīng)用作為優(yōu)先發(fā)展的重要目標(biāo)。蘭州羊源輪狀病毒疫苗LLR由原衛(wèi)生部蘭州生物制品所研制,于1998年注冊(cè)用于預(yù)防兒童輪狀病毒胃腸炎,此減毒口服疫苗的推薦免疫程序?yàn)?月齡到3歲者每年服用1劑,35歲者服用1劑。目前關(guān)于此疫苗保護(hù)效果的數(shù)據(jù)極少,文獻(xiàn)檢索僅見(jiàn)血清學(xué)方面的描述,未見(jiàn)疫苗保護(hù)效果的報(bào)道,導(dǎo)致國(guó)際上對(duì)該疫苗的使用意義未達(dá)成共識(shí),未能推廣到更多的國(guó)家和地區(qū)使用,目前該疫苗只限于中國(guó)使用。故本研究的重點(diǎn)對(duì)LLR疫苗的保護(hù)效果進(jìn)行研究。目的探討LLR疫苗對(duì)廣州市兒童輪狀病毒胃腸炎的保護(hù)效果。研究材料和方法采用11匹配的病例對(duì)照研究。病例來(lái)源于廣州市兒童醫(yī)院2002年1月~2004年12月的診斷臨床實(shí)驗(yàn)室診斷的住院輪狀病毒胃腸炎兒童患者,對(duì)照為病例所在社區(qū)的健康者,根據(jù)①與病例住址接近同一居委或村內(nèi);②與病例年齡最近者相差一年內(nèi);③與病例性別相同;④戶(hù)口性質(zhì)相同或相近的匹配條件,以病例所在的預(yù)防接種機(jī)構(gòu)為單位進(jìn)行11的匹配選擇對(duì)照。調(diào)查方法是通過(guò)電腦搜集到病例及其對(duì)照,姓名、性別、年齡等基本信息以及輪狀病毒疫苗免疫接種信息,填寫(xiě)調(diào)查問(wèn)卷,再通過(guò)電話(huà)、走訪等形式查驗(yàn)預(yù)防接種記錄證來(lái)確認(rèn)是否接種輪狀病毒疫苗及接種次數(shù)、批號(hào)等免疫史的信息,完成調(diào)查表的信息。資料匯總后核對(duì),以EPIDATA31建立專(zhuān)用數(shù)據(jù)庫(kù),應(yīng)用SPSS130軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)算疾病與暴露因素LLR疫苗免疫接種之間聯(lián)系強(qiáng)度的指標(biāo)值及其95%可信限,疫苗保護(hù)效果VE1100%,得到LLR疫苗的保護(hù)效果及95%的可信限,進(jìn)一步分析不同年齡段及不同免疫劑次LLR疫苗的保護(hù)效果及其95%的可信區(qū)間。研究結(jié)果研究對(duì)象的一般情況共回收845份問(wèn)卷,其中838份合格,7份為邏輯錯(cuò)誤或匹配出現(xiàn)偏差。接種一劑次疫苗的病例組人數(shù)為101人,對(duì)照組人數(shù)為195人;接種二劑次疫苗病例組為0人,對(duì)照組為20人。全部研究對(duì)象中無(wú)接種三劑次以上者。因接種二劑次以上劑量的樣本量過(guò)少,不作統(tǒng)計(jì)分析,本文的分析數(shù)據(jù)為接種一劑次相對(duì)于零劑次的數(shù)據(jù)。輪狀病毒疫苗的保護(hù)效果全部研究對(duì)象不分年齡段中病例LLR疫苗接種史的比率為121%101838,對(duì)照中有預(yù)防接種史的比率為233%195838,病例組與對(duì)照組疫苗接種情況差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X283990,P0000,030495%CI02187~04226,疫苗保護(hù)效果為696%95%CI577%~781%。分年齡段分析0~11月齡病例組中有LLR疫苗預(yù)防接種史的比率為84%36431,對(duì)照組中有LLR疫苗預(yù)防接種史的比率為148%64431,病例組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X232558,P0000,040495%CI02410~06772,疫苗保護(hù)效果為596%95%CI574%~781%。12~23月齡病例中有LLR疫苗接種史的比率為167%51306,對(duì)照組中有預(yù)防接種史的比率為350%107306,病例組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X234148,P0000,021195%CI;01274~03498,疫苗保護(hù)效果為789%95%CI695%~967%。24~35月齡病例中有LLR疫苗接種史的比率為228%1357,對(duì)照組中有預(yù)防接種史的比率為351%2057,該年齡組的病例組與對(duì)照組接種比率的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X22602,P0107,0462,95%CI包括0,故疫苗的保護(hù)效果沒(méi)有參考意義。36十月齡病例組中有LLR疫苗接種史的比率為23%144,對(duì)照組中有預(yù)防接種史的比率為78%444,該年齡組的病例組與對(duì)照組疫苗接種比率的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X20102,P0749,0250,95%CI包括0,故疫苗的保護(hù)效果沒(méi)有參考意義。研究結(jié)論LLR疫苗對(duì)兒童輪狀病毒胃腸炎有中等程度的保護(hù)效果,因該疫苗價(jià)格偏貴148元支,故可在經(jīng)濟(jì)基礎(chǔ)較好的地區(qū)推廣使用。下一步需要繼續(xù)研究LLR疫苗對(duì)3歲以上者及接種2、3及4劑的保護(hù)效果以及影響疫苗效果的各種相關(guān)因素。
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      • 簡(jiǎn)介:了解安徽省醫(yī)務(wù)人員對(duì)國(guó)家基本藥物的認(rèn)知情況及影響因素為我省進(jìn)一步推廣使用國(guó)家基本藥物并制定符合我省實(shí)際情況的基本藥物行動(dòng)規(guī)劃提供必要依據(jù)方法采用分層整群抽樣的方法選取安徽省3所三級(jí)醫(yī)院、6所二級(jí)醫(yī)院的內(nèi)科、外科、婦產(chǎn)科、兒科和藥劑科科室對(duì)醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)問(wèn)卷調(diào)查所有資料采用EPIINFO60錄入用SPSS110進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)方法包括X2檢驗(yàn)、方差分析和LOGISTIC多因素回歸分析等結(jié)果1643%的醫(yī)務(wù)人員聽(tīng)說(shuō)過(guò)國(guó)家基本藥物其中有306的人參加過(guò)國(guó)家基本藥物知識(shí)的培訓(xùn)或?qū)W習(xí)2專(zhuān)業(yè)期刊、文件、學(xué)術(shù)講座和會(huì)議在醫(yī)務(wù)人員了解國(guó)家基本藥物的渠道中占主要地位603大眾媒體在醫(yī)務(wù)人員了解國(guó)家基本藥物的渠道中居次要地位3828的醫(yī)生知曉者在臨床中能夠首選國(guó)家基本藥物只有183的護(hù)士和藥學(xué)人員知曉者能夠經(jīng)常向醫(yī)生推薦使用國(guó)家基本藥物4642的知曉者認(rèn)為使用國(guó)家基本藥物在很大程度上能夠促進(jìn)合理用藥5只有163的知曉者經(jīng)常向患者宣傳國(guó)家基本藥物6影響醫(yī)務(wù)人員知道國(guó)家基本藥物的有專(zhuān)業(yè)、職稱(chēng)、學(xué)歷、科室工作年限和是否參加過(guò)國(guó)家基本藥物知識(shí)培訓(xùn)等結(jié)論國(guó)家基本藥物概念在醫(yī)務(wù)人員中已經(jīng)在一定程度上得到普及但是醫(yī)務(wù)人員對(duì)于國(guó)家基本藥物的認(rèn)識(shí)水平仍然偏低不同科室醫(yī)務(wù)人員的基本藥物知曉率參差不一醫(yī)務(wù)人員接受?chē)?guó)家基本藥物知識(shí)培訓(xùn)的次數(shù)偏少時(shí)間較短醫(yī)務(wù)人員向患者宣傳國(guó)家基本藥物的力度不夠護(hù)士和藥學(xué)人員在推廣國(guó)家基本藥物方面缺乏與醫(yī)生的溝通建議進(jìn)一步完善推行國(guó)家基本藥物的政策措施加大國(guó)家基本藥物的宣傳、培訓(xùn)和教育力度注重更新醫(yī)務(wù)人員的臨床用藥知識(shí)制訂標(biāo)準(zhǔn)治療指南和良好處方集完善藥品流通體制制訂合理的醫(yī)療機(jī)構(gòu)補(bǔ)償政策推動(dòng)合理用藥和基本藥物的使用
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      • 簡(jiǎn)介:四川大學(xué)博士學(xué)位論文攜帶人NIS基因和TPO基因的重組腺病毒聯(lián)合轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞介導(dǎo)放射性碘攝取和有機(jī)化的基礎(chǔ)研究姓名黃蕤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師匡安仁200505012002級(jí)博士研究生學(xué)位論文黃蕤縮略詞表英文縮寫(xiě)英文全稱(chēng)中文全稱(chēng)NISSODIUMIODIDESYMPORTER鈉碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)體TPOTHYROPEROXIDASE甲狀腺過(guò)氧化物酶RTREVERSETRANSCRIPT逆轉(zhuǎn)錄PCRPOLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈反應(yīng)MMLVMOLONEYMURINELEUKEMIAVIRUS莫洛尼鼠白血病病毒XGAL5BROMO一4CHLORO一3INDOYL0DGALACTOSIDE5溴4氯3口自哚一BD半乳糖1IPTGISOPROPYLTHIOBDGALACTOSIDE異丙基硫代0D半乳糖苷DMSODIMETHYLSULPHOXIDE二甲基亞砜TCATRICHLOROACETIEACID三氯乙酸CMVCYTOMEGALOVIRUS巨細(xì)胞病毒GFPGREENFLUORESCENTPROTEIN綠色熒光蚩白ITRINVERTEDTERMINALREPEAT末端反向重復(fù)RPMREVOLUTIONPERMINUTE每分鐘轉(zhuǎn)速CPMCOUNTPERMINUTE每分鐘計(jì)數(shù)BPBASEPAIR堿基對(duì)KBKILOBASEPAIR千堿基對(duì)KDKILODALTON千道爾頓SDSSODIUMDODECYLSULFATE十二烷基硫酸鈉PAGEPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHORESIS聚丙烯酰胺凝膠電泳TEMEDN,N,N’,N’4ETRAMETHYLETHYLENEDIAMINE四甲基乙二胺APSAMMONIUMPERSULFATE過(guò)硫酸銨HRPHORSERADISHPEROXIDASE辣根過(guò)氧化物酶MOIMULTIPLYOFINFECTION感染復(fù)數(shù)
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